Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.25
no.3
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pp.30-34
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2023
White leg shrimps which were cultured in a private aquaculture farm showed abnormal swimming behavior and appetite reduction in July 2023. Then, gradual mortality was observed in the aquaculture farm. During the diagnosis, bacterial strain KNUAFVaSHP08147 was isolated from the hepatopancreas of the dead shrimps. Based on the sequence of 16S rRNA gene, KNUAFVa-SHP08147 was proved to be Vibrio alginolyticus, showing 99.71 % nucleotide identity with that of V. alginolyticus MG54 and GS MYPK1. According to the result of the growth of KNUAFVa-SHP08147, the treatment a commercial disinfectant, VirkonTMS was not proved to be effective to prohibit the growth of Vibrio.
Mass mortality of the horned turban shell, Batillus cornutus was investigated using histological and bacteriological methods. Some pathogenic bacteria were isolated from mortal or inactive individuals. The pathogenic agents causing mortality of the horned turban shells were as Vibrio alginolyticus and V. anguillarum. Laboratory experiment indicated that optimal growth temperature of two bacteria was 25 to 30$^{\circ}C$ and 3% of NaCl. Histological examination of the horned turban shells showed that gill necrosis is one of the major symptom of infected individuals. It was believed that sudden increase of those two bacterial agents due to environmental change cause mortality of horned turban shells.
A lot of cultured flounders died by ascitic disease blooming during the summer season in 2002, southern parts of Korea. This study was conducted to investigate the microbial flora for the ascitic cultivated olive flounder (Paralichthys olivaceus) which were collected in the Koe-je island in the southern of Korea from July 2002 to October 2003. Three Genera (Vibrio, Photobacterium and Edwardsiella), seven species of bacteria (V. harveyi, V. alginolyticus, V. parahaemolyticus, V. carcariae, V. metschenikovii, P. damsela and E. tarda) and a fish pathogenic birnavirus (marine birnavirus, MABV) were isolated from the liver, dropsy, spleen and identified by biochemical and molecular biological characterization.
The energetics at the succinate:quinone oxidoreductase segment of V. alginolyticus was studied using a fluorescence quenching technique with inside-out membrane vesicles. A transient generation of the membrane potential (inside-positive) and ${\Delta}pH$ (inside-acidic) occurred in the presence of KCN and succinate when ubiquinone-1 (Q1) was added. The membrane potential (\Delta\psi$) generated by the succinate; quinone oxidoreductase segment was completely collapsed by the protonophore carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP) and the membrane permeable anion $SCN^{-}$, whereas the ${\Delta}pH$ was completely collapsed by CCCP and $(NH_4)_2SO_4$. From these results, it was concluded that the succinate: quinone oxidoreductase segment as well as quinol oxidase [1] in the respiratory chain of V. alginolyticus generated $H^{+}$ electrochemical potential.
Vibrio species are generally recognized as pathogens predominant in seafood along coastal areas. The food industry has sought to develop efficient microbial detection methods. Owing to the limits of conventional methods, this study aimed to establish a rapid identification method for Vibrio isolated from Korea, based on matrix-assisted laser-desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Four different preparation procedures were compared to determine the appropriate means to pretreat Vibrio species, using 17 isolates and five reference strains. Extended direct transfer and full formic acid extraction methods using bacterial colonies on agar plates revealed very low identification rates. Formic acid and trifluoroacetic acid (TFA) extractions using bacterial broth cultures were also performed. All Vibrio isolates and reference strains prepared by TFA extraction were successfully identified to the species level (17/22, 77.3%) and to the genus level (5/22, 22.7%). Thus, TFA extraction was considered the most appropriate method to pretreat Vibrio species for MALDI-TOF MS. The remaining 33 isolates and two reference strains were prepared by TFA extraction and analyzed by MALDI-TOF MS. Overall, 50 isolates were identified to the species level (40/50, 80%) and to the genus level (10/50, 20%). All isolates were identified as 43 V. alginolyticus, six V. parahaemolyticus, and one V. vulnificus species. V. alginolyticus and V. parahaemolyticus were isolated from fish offal (87.5% and 12.5%, respectively), seawater (91.3%, 8.7%), and shellfish (62.5%, 37.5%), whereas V. alginolyticus and V. vulnificus were isolated from sediment (90.9% and 9.1%, respectively). This study established a reliable system of MALDI-TOF MS preparation and analysis for Vibrio identification.
The aerobic respiratory chain of Vibrio alginolyticus possesses two different kinds of NADH oxidase systems, i.e., an $Na^{+}$-dependent NADH oxidase system and an $Na^{+}$-independent NADH oxidase system. When deamino-NADH, which is the only substrate for the $Na^{+}$-dependent NADH oxidase system, was used as a substrate, the maximum activities of $N^{+}$-dependent NADH: quinone oxidoreductase and $Na^{+}$-dependent NADH oxidase were obtained at about 0.06 M and 0.2 M NaCl, respectively. When NADH, which is a substrate for both $Na^{+}$-dependent and $Na^{+}$-independent NADH oxidase systems was used as a substrate, the NADH oxidase activity had a pH optimum at about 8.0. In cGntrastl when deamino-NADH was used as a substrate, the NADH oxidase activity had a pH optimum at about 9.0. On the other handle inside-out membrane vesicles prepared from the wild-type bacterium generated only a very small $\Delta$pH by the NADH oxidase system, whereas inside-out membrane vesicles prepared from Napl, which is a mutant defective in the $Na^{+}$ pump, generated $\Delta$pH to a considerable extent by the NADH oxidase system. On the basis of the results\ulcorner it was concluded that the respiratory chain-linked components of V. atginotyticus affect each other.
Distribution of Vibrio parahaemolyticus in the Tegillaria granosa Linne in Costal area Inchun. The survey has been done chiefly from the Inchun Sea ports during 5 months from Oct. 1974 to May 1975. 1. The number of Vibrio parahaemolyticus isolated 17(13.8%) of 117 specimens from Anadara Subcrenata. 2. The number of Vibrio alginolyticus isolated 92 strains of 119 specimens from Tegillaria granosa Linne. 3. Bacteriological characterigation such as morphological, ecological, biochemical results of 17 isolated strain has been identified the category of typical Vibrio parahaemolyticus differentiation. 4. Most of Kanagawa positive strains was positive in Greig test, and considerable number of Kanagawa negative strains was also positive. The result of Greig test was almost the same between cultures in brain heart infusion broth and brain heart infusion agar. 5. Kanagawa positive strains showed same lethal activity in inoculated mice into peritoreal cavity as compared with Kanagawa negative strain.
For development of functional food, antibacterial effect of Poncirus trifoliata juice was examined. Strong antibacterial activities of Poncirus trifoliata juice were observed aginst Gram positive and negative pathogenic bacteria such as Baillus cereus, Bacillus subtilis, Corynebacterium zerosis, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Rhodococcus equi, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio alginolyticus, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vnlnificus and Yersinia enterocolitica. The minimum inhibitory concentration(MIC) of Poncirus trifoliata juice against Bacillus cereus. Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Rhodococcus equi, Staphylococcus epidermidis, Citrobacter freundil and Pseudomonas aeruginosa was 2.5% and the MIC against Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus, Vibrio vulnificus and Yersinia enterocolitica was 1.25%. Also, antibacterial activities of Poncirus trifoliata juice treated for 15 min at 121$^{\circ}C$ were confirmed to be stable.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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