This study aimed to develop a semi-nested polymerase chain reaction assay for the direct detection of Mycoplasma synoviae (M. synoviae) from clinical samples using three newly designed oligonucleotide primers specific to the variable lipoprotein haemagglutinin (vlhA) gene and differentiate M. synoviae field strains based on a nucleotide deletion or the insertion of the proline-rich repeat (PRR) region of the vlhA gene. The developed semi-nested polymerase chain reaction (PCR) assay revealed positive results in 12 out of 100 clinical samples collected from chickens showing lameness and joint swelling. Six positive samples were selected randomly for sequencing, and sequence analysis revealed 96.3-100% nucleotide identities compared to the reference sequences. Phylogenetic analysis showed that sequences of the strains in this study were closely related to WVU1853 (Spain), CK.MS.UDL.PK.2014.2 (Pakistan), and F10-2AS (USA) strains, but they were distinct from the M. synoviae-H vaccine strain sequence. M. synoviae obtained from these samples were identified as types A and C with a length of 38 and 32 amino acids, respectively. These results indicated that the specific and sensitive semi-nested PCR could be a useful diagnostic tool for the direct identification of clinical samples, and the sequence analysis of the partial vlhA gene can be useful for typing M. Synoviae.
Olive flounder (Paralichthys olivaceus) is the major species developed for aquaculture in South Korea. Over the long history of olive flounder aquaculture, complex and diverse diseases have been a major problem, negatively impacting industrial production. Vibriosis is a prolific disease which continuously damages olive flounder aquaculture. A bacterial disease survey was performed from January to June 2017 on 20 olive flounder farms on Jeju Island. A total of 1710 fish were sampled, and bacteria from the external and internal organs of 560 fish were collected. Bacterial strains were identified using 16 s rRNA sequencing. Twenty-seven species and 184 strains of Vibrio were isolated during this survey, and phylogenetic analysis was performed. Bacterial isolates were investigated for the distribution of pathogenic and non-pathogenic species, as well as bacterial presence in tested organs was characterized. V. gigantis and V. scophthalmi were the dominant non-pathogenic and pathogenic strains isolated during this survey, respectively. This study provides data on specific Vibrio spp. isolated from cultured olive flounder in an effort to provide direction for future research and inform aquaculture management practices.
Mi Seon Kang;Woo Ri Jung;Seung Hyuck Yang;Keum Suk Chu
Korean Journal of Veterinary Service
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v.47
no.1
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pp.9-17
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2024
Porcine epidemic diarrhea (PED) is a highly contagious enteric viral disease of pigs with watery diarrhea in piglets, which ultimately results in huge economic losses in the swine industry. The spike (S) protein plays an important role in viral pathogenicity, tissue tropism, infection, dissemination and the trypsin-dependent proliferation of the PED virus (PEDV). In the present study, we determined the full-length spike (S) gene sequences of twenty PEDV field strains detected in Jeonbuk province in 2022. Phylogenetic analysis showed that the twenty PEDV field strains were classified into G2b group and shared 98.6~100% of nucleotide homology and 97.4~100% of amino acid homology with each other. Mutations of amino acid sequences on the neutralizing epitope of S protein were observed in the twenty field strains compared to the previous vaccine strain SM-98-1 (G1a group). Therefore, these amino acid mutations in the PEDV S protein may result in a new genotype of the virus and highly pathogenic virus, so continuous monitoring is required.
Newcastle disease virus (NDV) is a single-stranded negative sense RNA virus, which has been classified as a member of the Avulavirus genus of the Paramyxoviridae family. It is also one of the most important pathogens in the poultry industry. The glycoproteins, fusion (F) and hemagglutinin-neuraminidase (HN), determine the virulence of NDV, and the relevant molecular structures have already been determined. NDV isolates differ in terms of virulence, and at least 2 of 9 genotypes (I-IX) have been shown to co-circulate. Therefore, it is clearly important to differentiate between vaccine strains and field isolates. In vivo pathogenicity tests have been the standard protocol for some time, but molecular methods appear preferable in terms of the rapidity of diagnosis, as well as animal welfare concerns. In this study, we have designed primer sets from HN gene for phylogenetic analysis and restriction enzyme analysis, and from F gene for pathotype-specific RT-PCR. Via the combination of 2 methods, 106 Korean NDV isolates obtained from 1980 to 2005 were differentiated into vaccine strains, and virulent genotypes VI and VII. The genotype VI viruses were only rarely isolated after 1999, and genotype VII, after it was initially isolated from poultry in 1995, recurred in 2000, and then became the main NDV constituting a threat to the Korean poultry industry.
Three types of serotypically atypical Shigella flexneri isolates were collected between 2007 and 2008 from Korean patients at the Korea National Institute of Health (NIH). These atypical isolates were characterized and compared with serologically typical S. flexneri. The first grouping of 11 atypical isolates displayed agglutination only with polyB antiserum and exhibited no reaction with any typing or grouping sera (PolyB:un). The second group of 3 isolates displayed reactions with typing sera IV, but also did not bind with any grouping sera (IV:un). The third group of 14 isolates exhibited a plural agglutination pattern, reacting with typing sera II, and two grouping sera (II:(3)4,7(8)). Amongst these atypical isolates, isolates belonging to IV:un and II:(3)4,7(8) exhibited greater antibiotic resistance, in particular to ampicillin, streptomycin, and trimethoprim-sulfamethoxazole, than typical S. flexneri strains. Furthermore, all II:(3)4,7(8) strains harbored integrons. This study suggests that these multiple antibiotic-resistant atypical S. flexneri are new subserotypes of S. flexneri that await further serological classification.
Purpose : Adverse events(AE) associated with vaccination have not been systematically monitored in Korea. But since 1994, several deaths after inactivated mouse brain derived Japanese encephalitis vaccine injection arouse the safety problem of immunization in the public, and a evaluation of vaccination program including the effectiveness and safety problem had been started. We have been using MMR vaccine containing Japanese mumps vaccine strains, which are known to be associated with the high rate of adverse events including aseptic meningitis, for the last decade. Methods : We conducted a prospective study of vaccine adverse events associated with MMR vaccine through a tracking system using telephone calls. We followed up 7,594 cases of MMR vaccinees. Results : Reported adverse events included fever, couvulsion, parotitis, and aseptic meningitis. Nine cases of parotitis and seven cases of aseptic meningitis were recognized during follow up period. The incidence of both parotitis and aeptic meningitis was $85.1/10^5$, for Urabe mumps strain. For Hoshino strain, the incidence of parotitis and aseptic meningitis was $158.0/10^5$ and $94.8/10^5$, respectively. Conclusions : The incidence of adverse events was to be a higher than that of natural infection in Korea and was comparable to the results of studies done in other countries.
Objectives: Mellitine, a major component of bee venom (BV, Apis mellifera), is more active against gram positive than gram negative bacteria. Moreover, BV has been reported to have multiple effects, including antibacterial, antivirus, and anti-inflammation effects, in various types of cells. In addition, wasp venom has been reported to have antibacterial properties. The aim of this study was to evaluate the antibacterial activity of BV against selected gram positive and gram negative bacterial strains of medical importance. Methods: This investigation was set up to evaluate the antibacterial activity of BV against six grams positive and gram negative bacteria, including Staphylococcus aureus (S. aureus), Salmonella typhimurium, Escherichia coli (E. coli) O157:H7, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei. Three concentrations of crude BV and standard antibiotic (gentamicin) disks as positive controls were tested by using the disc diffusion method. Results: BV was found to have a significant antibacterial effect against E. coli, S. aureus, and Salmonella typhyimurium in all three concentrations tested. However, BV had no noticeable effect on other tested bacteria for any of the three doses tested. Conclusion: The results of the current study indicate that BV inhibits the growth and survival of bacterial strains and that BV can be used as a complementary antimicrobial agent against pathogenic bacteria. BV lacked the effective proteins necessary for it to exhibit antibacterial activity for some specific strains while being very effective against other specific strains. Thus, one may conclude, that Apis mellifera venom may have a specific mechanism that allows it to have an antibacterial effect on certain susceptible bacteria, but that mechanism is not well understood.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.11a
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pp.61-67
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1994
One fundamental problem in developing an AIDS vaccine is antigenic variation of HIV. Despite a substantial induced immune response in gp120-immunized monkeys and humans, high titers of V3-directed type specific neutralizing antibodies may not be sufficient to neutralize continuously emerging new isolates. Several studies analyzing anti-gp120 antibodies in HIV-infected individuals have clearly indicated that most broadly neutralizing antibodies are directed to conformation-dependent epitopes. Therefore, it seems important to evaluate the potential efficacy of candidate gp120 vaccines at inducing such antibodies, that might be potentially protective against multiple HIV strains. One concern in the development of any recombinant protein as a vaccine is its stability when mixed with an adjuvant. This could be a particularly important factor for recombinant gp120, given the conformational nature of its major, broadly neutralizing, epitopes. We hypothesized that gp120 complexed with recombinant CD4 could stabilize the conformation-dependent epitopes and effectively deliver these epitopes to the immune system. In this study, a soluble gp120-CD4 complex in Syntex Adjuvant Formulation was tested in mice to analyze the anti-gp120 antibody response. With the aim of defining the fine specificity and neutalizing activities of the immune response, 17Mabs were generated and characterized. The studies indicate that the gp120-CD4 complex elicits neutralizing anti-gp120 antibodies, most of which are directed to the conformation dependent epitopes.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.16
no.1
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pp.83-89
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1981
Japanese encephalitis has been prevalent for long time in the Far East and many patients have been reported in both South East and Mid-West Asia recently. Recently, vaccine was used in prevention of this viral disease of man which was derived from formalin inactivated virus inoculated into mouse brain, but live attenuated active vaccine for human is not developed yet. Author inoculated Japanese encephalitis virus into several cell culture strains for development of live attenuated encephalitis virus strain and the results were as follows: 1. Japanese encephalitis virus was inactivated rapidly in cell free medium at $36^{\circ}C$ and totally inactivated by 72 hours. 2. In growth curve of Japanese encephalitis virus in HeLa cell cultures, maximal multiplication of the virus was occured at 4th day and virus multiplication was continued for at least 12 days. 3. After succeeding passage of the virus in HeLa cell cultures and human esophagus epithelial cell cultures, infectivity of virus for mice was disappeared from 2nd passage in HeLa cell cultures and 3rd passage in esophagus epithelial cell cultures. 4. In inoculation to monkey kidney epithelial cells and chick embryo cell cultures, infectivity of the virus for mice was continued after 10th passages.
Porcine epidemic diarrhea (PED) is characterized by acute enteritis, watery diarrhea, weight loss, dehydration, and death with high mortality in neonatal piglets. In this study, 3 virus isolates collected in Vietnam between 2016 and 2017 were successfully propagated in Vero cells at high virus titers. Sequence analysis of the full-length spike (S) gene revealed that all 3 isolates belong to genogroup 2a, which is closely related to other prevalent Asian strains. Amino acid sequence comparisons revealed 98.19% to 99.13% homology with the Vietnam isolates circulating during 2013-2015, suggesting that field PED viruses (PEDVs) evolve continuously. Experiments in animals demonstrated that antisera from guinea pigs immunized with the vaccine strain resulted in higher levels (5 log2) of neutralizing antibody against the homologous strain, and showed a relatively lower level of neutralizing antibody against the field isolates. This finding would be helpful in choosing a PEDV strain for vaccine development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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