Sertoli cells in the normal adult testis are nondividing cells, which are relatively inconspicuous on cross section of the seminiferous tubule and comprise about 10% to 15% of the tubular cellular elements. Ultrastructurally, Sertoli cells have characteristic nucleoli, plasma membrane, and cytoplasmic components. The plasma membrane has two types of intercellular junctions which are developed at puberty: junctions between adjacent Sertoli cells and Sertoli cell-germ ceil junction. However, the ultrastructural findings of Sertoli cells in human fetus is not fully elucidate yet. In the present study, human fetal testes ($14\sim27$ weeks) obtained from artificially induced abortions legally without gross malformation were studied using transmission electron microscopy to make clear the differentiation process of Sertoli cells in human. In human fetal testes from 14 weeks to 27 weeks, the cell junctions of Sertoli-germ cells and Sertoli-Sertoli cells are desmosome like structure and not tight junction or desmosome. The Overall intracytoplasmic organelles of Sertoli cells are relatively sparse. The mitochondrias are relatively abundant but no developed cristae. And the rough endoplasmic reticuli are abundant and smooth endoplasmic reticuli are sparse. The amount of lipid droplets are regularly observed in human fetal Sertoli cells. No microfilaments or Charcot-Bottcher's crystalloids are present. From the results, Sertoli cells in human fetal testes are somewhat different ultrastructural findings with puberty or adult. However, to make clear the differentiation process of Sertoli cells in human, further study for 28 weeks to puberty is required.
Journal of Korean Academy of Oral and Maxillofacial Radiology
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v.21
no.2
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pp.183-197
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1991
After single fraction of 2, 5, 10 Gy irradiation on submandibular gland of 40 male rats, weighing 150gm, respectively, these animal were sacrificed two hours after 0.1㎎/g bromodeoxyuridine (Sigma) peritoneal injection in 1, 3, 7, 15 hours, 1, 3, 7 days after irradiation. And excised submandibular gland were fixed in Carnoy's and Bouin's solution for 2 hours. Paraffin sections were stained with H&E, and PAS for the observation of the change of salivary gland tissue, and with Feulgen for the study of the DNA distribution, and immunohistochemically stained with anti-bromodeoxyuridine (Sanbyo Co.) for detection of DNA synthetic cells in order to study the distribution of DNA synthetic cells of salivary gland tissue and endothelium after irradiation in 5 different sites of 6 slides on X 200 high power field. The results were as followings. 1. In PAS staining 3 days after 5Gy irradiation, decreased mucine secretion of serous cells were found, and 7 days after l0Gy irradiation, decreased mucine secretion of mucous cells were found. 2. In histopathologic features, degeneration of serous cells were found in 3 days after 2 Gy irradiation and there was little change in mucous cells and excretory duct cells. 3. In Feugen staining, 3 days after 2 Gy, 5 Gy irradiation, more high percentage of DNA synthetic cells were found in intercalated duct cells, striated duct cells and excretory duct cells than in BrdU staining. 4. In immunohistochemical features, DNA synethsis of serous cells and granular convoluted tubular cells abruptly decreased in early period after irradiation and showed no recovery in 7 days after irradiation but there was an increase in DNA synthesis of intercalated duct cells, striated duct cells and excretory duct cells, which have less S-phase cells comparatively, in 7 days after 2 Gy, 5 Gy irradiation. 5. In immunohistochemical features, the DNA synthesis of endothelial cells was continuously decreased after irradiation but showed slight increase in 7 days after 2 Gy and S Gy irradiation.
Park, In-bum;Ahn, Chang-beohm;Jang, Kyung-jeon;Song, Choon-ho;Yoon, Hyoun-min;Kim, Cheol-hong
Journal of Acupuncture Research
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v.21
no.3
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pp.1-12
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2004
Objective: This study was undertaken to evaluate the role of lipid peroxidation in oxidant-induced apoptosis and effect of JS on the apoptosis in opossum kidney (OK) cells, an established renal proximal tubular cells. Methods : Exposure of cells to 0.1mM tBHP for 2hr did not induce apoptosis, but subsequent incubation in normal culture medium for 18hr after tBHP treatment induced apoptotic cell death which is dependent of tBHP concentration. Results : JS decreased tBHP-induced apoptotic cell death in a dose-dependent fashion and at concentrations higher than 0.01 mg/ml completely prevented the apoptosis. tBHP-induced apoptosis was prevented by the lipid soluble antioxidant N,N'-diphenyl-p-phenylenediamine (DPPD) and water-soluble antioxidant Trolox. tBHP increased lipid peroxidation, which was inhibited by JS and DPPD. tBHP-induced DNA damage was prevented by JS and DPPD. Conclusion : These results indicate that tBHP induces apoptosis through a lipid peroxidation-dependent mechanism and JS exerts the protective effect against the apoptosis by preventing peroxidation of membrane lipids.
Autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) is characterized by formation of multiple fluid-filled cysts that expand over time and destroy renal architecture. The proteins encoded by the $PKD1$ and $PKD2$ genes, mutations in which account for nearly all cases of ADPKD, may help guard against cystogenesis. Previously developed mouse models of $PKD1$ and $PKD2$ demonstrated an embryonic lethal phenotype and massive cyst formation in the kidney, indicating that $PKD1$ and $PKD2$ probably play important roles during normal renal tubular development. However, their precise role in development and the cellular mechanisms of cyst formation induced by $PKD1$ and $PKD2$ mutations are not fully understood. To address this question, we presently created $Pkd2$ knockout and $PKD2$ transgenic mouse embryo fibroblasts. We used a mouse oligonucleotide microarray to identify messenger RNAs whose expression was altered by the overexpression of the $PKD2$ or knockout of the $Pkd2$. The majority of identified mutations was involved in critical biological processes, such as metabolism, transcription, cell adhesion, cell cycle, and signal transduction. Herein, we confirmed differential expressions of several genes including aquaporin-1, according to different $PKD2$ expression levels in ADPKD mouse models, through microarray analysis. These data may be helpful in $PKD2$-related mechanisms of ADPKD pathogenesis.
Cisplatin, a platinum-complex, is currently one of the most effective compounds used in the treat-ment of solid tumors. However, its use is limited by severe side effects such as renal toxicity. Our platinum-based drug discovery program is aimed at developing drugs capable of diminishing toxicity and improving selective cytotoxicity. We synthesized new Pt (II) complex analogue containing 1,2-diaminocyclohexane (DACH) as carrier ligand and 1,2-bis (diphenylphosphino) ethane (DPPE) as a leaving group. Furthermore, nitrate was added to improve the solubility. A new series of [Pt(cia-DACH)(DPPE)] . $2NO_3$ (PC) was synthes-ized and characterized by their elemental analysis and by various spectroscopic techniques [infrared (IR), $_{13}$carbon nuclear magnetic resonance (NMR)] .PC demonstrated acceptable and significant antitumor activity against SKOV-3 and OVCAR-3 human ovarian carcinoma cell lines as compared with that of cisplatin. The cytotoxicity of PC in normal cells was found quite less than that of cisplatin using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), ($^3$H)thymidine uptake and glucose consumption tests in rabbit renal proximal tubular cells, human renal cortical cells and tissues. In conclusion, PC is considered to be more selective cytotoxicity toward human ovarian cancer cells than normal human/rabbit kidney cells.
The tube formation assay is a widely used in vitro experiment model to evaluate angiogenic properties by measuring the formation of tubular structures from vascular endothelial cells (ECs). In vitro experimental results are crucial when considered the advisability of moving forward to in vivo studies. Thus, the additional attentions to the in vitro assay is necessary to improve the quality of the pre-clinical data, leading to better decision-making for successful drug discovery. In this study, we improved the tube formation assay system in three aspects. First, we used human endothelial colony forming cells (ECFCs), which are endothelial precursors that have a robust proliferative capacity and more defined angiogenic characteristics compared to mature ECs. Second, we utilized a real-time cell recorder to track the progression of tube formation for 48 hours. Third, to minimize analysis error due to the limited observation area, we used image-stitching software to increase the microscope field of view to a $2{\times}2$ stitched area from the $4{\times}$ object lens. Our advanced tube formation assay system successfully demonstrated the time-dependent dynamic progression of tube formation in the presence and absence of VEGF and FGF-2. Vatalanib, VEGF inhibitor, was tested by our assay system. Of note, $IC_{50}$ values of vatalanib was different at each observation time point. Collectively, these results indicate that our advanced tube formation assay system replicates the dynamic progression of tube formation in response to angiogenic modulators. Therefore, this new system provides a sensitive and versatile assay model for evaluating pro- or anti-angiogenic drugs.
Histochemical characteristic and ultrastructure of the mantle of the granular ark, Tegillarca granosa are described using light and electron microscopy. The mantle of the clam is composed of outer epidermis, connective tissue and inner epidermis. The simple epidermis consists of supporting cells, ciliated cells of the two types and secretory cells of three types. Connective tissue is composed of matrix, collagen fibers, muscular fibers and hemolymph sinus. The columnar supporting cell is covered with microvilli on the free surface. Ciliated cells are distributed in the inner epidermis with numerous cilia, microvilli and tubular mitochondria. Secretory cells could be classified into three types (A, B and C) with morphological features of the secretory granules. Type A secretory cells contains secretory granules with fibrous materials of high electron density Type B secretory cells are more abundant than the other cells, and contains secretory granules of membrane-bounded and high electron density. Secretory granules of the type C cells are divided into fibrous core layer and homogeneous peripheral layer. Type B secretory cells are abundant in the both epidermis of marginal mantle, while large number of type A and C secretory cells are evident in the outer epidermis of the central and umbonal mantle. This result showed that the outer and the inner epidermis of the mantle are related with shell formation and cleaning of the mantle cavity, respectively.
Vasculogenic mimicry (VM) refers to the unique ability of highly aggressive tumor cells to mimic the pattern of embryonic vasculogenesis, which was associated with invasion and metastasis. The grape seed proanthocyanidins (GSPs) had attracted much attention as a potential bioactive anti-carcinogenic agent. However, GSPs regulation of VM and its possible mechanisms in a triple-negative breast cancer cells (TNBCs) remain not clear. Therefore, we examined the effect of GSPs on VM information in HCC1937 cell model. In this study, we identified the VM structure via the three-dimensional (3D) matrix in vitro. Cell viability was measured using the CCK8 assay. The effects of GSPs on human triple-negative breast cancer cells (TNBCs) HCC1937 in terms of related proteins of VM information were determined using western blot analysis. In vitro, the tubular networks were found in highly invasive HCC1937 cells but not in the non-invasive MCF-7 cells when plated on matrigel. The number of vascular channels was significantly reduced when cells were exposed in GSPs ($100{\mu}g$/ml) and GSPs ($200{\mu}g/mL$) groups (all p<0.001). Furthermore, we found that treatment with GSPs promoted transition of the mesenchymal state to the epithelial state in HCC1937 cells as well as reducing the expression of Twist1 protein, a master EMT regulator.GSPs has the ability to inhibit VM information by the suppression of Twist1 protein that could be related to the reversal of epithelial-to-mesenchymal (EMT) process. It is firstly concluded that GSPs may be an p otential anti-VM botanical agent for human TNBCs.
Tissue engineering has been enhanced by advance in biomaterial nature, surface structure and design. In this paper, I report specifically vertically aligned titania ($TiO_2$) nanotube surface structuring for optimization of titanium implants utilizing nanotechnology. The formation, mechanism, characteristics of titania nanotubes are explained and emerging critical role in tissue engineering and regenerative medicine is reviewed. The main focus of this paper is on the unique 3 dimensional tubular shaped nanostructure of titania and its effects on creating epochal impacts on cell behavior. Particularly, I discuss how different cells cultured on titania nanotube are adhered, proliferated, differentiated and showed phenotypic functionality compared to those cultured on flat titanium. As a matter of fact, the presence of titania nanotube surface structuring on titanium for dental applications had an important effect improving the proliferation and mineralization of osteoblasts in vitro, and enhancing the bone bonding strength with rabbit tibia over conventional titanium implants in vivo. The nano-features of titania nanotubular structure are expected to be advantageous in regulating many positive cell and tissue responses for various tissue engineering and regenerative medicine applications.
Transactions of the Korean hydrogen and new energy society
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v.18
no.3
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pp.244-249
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2007
The present work considers the concept of enzymatic photoelectrochemical generation of hydrogen through water splitting using a Xe lamp as a source of light. A solar cell was applied to the system in order to shift the level of electrochemical energy of the system, resulting in the rate of hydrogen production at $43\;{\mu}mol/(cm^2{\times}hr)$ in cathodic compartment with an anodized tubular $TiO_2$ electrode(ATTE, $5^{\circ}C$/1hr in 0.5 wt% HF-$650^{\circ}C$/5hr). The trend of the rate of hydrogen production, for the ATTEs with different annealing temperature from $350^{\circ}C$ to $850^{\circ}C$, fairly well coincided with the photoelectrical properties measured by potentiostat. The actual chemical bias through imposition of two electrolytes of different pHs between anode(13.68) and cathode(7.5) was 0.24eV.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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