We investigated the insulin-like growth factor 1 (IGF-1)/AKT signaling pathway involved in muscle formation, growth, and movement in the adductor muscle of triploid Pacific oyster, Crassostrea gigas. Large and small triploid oysters (LTs and STs) cultured under identical conditions were screened, and the signaling pathways of individuals with superior growth were compared and analyzed. mRNA and protein expression levels of actin, troponin, tropomyosin, and myosin, proteins important in muscle formation, were higher in LTs compared with STs. Expression levels of IGF-1, IGF binding protein (IGFBP), and IGFBP complex acid-labile subunit were also higher in LTs compared with STs. Phosphorylation of the IGF receptor as well as that of AKT was high in LTs. In addition, the expression of phosphomammalian target of rapamycin and phospho-glycogen synthase kinase $3{\beta}$ was increased and the expression of Forkhead box O3 was decreased in LTs. Therefore, we suggested that the IGF-1/AKT signaling pathway affects the formation, growth, and movement of the adductor muscle in triploid oysters.
Three proteins [myosin heavy chain (MHC), filamin-C fragment (FIL-C), and actin 2 (ACT2)] were identified in adductor muscle from diploid and triploid Pacific oysters (Crassostrea gigas) and the relationship between the condition index (CI) and mRNA expression of these genes was investigated, together with the mRNA expression of molluscan insulin-related peptide (MIP), C. gigas insulin receptor-related receptor (CIR), and insulin-like growth factor binding protein complex acid labile subunit (IGFBP-ALS). Monthly changes in the CI were similar to the changes in the tissue weight rate in both groups. ACT2 and MHC mRNA expression was statistically higher in the triploid than the diploid, while FIL-C mRNA expression was significantly higher in the diploid (p<0.05). The MIP, CIR, and IGFBP-ALS mRNA expression of the diploid oysters were all significantly higher in July than in other months (p<0.05). The MIP, CIR, and IGFBP-ALS mRNA expression in the triploid oysters was high in July, but there were no significant differences (p>0.05). Changes in the expression levels of the genes investigated in this study could be used as intrinsic indicators of the annual growth, maturity, and spawning period of cultured diploid and triploid C. gigas in Tongyeong, Korea.
완전양식이 가능한 참전복에 대해 3배체를 유도하고 유도된 3배체와 정상 2배체 사이의 성장도, 사료효율 및 생존율을 조사, 비교하였다. 성장도는 3배체 유도 51개월 후 3배체 전복이 평균 각장 67.26 mm, 2배체 전복이 62.30 mm로 성장하여 3배체 전복의 성장이 유의하게 빨랐다 (P<0.05). 제1극체 방출 억제형 3배체와 제2극체 방출 억제형 3배체의 성장도 조사 결과, 제1극체 방출 억제형 3배체는 전 사육 기간을 통하여 2배체와 제2극체 방출 억제형 3배체보다 성장이 유의하게 빨랐으며(P<0.05), 이것은 제1극체 방출 억제형 3배체의 이형접합성이 크기 때문으로 생각된다. 일간 섭식률은 배수체에 따른 유의한 차가 없었으며 성장 단계별로 치패의 시기에는 높았고 성장할수록 낮아지는 경향이었다. 사료전환효율도 배수체에 따른 유의한 차는 없었으나 성장함에 따라 낮은 값을 나타내 먹이 효율이 낮아지는 경향이었다. Condition index는 2배체는 59.42%였는데 비해 3배체는 64.21%로 3배체가 유의적으로 높았고(P<0.05), 생식소 지수는 2배체가 2.67인데 비해 3배체는 1.17로 유의적으로 낮았다(P<0.05). 생존율은 3배체가 63.0% (3n-1pb 62.0%, 3n-2pb 64.0%), 2배체가 62.0%로서 차이가 없었다.
암컷 미꾸라지, Misgurnus mizolepis와 수컷 미꾸리, M. anguillicaudatus간 잡종과 잡종 3배체를 생산하였으며, 잡종화 및 잡종 3배체화가 망막, 시개 및 trunk kidney에 미치는 영향을 조직학적으로 조사하였다. 잡종은 일부 조직의 핵과 세포 크기에서 양친과 거의 유사하였다. 잡종 3배체는 잡종에 비해 적혈구 세포 및 핵 크기, 망막 내과립층 horizontal cell 핵 크기, 망막신경절 신경세포 층의 신경세포, 시개과립층의 신경세포 핵 및 trunk kidney 2차 근위뇨세관 세포 및 핵 크기에서 증가한 반면 망막 외과립층 수와 2차 근위뇨세관 핵 수에서는 감소하였다. 본 연구 결과 잡종에 비해 잡종 3배체의 일부 조직에서 세포 및 핵 크기 증가를 동반한 세포 수 감소 특성은, 미꾸리류에서의 잡종 및 잡종 3배체의 판별 및 배수화 수준 평가의 한 방편으로 사용 가능할 것이다.
The objective of this study was to determine a simple and reliable ploidy identification protocol for the rainbow trout (RT), Oncorhynchus mykiss, in the field condition. To evaluate the ploidy level and compare different detection protocols, triploid RT and gynogenesis were induced by UV irradiation and/or heat shock. The hatching rate at day 30 was 85.2% and the survival rate at day 90 was 69.4% (fingerling). The sex ratio of female RT was 93.75% in the gynogenesis group, illustrating that the UV irradiation inactivated the sperm DNA. The hatching rate and survival rate were 82.0 and 74.7%, respectively, in the triploid-induced group. The triploid induction rate by heat shock procedure was 73.9%. Cytogenetic protocols for ploidy identification such as chromosome counting, erythrocyte nuclear size comparison, and analysis of nucleolar organizing regions (NORs) by silver staining were compared. Silver nitrate staining showed the greatest success rate (22/23 and 32/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively), followed by erythrocyte nuclear size comparison (16/23 and 19/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively) and, lastly, chromosome preparation (2/23 and 6/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively) with the lowest success rate. Based on our findings, silver staining for RT ploidy identification is speculated to be highly applicable in a wide range of research conditions, due to its cost-effectiveness and simplicity compared to other numerous ploidy detection protocols.
Triploid fish have attracted the attention of fish farmers owing to of their larger cell size compared to that of diploid fish and their ability to utilize the energy required for sexual maturation for growth instead. However, the effect of increased growth in triploid fish has shown varying results. Therefore, this study aimed to compare growth between diploid and triploid starry flounders and diploid and triploid hybrid juveniles (starry flounder, Platichthys stellatus ♀×stone flounder, Kareius bicoloratus ♂) based on breeding water temperature to investigate the effect of increased growth in triploid fishes. The experiment was performed by categorizing the water temperature as high temperature (EXP. 1, 14.5-23.5℃) and low temperature (EXP. 2, 6.4-13.3℃) based on the optimal water temperature for starry flounder breeding. In EXP. 1, the growth of starry flounder triploids and hybrid triploids was significantly higher than that of diploids. However, in EXP. 2 the weight gain and specific growth rate of the starry flounder triploid were higher, and the growth of starry flounder was higher than that of the hybrids.
Chromosomes of gonadal tissues from Fasciola spp, Eurytrema pancreaticum and Calicophoron calicophorum occurred Korean cattle were egamined using modified air-drying method. To compare their phenotype with three different genotypes among Fasciola spp, the adult and egg si2e were measured since they have been known as important taxonomical characters. The results obtained were as followed; Cattle liver fluke, Fasciola spp were classified into three types based on their chromosomal complements such as individual with 2o chromosome(diploid), 30 chromosome(triploid) and 20/30 mosaic constitution(mixoploid). The propotions of appearance of three types were 40.00%, 54.29% and 5.71%, respectively. The frequency of three types in type I which was regarded as F gigantica were 58.82% for diploid, 35.29% for triploid and 5.88% for mixoploid, but in type II which was regarded as F hepatica were 72.2% for triploid, 22.22% for diploid and 5.56% for mixoploid. Egg length of triploid forms was significantly larger than that of diploid forms and egg size of mixoploid forms was similiar to that of triploid forms. Worm size of triploid forms was larger than that of diploid forms and was more similar to that of mixoploid forms, but the statistical data were not significant. Diploid chromosome consisted of one pair of metacentric chromosome(m), four pairs of submetacentric chromosomes(sm), five pairs of subtelocentric chromosomes(st), while triploid chromosome consisted of one pair of metacentric chromosome, seven pairs of submetacen.tric chromosomes, one pair of subtelocentric chromosome and telocentric chromosome(t), respectively. In mixoploid chromosome, constitution of the chromosomes of diploid or triploid cell was consistent with that of diploid or triploid. Chromosomes of gonadal tissues from pancreatic fluke, Eurytrema pancreaticum consisted of 13 pairs of homologs(2n=26, n=13). The mitotic and meiotic divisions were observed frequently. In the mitotic metaphase, Karyotype consisted of five pairs of metacentric chromosomes, four pairs of submetacentric chromosomes, three pairs of subtelocentric chromosomes and one pair of telocentric chromosome. Chromosomes of gonadal tissues from stomach fluke, Calicvphoron calicophorum consisted of 9 pairs of homologs(2n=18, n=9). The meiotic divisions was frequently observed, but mitotic divisions was rare. In the mitotic metaphase, Karyotype consisted of two pairs of metacentric chromosomes, three pairs of submetacentric chromosomes and four pairs of subtelocentric chromosomes. Karyotype of Calicophoron calicophorum differed from that of Japanese C calicophorum which was similar to that of Paramphistomum cervi of Korean cattle. Though that of Calicophoron calicophorum of Korean cattle was similar to that of Paramphistomum explanatum of Korean cattle, that have been recognized to be a different species of fluke.
참전복의 배수체별 생식소 조직 관찰에서 2배체 난소의 경우에는 성숙기를 거쳐 방출기로 들어가고 있는 상태이며, 2배체 정소의 경우에는 방출기의 상태였다, 이에 비해 3배체 전복의 생식소는 발달이 억제되어 난소는 성장기 혹은 성숙기의 상태이고, 정소는 성숙기의 단계에 머물고 있다. 따라서 전복은 완전한 불임이 되는 것은 아니고 어느 정도 성숙이 억제된다고 생각된다. 3배체 참전복의 산란 유발 실험에서 산란 유발에 반응한 개체는 2배체는 암수 전부 반응해서 100%의 산란 유발율을 나타냈고, 3배체는 암컷 50%, 수컷은 25%의 산란 유발율을 나타냈다. 산란된 알과 정자를 배수체별로 조사한 결과, 2배체의 정자는 장경 17.47 ${\mu}m$, 단경 11.40 ${\mu}m$ 및 정자의 길이 103.94 ${\mu}m$이었던 데 비해 3배체 정자는 장경 10.86 ${\mu}m$, 단경 8.47 ${\mu}m$ 및 정자의 길이 85.06 ${\mu}m$로서 2배체 정자가 3배체 정자보다 장경, 단경, 정자의 길이 모두에서 유의적으로 길었다 (P < 0.05). 알의 직경은 2배체가 199.50 ${\mu}m$, 3배체가 192.50 ${\mu}m$로서 2배체가 컸으나 유의한 차는 없었다 (P > 0.05). 배수체별 교배 실험에서 2배체 ${\times}$ 2배체는 정상적으로 수정되어서 발생을 했으나 2배체 알 ${\times}$ 3배체 정자와 3배체 알 ${\times}$ 2배체 정자의 경우에는 수정이 되지 않았다.
해산송사리, Oryzias dancena 2배체와 유도 3배체 각 조직에서의 세포주기를 비교, 분석하였다. G1, S, G2+M기의 분포 빈도에서 꼬리지느러미인 경우 2배체에서는 85.8%, 7.6% 및 6.9%이었으며 유도 3배체에서는 91.2%, 3.6% 및 5.2%이었다. 간 조직인 경우 2배체에서는 78.4%, 10.6%, 및 11.0%이었으며 유도 3배체는 86.2%, 5.9% 및 7.9%이었다. 아가미 조직인 경우 2배체에서는 79.3%, 9.4% 및 11.3%이었으며 유도 3배체는 85.7%, 5.4% 및 8.9%이었다. 2배체와 유도 3배체에서 조직 간 세포 주기 빈도에서 유의한 차이가 있었다(p<0.05). Mitosis (체세포분열)은 유도 3배체에 비해 2배체가 더욱 활성이 있었으며, 이러한 체세포분열은 2배체와 유도 3배체 모두에서 꼬리지느러미 조직 보다는 간 조직과 아가미 조직에서 더욱 왕성하였다.
Jo, Qtae;Han, Jong-Chul;Hur, Yong-Baek;Byun, Soon Kyu;Moon, Tae-Seok
한국패류학회지
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제30권4호
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pp.443-447
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2014
Triploids have several potential advantages over diploids in aquaculture, drawing an elevated commercial reaction into the realistic application of the techniques despite we are still in the early stage of triploid industry for the Pacific oysters Crassostrea gigas. We traced the growth performance of the triploid C. gigas for over a year from hatchery spats, which was created by manipulations of chemicals (Cytochalasin B, CB or 6-Dimethylaminopurine, 6-DMAP). The growth was clearly marked by an initial longer dormancy and following a great magnitude of heterogeneity. The dormancy was almost 9 to 10-month long or even longer and was considered as a downside of the creation. The heterogeneity was magnified by appearance of extraordinarily growing oysters in part during summer season, which could be a representative upside of the triploids. Overall, however, the results were not as positive as were expected. The longer dormancy and following heterogeneity observed in our practice could be marked as an additional negative sign of the chemical use. The present study, thus, might be highly indicative in the introduction of biological cross between tetraploid and diploid to produce natural triploid embryos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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