최근 기능성 화장품의 대두로 새로운 형태의 미백제들이 많이 출시되고 있다. 본 연구에서는 천화분근, 하고초엽, 위령선근을 이용하여 새로운 미백제를 개발하였다. 그러나 이러한 미백제는 용해성이 좋지 않고 빛, 열, 산소에 의하여 변색 및 함량의 변화를 가져온다. 먼저 천화분근, 하고초엽, 위령선근을 10배수의 50% 에탄올을 넣어 75∼85도에서 6∼8시간 추출한 후 여과, 농축, 건조하였다. 건조된 추출물을 이용하여 티로시나제 효소 활성 억제효과, 마우스의 색소세포를 이용한 Bl6 멜라닌 생성 억제 효과, brown guinea pig의 동물 피부의 미백효과 결과 다른 비교 샘플에 비하여 매우 우수한 결과가 나왔다. 또한 천화분근, 하고초엽, 위령선근을 안정화시키기 위해서 propylene glycol (PG)/hydrogenated lecithin/middle chain triglycerides (MCT)/glycerin/water를 고압균질화기를 이용하여 30∼50 nm인 리포좀을 만들었다. 이러한 리포좀은 기존의 처리되지 않은 추출물에 비하여 빛과 열에 3∼5배 안정성을 보였다. 이러한 실험을 위하여 particle size analyzer, freeze fracture transmission electron microscopy (FF-TEM), chromameter, HPLC의 분석장비를 사용하였다.
하늘타리 (Trichosanthes kirilowii)로부터 조직배양 기법을 이용하여 약리작용을 나타내는 생리활성물질인 trichosantin을 생산하기 위한 연구로 Agrobacterium rhizogenes ATCC15834 의 감염을 통하여 기내 배양된 유묘의 잎절편으로부터 형질전환 모상근을 유도하였다. 유도된 모상근 clones으로부터 성장속도와 분지화 정도가 빠르며 단백질 합성능이 가장 우수한 TR-03 clones을 선발하였으며, 이를 사용하여 생체량과 배지내 가용성 단백질의 생산을 최대로 높일 수 있는 최적 배양조건을 조사하였다. TR-03 clone을 4% sucrose가 첨가된 MS 배지에 초기 접종농도 2 g (생중량)을 접종하여 100 rpm으로 배양시 생중량과 배지내 가용성 총단백질의 함량이 플라스크당 약 2.4 g (건중량)과 $28.3ug/\ell$으로 최대치를 나타내었다. 한편, 배지내 가용성 단백질에 대한 RIP활성 검정에서 배양 4주 후 21.3 unit로 최대치를 보였다.
This study was conducted to investigate the antitoxic components in the water extract of the roots of Trichosanthes kirilowii (Cucurbitaceae). The results were as follows: Generally, detoxication effects by the water extract of T. kirilowii increased in proportion to the concentrations. Experimental animals were treated with cadmium and T. kirilowii water extract by oral administration. When 40 mg/kg dosage of T. kirilowii extract was administrated it showed the highest antitoxic effects in metallothionein induction. After the water extract treatment, body weights did not increase in proportion to the extract concentrations. These results suggest that T. kirilowii extract increased metallothionein concentration and decreased the toxicity of cadmium in rats. In vitro the antitoxic activity of water extract of T. kirilowii on NIH 3T3 fibroblasts was evaluated by the MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) and SRB (sulforhodamine B protein) assays. The light microscopic study was carried out to observe morphological changes of the treated cells. These results were obtained as follows; The concentration of $10^{-2}\;mg/ml$ of T. kirilowii extract was shown significant antitoxic activity. The number of NIH 3T3 fibroblasts were increased and tend to regenerate. These results suggest that T. kirilowii extract retains a potential antitoxic activity.
The activity fractionation upon the MeOH extract of the root of trichosanthes kirilowii led to the isolation of eight cucurbitane tritepense namely cucurbitacin .betha. (I), isocucurbitacin .betha.(II), cucurbitacin D(III), isocucurbitacin D(IV), 3-epi-isocucurbitacin .betha(V), dihydrocucurbitain .betha. (VI), dihydroisocucurgbitachin .betha. (VII) and dihydrocucurbitacin E (VIII), as active principles. All isolates were shown to exhibit significant cytotoxicity against cultured human tumor cells, including A-549, Sk-OV-3, Sk-MEL-2, XF-498 and HCT 15, with an exceptionally high potency.
하늘타리는 한약재로 많이 사용되지만 이들의 일반성분에 대한 연구가 부족한 실정이다. 따라서 한약재로 사용되는 각 부위 중의 일반성분을 조사한 결과 괄루실의 경우 탄수화물 70%, 조단백질이 13%, 조지방 5%, 조섬유소 6%, 조회분 6%의 함량을 나타냈다. 또한 괄루인은 탄수화물 62.59%, 조단백질이 12.75%, 조지방 14.80%, 조섬유소 6.5%, 조회분 3.36%의 함량을 나타냈고 괄루근은 탄수화물 89.40%, 조단백질이 4.10%, 조지방 0.50%, 조섬유소 3.5%, 조회분 2.50%의 함량을 나타내었다. 괄루실과 괄루인은 15종류의 아미노산을 함유하고 있으며, 그중 괄루실에는 폐닐알라닌과 글리신이 많은 함량을 나타내었다. 괄루인에는 루신이 없는 대신 라이신이 검출되었으며, 괄루근에서는 14종의 아미노산이 검출되었다.
본 연구는 3T3-L1 세포로 하늘타리(Trichosanthes kirilowii Maxim) 뿌리 에탄올 추출물(TKM)의 항비만 활성을 조사하였다. TKM 처리 한 3T3-L1 지방세포의 분화억제를 통한 지방생성 억제에 초점을 두었다. 세포독성을 나타내지 않는 100ug/ml 농도에서 TG 함량을 현저히 억제하고, 세포 초기분화 전사인자 $PPAR{\gamma}$, $C/EBP{\alpha}$, SREBP-1c의 발현 억제, 세포내 에너지 향상성 조절인자 pAMPK, 중성지방산의 합성분해 조절인자 pACC, CPT-1, 지방산 합성 효소(FAS) 발현 억제, 호르몬자극지방분해 효소(HSL) 활성화 등 지방합성 관련인자들의 발현 조절 효능이 있는 것으로 확인되었다. 이상의 결과로 TKM은 지방세포 분화와 지방대사 관련 인자들의 발현을 조절함으로써 지방 생성과 축적 저해 효능을 보여 항비만 융합치료제로의 가능성을 제시하였다.
In this study, antioxidant and anti-inflammatory activities of the extract of different organs such as seed, fruit and root from Trichosanthes kirilowii Maxim. (TKM) were investigated in vitro. Among organs of TKM, the methanol extract of seed showed weak 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activities with $10.4{\pm}0.1%$ and $25.5{\pm}1.1%$ at $50{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$, respectively, and strong 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonicacid) (ABTS) radical scavenging activities with $72.4{\pm}6.3%$ and $96.4{\pm}2.3%$ at $50{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$, respectively. Anti-inflammatory effects of the extracts were investigated by measuring nitric oxide (NO) production, mRNA expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in LPS-induced Raw 264.7 macrophage cells. The methanol extracts of seed and fruit at $50{\mu}g/mL$ potently suppressed LPS-stimulated production of NO and reduced the expression of iNOS mRNA. The methanol extracts of seed and fruit also reduced the expression of COX-2 mRNA remarkably. Therefore, seed and fruit of TKM may be utilized for a wide range of health benefits associated with antioxidant and anti-inflammatory activities.
A new lectin, named TRA, was purified from Trichosanthes kirilowii root by acid-treated Sepharose 6B, Mono-Q, and TSK-gel 3000SW column sequential chromatography. The lectin appeared homogeneous by native gel electrophoresis at pH 4.3 and gave two protein bands of Mr=31 and 28 kDa by SDS-PAGE. The N-terminal amino acid sequences of the polypeptides of TRA have not been reported in amino acid sequences of the lectins. TRA lectin formed a precipitate with asialofetuin, neuraminidase-treated fetuin. A sugar inhibition assay indicated that N-acetyl-D-galactosamine, among the monosaccharides tested, was the most potent inhibitor of TRA-induced hemagglutination. Asialofetuin showed a 260-times stronger inhibitory activity than N-acetyl-D-galactosamine. TRA lectin also showed agglutination with normal leukocytes and lymphoma cells, but not with premature hemopoietic cells. These results suggest that TRA is a novel plant lectin.
최근 피부친화성, 흡수력, 나노 입자의 제조 등에 우수한 특성을 지닌 불포화 레시친에 대한 관심이 높아지고 있다. 이에 따라 불포화레시친의 산화안정성을 높이고, 변질되기 쉽고 독성을 지닌 합성화합물을 대체하는 천연물을 개발하고자 하였다. 결과, 하늘타리(T. kirilowii Maximowicz)의 열매와 뿌리의 성분분석을 한 결과 항산화 성분으로는 갈릭산, 카페인산, 3,5-디하이드록시벤조익산, 플라보논이 검출되었다. 총 폴리페놀 함량은 열매추출물(53.5 mg/g)보다 뿌리추출물(133.85mg/g)에서 높게 나타났고 프리라디칼 제거 및 지질산패 억제효과 또한 뿌리 추출물이 우수하였으며 뿌리 추출물은 폴리페놀 함량이 100 ppm 이상일 때 대조군으로 사용한 BHT보다 약 20.1%, 19.2% 높게 나타났다. 또한 하늘타리 추출물은 1250ppm 이하에서 95% 이상의 높은 세포 생존율을 나타내어 안전성이 우수하였다. 리포좀의 안정성에 대한 효과는 열매보다 뿌리추출물이 우수하였으며 뿌리추출물은 대조군인 BHT에 비해 항산화 효과 15.1%, 제타전위 13.9% 높았으며, 입자크기는 9.3% 낮아 기존의 합성 원료보다 우수하였다
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[게시일 2004년 10월 1일]
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