• 한국미생물·생명공학회지
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• 제39권3호
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• pp.245-251
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• 2011

Mortierella sp. 유래 효소 정제는 CM-sephadex C-50 column chromatography와 Sephadex G-100 column에 의해 수행하여 SDS-전기영동에서 단일밴드를 확인하였고 분자량은 57kDa로 결정되었다. melibiose, raffinose 및 stachyose의 세 종류의 기질에 대한 특이성에서는 Mortierella sp. 유래 정제 ${\alpha}$-galactosidase는 세 종류 기질의 비환원말단에 위치하고 있는 galactose를 모두 유리하는 특이성이 있음을 확인하였다. Bacillus sp. 유래의 $Gal^3Man_4$에 대해서 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 반응말기에서는 galactose, mannotetraose 그리고 분해되지 않고 일부 남아있는 $Gal^3Man_4$의 spot이 출현된 반면, 중합도 7의 $Gal^{2,3}Man_5$에 대해서는 반응초기부터 말기까지 전혀 특이성이 없음을 시사하였다. Trichoderma harzianum 유래의 $Gal^2Man_3$에 대해서는 반응초기 3시간부터 가수분해가 진행되어 일부 galactose와 mannotriose spot이 출현되고 있는 반면, 중합도 7의 $Gal^2Man_6$에 대해서는 Bacillus sp. 유래의 중합도 7의 $Gal^{2,3}Man_5$와 동일하게 galactose를 절단하는 능력이 없는 특이성을 보이고 있다. Xylogone sphaerospora 유래의 $Gal^2Man_3$는 Trichoderma harzianum 유래의 중합도 4와 동일한 구조로서 가수분해 시간 경과에 따른 반응말기에서 역시 galactose, mannotriose 및 잔존하는 $Gal^2Man_3$ spot이 출현하고 있는 반면 중합도 6인 $Gal^2Man_5$에 대해서는 mannopentaose의 환원말단부터 2번 mannose에 결합하고 있는 galactose에 대해서는 역시 특이성을 나타내지 않아 반응 초기부터 말기까지 가수분해 pattern에 대한 변화를 보이지 않고 있다.

• 현장농수산연구지
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• 제21권1호
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• pp.135-148
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• 2019

큰느타리버섯은 한국에서 상업적으로 가장 중요한 버섯 중 하나로, 자실체 생육과 병 발생 여부는 온도, 습도 및 이산화탄소(CO₂) 농도와 환경 조건에 민감하다. 본 연구에서는 버섯 재배 환경 개선을 목적으로 공기정화장치인 에어로사이드를 설치하여 큰느타리버섯의 생육환경 변화를 조사하였고, 병 발생 및 분리된 병원균을 동정한 결과는 다음과 같다. 1. 에어로사이드의 가동으로 생육실의 이산화탄소 농도가 평균 400 ppm 이상 높아졌으나, 이 수준의 이산화탄소 농도의 증가는 버섯 자실체 형태나 생육에 미치는 영향은 거의 없었다. 2. 에어로사이드의 가동은 생육실의 공중습도를 감소시키는 경향이 있어 더 많은 가습을 요구하였다. 3. 가습 조건에서 에어로사이드의 가동은 세균의 종류와 밀도를 낮추는 효과가 있고, 버섯 자실체에 세균성 병징이나 기형 버섯 발생 등을 감소시키는 효과가 있었다. 4. 버섯 병원균인 Pseudomonas sp.는 대부분 에어로사이드를 설치하지 않은 생육실에서 분리되었고, 약 83%의 배지에서만 정상적인 자실체의 수확이 가능할 정도로, 심각한 병해와 수량 감소를 초래하였다. 5. 에어로사이드를 설치한 생육실에서는 세균과 곰팡이로 인한 병해가 거의 발생하지 않았다. 6. Trichoderma sp., Penicillium sp.와 Cladosporium sp.는 모든 실험구에서 분리되었으나, 자실체 생육 저해나 병해를 일으키지 않았다.

• 미생물학회지
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• 제24권3호
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• pp.251-262
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• 1986

High-molecular-weight ${\beta}-glucosidase$ (EC 3.2.1.21) was purified from the culture filtrate of Trichoderma koningii through a four-step procedure including chromatography on Bio-Gel P-150, DEAE-Sephadex A-50 and SP-Sephadex C-50; and chromatofocusing on Polybuffer exchanger PBE 94. The molecular weight of the enzyme was determined to be about 101,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoreses, and the isoelectric point was estimated to be 4.96 by analytical isoelectric focusing. The temperature optimum for activity was about $55^{\circ}C$, and the pH optimumwas 3.5. The enzyme was considerably thermostable, for no loss of activity was observed when the enzyme was preincubated at $60^{\circ}C$ for 5h. Km values for cellobiose, gentiobiose, sophorose, salicin and $p-nitrophenyl-{\betha}-D-glucoside$ were 99.2, 14.7, 7.09, 3.15 and 0.70 mM, respectively, which indicates that the enzyme has much higher affinity towards $p-nitrophenyl-{\betha}-D-glucoside$ than towards the other substrates, especially cellobiose. Substrate inhibition by $p-nitrophenyl-{\betha}-D-glucoside$ and salicin was observed at the conecntrations exceeding 5mM. Gluconolactone was a powerful inhibitor against the action of the enzyme on $p-nitrophenyl-{\betha}-D-glucoside\;(K_i\;37.9\;{\mu}M)$, wherease glucose was much less effective ($K_i$ 1.95 mM). Inhibition was of the competitive type in each case. Transglucosylation activity was detected shen the readtion products formed from $p-nitrophenyl-{\betha}-D-glucoside$ by the enzyme were analysed using high-performance liquid chromatography.

• 미생물학회지
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• 제31권1호
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• pp.63-71
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• 1993

A xylanase (xylanase I) was purified 11.9-fold from the culture filtrate of Trichoderma koningii ATCC 26113 by the column chromatography on Sephadex G-75, SP-Sephadex C-50, DEAE-Sephadex A-50 and Sephadex G-50 with an overall yield of 8.2%. The molecular mass determined by gel filtration and sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis was found to be a monomeric polypeptide of ca. 35 kDa. The isoelectric point of the enzyme was estimated to be 9.3. The optimal reaction pH and temperature are 5.8 and 55.deg.C, respectively. The enzyme is stable up to 60.deg.C, while 78% of its activity is lost after the incubation for 10 min at 70.deg.C. The enzyme hydrolyzes sylan with relatively high activity, as well as carboxymethyl cellulose and avicel. The $K_{m}$ values of the enzyme for oat-spelf sylan, larchwood xylan and Avicel were 3.5, 1.6 and 10. 1 mg/ml, respectively. The enzyme hydrolyzed oat-spelt sylan to sylose, sylobiose, sylotriose and arabionoxylobiose, while it degraded larchwood xylan to xylose, xylobiose, xylotriose and arabionoxylobiose, while it degraded larchwood xylan to xylose, xylobiose and xylotriose as the major products. The hydrolysis patterns indicate that xylanase I is endo-enzyme.e.

• 한국유기농업학회지
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• 제6권2호
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• pp.117-125
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• 1998

For isolation of antagonistic fungi antagonistic to Phytophthora capsici, a total of 157 isolates of fungi were screened from soil. Among the 157 isolates further screened by the dual culture test on potato dextrose agar and V-8 juice agar, 16 isolates were tested to show their antagonistic activity against P. capsici and Fusarium oxysporum. Fungal cul-ture filtrates of screened 16 isolates were shown to inhibit germination of zoospoorangia of P. capsici entirely and conidia of F. oxysporum considerably. Antagonistic fungi were shown to suppress of P. capsici infection of red-pepper plants maintained in the green house. Four isolates. 27 J5, 37 J10, 36 J13 and 31 K10, with the reduced disease incidence 53.3∼60.0% were identified as Fusarium sp. (27 J5). Trichoderma sp. (37 J10, 36 J13) and Penicillium sp. (31 K10).

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권6호
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• pp.873-876
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• 1999

Aspergillus sp. CX-l strain grown on microcrystalline cellulose resulted in the accumulation of high levels of cellulase and xylanase activities that were higher by two to four folds than those from the conventional commercial producer, Trichoderma reesei QM9414. Aspergillus sp. CX-1 demonstrated greater thermo stability and better catalytic characteristics of total cellulase activity (FPase) as compared to T. reesei and Aspergillus niger F-2039.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권5호
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• pp.406-412
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• 1998

Trichoderma sp. C-4 유래의 endoglucanase 유전자(egl6)를 ADH1 promoter 하류에 연결하여 구성적 발현 plasmid인 pVT-C4를 제작하였다. 이를 3종의 S. cerevisiae숙주세포(YNN27, 2805, SEY2102)에 형질전환시켜 각 숙주세포당 80개의 형질전환체를 시험배양하여, 균체증식과 endoglucanase 발현량이 뛰어난 형질전환 효모 균주를 선별하였다. 3종의 재조합 효모를 YPD 배지에서 회분 배양했을 때, YNN27 균주가 가장 낮은 균체농도(OD$_{600}$=19)를, 2805 균주가 가장 높은 균체농도(OD$_{600}$=33)를 보였으며, 총 발현된 endoglucanase 활성은 균체농도에 의존적인 양상으로 나타나 YNN27의 경우 586 unit/l, SEY2102의 경우 1023 unit/l, 2805의 경우 1142 unit/l 순서로 증가하였다 비활성(균체농도당 endoglucanase활성 )은 세 균주 모두 31~34 unit/l/OD$_{600}$ 값을 보여 단위 균체당 발현능 차이는 거의 없었다. Plasmid 안정성은 배양 72시간에서 세 균주 모두 80% 이상의 높은 값을 보였다. 발현된 endoglucanase의 분비 국재성은 세포밖 배지에 약 80%, periplasmic space 잔존 활성이 11~13%, 세포질 분획에서의 활성이 8~10% 정도로 세 균주에서 모두 비슷한 분포를 보였다. 즉, egl6의 분비신호는 S. cerevisiae에서도 매우 효율적으로 분비 기능을 발휘하였다. 재조합 endoglucanase는 nondenaturing-PAGE 상에서 전형적인 당단백질의 disperse band를 두개 보였다. 세가지 숙주세포에 따른 재조합 endoglucanase활성 band들의 이동상의 차이는 거의 나타나지 않고, 당쇄부가 양상은 야생형보다 훨씬 더 복잡하고 불균일하게 발생했음을 알 수 있었다.수 있었다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2002년도 생물공학의 동향 (X)
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• pp.453-456
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• 2002

Trichoderma sp. FJl의 섬유소 분해효소 생산조건을 최적화하기 위해 반응표면 분석법을 이용하였다. 반응표면 분석을 위한 실험 계획법은 중심합성법 계획법을 이용하였으며, 주요 배양인자로서 탄소원의 농도, 질소원의 농도, 혼합탄소원 비율, 그리고 배양시간에 대해 조사하였다. CMCase의 경우에서는 탄소원의 농도 3.5%, 질소원 농도 0.6%, 혼합탄소원인 avicel 및 CMC의 비율 52:48, 그리고 배양시간 5.4일에 33.5 U/ml로 최적화되었고, xylanase의 생산은 3.5%, 0.8%, 54:46의 배양조건에서 5.3일에 52.6 U/ml이었고, ${\beta}-glucosidase$의 생산은 5.0%, 1.0%, 83:17의 배양조건에서 7 일에 2.88 U/ml이었고, avicelase의 생산은 4.0%, 0.9%, 64:36의 배양조건에서 6.5일에 1.84 U/ml로 최적화되었다. 이중에서 ${\beta}-glucosidase$의 생산성은 기존 실험조건보다 74% 정도로 가장 높은 효율 향상을 보여주었다. 실제로 최적 예측조건에서 실증실험을 수행한 결과 본 모델의 타당성이 입증되었다. 본 연구에서 얻은 섬유소 분해 효소 생산 조건 최적화에 관련된 자료들은 산업적으로 효소를 생산하고자 할 때 설계에 유용하게 사용될 것이다.

• 한국동물위생학회지
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• 제21권1호
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• pp.97-104
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• 1998

Fugi are eukaryotic, nonphotosynthetic, filamentous or unicellular organisms, most of which grow on nonliving materials as saphrophytes. The majority are therefore opportunistic pathogens and predisposing factors often contribute to the establishment of fungal infection. These include an alteration in the normal flora of the host by prolonged administration of antibiotics, immunosup-pression, concurrent infections, damage to the skin or mucous membranes, constantly moist areas of skin or the exposure to a large infective dose, and as with fungal spores. Fungi may cause a variety of diseases which may be due directly to fungal invasion of tissue or more often to the ingestion of toxins produces by fungi in growing, standing or stored grains and other animals feeds. In this experiment, contaminated fugi were isolated and identified from animal feedstuffs such as Korean cattle, milking cows, pigs and chickens. Twelve genues were isolated from animal feeds, they are 9 from Korean cattle and milking cows feeds, 6 from pigs feeds, and 10 from chickens feeds. Among them, most frequently encountered species was Yeast(56 strains), followed by Fusarium sp(41 strains), Aspergillus sp(20 strains), each of Micorsporum sp and Trichophyton sp(17 strains), Penicilium sp(12 strains), in order. And also minority was isolated as Candide sp(4 strains), Trichoderma sp(3 strains), each of Epidermophytom sp and Absida sp(2 strains), and each of Sporothrix sp and Maduromyces sp(1 strain). Among the Aspergillus sp 20 isolates, A flavus(5 strains), A nidulans(4 strains), A fumigatus(3 strains), A glucans(3 strains), A niger(3 strains) and A terreus(2 strains) were identified.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1998년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.286.1-286
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• 1998

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