Somatic cell nuclear transfer (SCNT) is a useful tool for reproducing genetically identical animals or producing transgenic animals. Many reports have demonstrated that the efficiency of animal cloning by SCNT requires reprogramming of the somatic nucleus to a totipotent like-state. The SCNT-related reprogramming might mimic the natural reprogramming process that occurs during normal mammalian development. However, recent evidence indicates that the reprogramming event by SCNT is incomplete. In this study, the traditional SCNT procedure (TNT) was modified by injecting donor nuclei into recipient cytoplasm prior to the enucleation process to expose the donor nucleus before removing the karyoplast containing the chromosomes of the oocytes which might possess additional reprogramming factors, and this modified technique was named as reversing the usual order of SCNT (RONT). Other procedures including activation and in vitro culture were the same as TNT. Contrary to expectations, the rate of blastocyst development was not different significantly between RONT and TNT (8.6% and 7.9%, respectively). However, duration of micromanipulation performed by the same technician and equipments was remarkably reduced because the ruptured oocytes after nuclear injection were excluded from the enucleation process. This study suggests that RONT, a simplified SCNT protocol, shortens the duration of SCNT procedure and this less time-costing protocol may enable the researchers to perform murine SCNT easier.
Thirty dairy cows with pododermatitis were selected and treatment effect of ozone ointment for bovine pododermatitis was investigated. In addition, bactericidal effect of ozone ointment on etiological agent of bovine pododermatitis was evaluated. The pathohistological examination for the pododermatitis, according to application with ozone ointment was investigated. Thirty dairy cows were divided two groups: control group(vaseline group: 15 cows), treatment group(ozone ointment group: 15 cows). Various parameters were evaluated in terms of the lameness score, swelling score, lesion score, WBC, neutrophil, pathohistological finding, and antimicrobial action. As compared with vaseline group, ozone ointment group revealed significant decrease of lameness(p<0.05), swelling(p<0.01) and lesion score(p<0.05) were shown in hoof lesions on 14 days after application. In hematological findings, WBC count revealed slightly high values within normal range before treatment, however, this was 1Corresponding author improved on 14 days after application of ozone ointment. The number of neutrophils was slightly higher than that of normal, however, this was improved on 14 days after application of ozone ointment. In pathohistological findings, normal dermal tissue was found in tissues with pododermatitis on 14 days after application of ozone ointment. In antimicobial action, marked decrease rate of bacteria was observed in feet of all cases treated with ozone ointment. The decreasing rate of bacteria in anaerobic culture was higher than that in aerobic culture.
This study was carried out to determine therapeutic the effect of ozonated water therapy on bovine pododermatitis. In addition, bactericidal effect of ozonated water on etiological agent of bovine pododermatitis was examined. The pathohistological examination for the pododermatitis, according to application with ozonated water and ozone ointment was investigated. Thirty healthy cattle were divided two groups(each of 15) : control group(povidone group), treatment group(ozone solution group). Various parameters were evaluated in terms of the lameness score, swelling score, lesion score, WBC count, neutrophil count, pathohistological finding, and antimicrobial action. The decrease of lameness and lesion score were shown in hoof lesions on 14 days after application of ozonated water. Significant decrease of swelling was shown in hoof lesions on 14 days 1Corresponding author after application of ozonated water(p<0.01). In hematological findings, WBC count revealed values within normal range. The number of neutrophils was slightly higher than that of normal, however, this was improved on 14 days after application of ozonated water. In pathohistological findings, recovery was rapid macroscopically and microscopically in the treatment with ozonated water on the hoof lesions and ozonated water was effective. In antimicobial action, bactericidal effect was observed in treatment with ozonated water on the hoof lesions and ozonated water was effective.
Kim, Jong-Man;Lee, Jae-Yeon;Kim, Duck-Hwan;Jeong, Seong-Mok;Park, Chang-Sik;Kim, Myung-Cheol
한국임상수의학회지
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제25권3호
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pp.165-169
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2008
Renal ischemia-reperfusion (I/R) injury is great clinical important because viability of the organ depends on the tolerance to ischemia-reperfusion injury, an inevitable processing during surgery. The purpose of this study was to investigate the effects of premedicated ascorbic acid alone in I/R injury model induced by cross-clamping of renal vessels. In the rabbit models, 2-4 kg New Zealand white rabbits were subjected to 30 minutes of warm unilateral renal ischemia followed by removal of contralateral kidney and then divided into five groups, control (2) arid treatment groups (3). In control group 1, the rabbits only received right nephrectomy. In control group 2, the rabbits received I/R on left kidney after the right nephrectomy. In treatment group 1, the rabbits received ascorbic acid 50 mg/kg IV before the operation. In treatment group 2, the rabbits received ascorbic acid 100 mg/kg IV before the operation. In treatment group 3, the rabbits received ascorbic acid 200 mg/kg IV before the operation. Blood samples were collected from these rabbits for measurement of kidney function tests at the 0, 1 st, 3rd and 7th day and antioxidant enzyme( SOD, GSHPx, CAT) at 24 hours. Kidney function tests (serum creatinine and BUN) showed a significant difference between group 2 and group 4, 5. Activity of antioxidant enzymes in plasma were significant decrease in group 4, 5 compare to group 2. The result of this study suggested that the exogenous ascorbic acid had a role of attenuation of renal I/R injury in rabbit model.
As a bioreactor, bird has proved to be most efficient system for producing useful therapeutic proteins. More than half of the egg white protein content derives from the ovalbumin gene with four other proteins(lysozyme, ovomucoid, ovomucin and conalbumin) present at levels of 50 milligrams or greater. And the naturally sterile egg also contains egg white protein at high concentration allowing for a long shelf life of recombinant protein without loss in activity. In spite of these advantages, transgenic procedures for the bird have lagged far behind because of its complex process of fertilized egg and developmental differences. Recently, a system to transplant mouse testis cells from a fertile donor male to the seminiferous tubules of an infertile recipient male has been developed. Spermatogenesis is generated from transplanted cells, and recipients are capable of transmitting the donor haplotype to progeny. After transplantation, primitive donor spermatogonia migrate to the basement membrane of recipient seminiferous tubules and begin proliferating. Eventually, these cells establish stable colonies with a characteristic appearance, which expands and produces differentiating germ cells, including mature spermatozoa. Thus, the transplanted cells self-renew and produce progeny that differentiate into fully functional spermatozoa. In this study, to develop an alternative system of germline chimera production that operates via the testes rather than through developing embryos, the spermatogonial stem cell techniques were applied. This system consisted of isolation and in vitro-culture of chicken testicular cells, transfer of in vitro-maintained cells into heterologous testes, production of germline chimeras and confirmation of germline transmission for evaluating production of heterologous, functional spermatozoa.
Antibodies are powerful and versatile tools to play a critical role in the diagnosis and treatment of many diseases. Their application has been enhanced significantly with the advanced recombinant DNA and heterologonous expression technologies, allowing to produce immunotherapeutic proteins with improved biofunctional properties. However, with currently available technologies, mammalian cell-based therapeutic antibody production, as an alternative for production in humans and animals, is often not plentiful for passive immunotherapeutics in treatment of many diseases. Recently, plant expression systems for therapeutic antibodies have become well-established. Thus, plants have been considered to provide an attractive alternative production system for therapeutic antibodies, as plants have several advantages such as the lack of human pathogens, and low cost of upstream production and flexible scale-up of highly valuable recombinant glycoproteins. Recent advances in modification of posttranslational processing for human-like glycosylation in transgenic plants will make it possible that plant can become a suitable protein expression system over the animal cellbased current production system. This review will discuss recent advances in plant expression technology and issues for their application to therapeutic antibody production.
우리나라에서 미승인 품목인 유전자변형 감자 EH92-527-1를 검출하기 위한 duplex PCR 검사법이 개발되었다. 감자의 내재유전자로 UDP-glucose pyrophosphorylase (UGP)가 선별되었고, 14개 다른 작물을 이용하여 특이성이 확인되었다. 유전자변형 감자에 삽입된 T-DNA 영역과 감자 게놈 사이의 연결 부위를 증폭하도록 프라이머 EH92-F/R 쌍이 제작되었고, 몇 개의 다른 유전자 변형 작물을 이용하여 특이성이 확인되었다. 서론에서 언급한 바와 같이 BASF사에서 각 개발된 유전자변형 감자 EH92-527-1과 BPS-A1020-5가 GBSS 유전자를 동일하게 포함하고 있으나 본 연구에서 개발한 검사법은 event-specific primers를 이용하였기 때문에 유전자변형 감자 EH92-527-1에만 특이성을 나타낸다. 이와 같이 개발된 duplex PCR 검사법의 검정한계치는 약 0.05%이다. 이러한 duplex PCR 검사법이 우리나라에 미승인 유전자변형 감자의 모니터링에 유용하게 사용될 것으로 판단한다.
The objective of this study was to compare wound healing in stomach with $CO_{2}$ laser and scalpel incision by measuring the extent of bleeding, the ease of gastric incision, incision time, degree of adhesion and wound healing degree in dogs. Sixteen healthy dogs were used. Two symmetrical incisions were made in ventral aspect of the stomach between the greater and lesser curvatures were made with scalpel and 0.2 mm spot diameter $CO_{2}$ laser (8W, continuous wave) in sixteen dogs. And then each wound was closed with absorbable suture in a two-layer inverting seromuscular pattern. At 3, 7, 14 and 21 days after initial wounding, each wound was taken for histological observation. On surgery, the extent of bleeding, the ease of incision and incision time showed significant differences between the groups. The $CO_{2}$ laser provided better hemostasis (p < 0.05) and smaller postoperative adhesion compared with the scalpel. However, the scalpel produced faster speed of incision and was easier to handle than the $CO_{2}$ laser (p < 0.05). Although there was no considerable difference between the two groups in histological observation, necrosis and calcium deposit tended to be larger in the $CO_{2}$ laser than in the scalpel.
Mouse hepatitis virus (MHV) is a major pathogen in laboratory mice that usually leads to fatal diseases, such as hepatitis, multiple sclerosis, encephalitis, and respiratory disease. MHV has a high infection rate, and it needs to be detected as soon as possible to prevent its spread to other facilities. However, MHV detection by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) often gives false positives; thus, it is very important that the results are confirmed as true positives in the early infection stage or distinguished as false positives with more accurate, reliable methods. Under microbiological screening, MHV ELISA-positive mice were found in four GFP-tagging transgenic mice. To verify the detection of the MHV antigen directly, reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was performed, and the mice were determined to be MHV negative. Additional serum antibody-based screening was conducted with three different ELISA kits, and multiplexed fluorometric immunoassay (MFIA) was performed to confirm their accuracy/sensitivity. In brief, the ELISA kit for A59 nucleocapsid protein (MHV-A59N) revealed MHV ELISA positivity, while other ELISA kits (MHV-S lysate and MHV-JHM lysate) demonstrated MHV negativity. In MFIA, only the test for the recombinant A59 nucleocapsid antigen was MHV positive, which was consistent with the ELISA results. These results suggest that the ELISA kit with the recombinant A59 nucleocapsid antigen might induce non-specific MHV ELISA positivity and that confirmation is therefore essential.
본 연구의 목적은 개의 경혈에 관한 조직학적 소견을 관찰하는 것이다. 개(4마리)에서 내관(PC06), 간유(BL18), 신유(BL23) 및 방광유(BL28)에 1 cm 깊이로 자침을 실시하고, 경혈주위의 조직을 관찰하였다. 각 경혈의 주위조직을 현미경학적으로 관찰하였다. 신경섬유, 소혈관, 및 근방추체들은 인근 지점에서의 비경혈, 또는 피부, 피하조직 및 근육과 같은 부위에서의 비경혈에서도 가끔 발견 되지만, 모든 예의 침의 선단 주위에서 신경섬유, 소혈관, 및 근방추체가 발견되었다. 따라서, 신경섬유, 소혈관 및 근 방추체는 잠재성 경혈 수용체일수도 있다는 가능성이 제시된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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