Jung, Gwon-Soo;Lee, Kyeong-Min;Park, Jin-Kyu;Choi, Seong-Kyoon;Jeon, Won Bae
BMB Reports
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제46권5호
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pp.276-281
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2013
In this study, we aimed to compare the morphogenetic and neuronal characteristics between monolayer cells and spheroids. For this purpose, we established spheroid formation by growing SH-SY5Y cells on the hydrophobic surfaces of thermally-collapsed elastin-like polypeptide. After 4 days of culture, the relative proliferation of the cells within spheroids was approximately 92% of the values for monolayer cultures. As measured by quantitative assays for mRNA and protein expressions, the production of synaptophysin and neuronspecific enolase (NSE) as well as the contents of cell adhesion molecules (CAMs) and extracellular matrix (ECM) proteins are much higher in spheroids than in monolayer cells. Under the all-trans-retinoic acid (RA)-induced differentiation condition, spheroids extended neurites and further up-regulated the expression of synaptophysin, NSE, CAMs, and ECM proteins. Our data indicate that RA-differentiated SH-SY5Y neurospheroids are functionally matured neuronal architectures.
The cyclophilins (Cyps) are family members of proteins that exhibit peptidylprolyl cis-trans isomerase (PPIase, EC 5.2.1.8) activity and bind the immunosuppressive agent cyclosprin A (CsA) in varying degrees. During the process of random sequencing of a cDNA library made from Giardia intestinalis WB strain, the cyclophilin gene (gicypl) was isolated. An open reading frame of gicyp1 gene was 576 nucleotides, which corresponded to a translation product of 176 amino acids (Gicypl). The identity with other Cyps was about 58-71%. The 13 residues that constituted the CsA binding site of human cyclophilin were also detected in the amino acid sequence of Gicypl, including tryptophan residue essential for the drug binding. The single copy of the gicypl gene was detected in the G. intestinalis chromosome by southern hybridization analysis. Recombinant Gicyp 1 protein clearly accelerated the rate of cis ${\rightarrow}$ trans isomerization of the peptide substrate and the catalysis was completely inhibited by the addition of $0.5{\;}{\mu}M$ CsA.
'The eye' and 'the gaze' organize the visual system and distinguish the subject from the others. Recent philosophical thoughts have forcefully argued against the tradition characterized by the domination of the eye that assimilates the alterity of the others to one's own, cancels their alterity, and totalizes their differences within himself. In the speculative discourse modeled on the eye, the alienation of self in its other and the reflection of the object are linked together in such a way as to form a totality in which they are reflected into one's another, leaving absolutely no remainder outside. By contrast to this totalizing tendency of the eye, Sartre and Lacan propose the gaze that becomes constitutive of vision. The modern architecture reinforced subject's eye and clearly separated the others from subject Through Descartes's visual paradigm, space became homogeneous and nature was seized by architecture. However, recently the clear boundary between subject and object is disappearing. Lacan insisted that oneself's eye and the other's gaze are mixed up in human sight This means that the boundary between the subject and the other is indistinct and also the boundary between an object and landscape is meaningless in architecture. The overthrow of gaze in contemporary architecture appears in the form of trans-boundary, translucency and widen architectural notion and expression.
To compare skin irritation and cytotoxicity of anti-wrinkle agents, we examined skin irritation of six anti-wrinkle agents (ascorbic acid, glycolic acid, all trans-retinoic acid, ginseng extract, retinol, EB) in New Zealand white rabbit. Cytotoxicity of these agents was determined by MTT [tetrazolium salt 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] at multi-time points in cultured HaCaT cell, a human immortalized keratinocyte cell. We then analyzed correlation between skin irritation and cytotoxicity by spearman's rank correlation analysis. All trans-retinoic acid showed the highest primary irritation index (0.92) in skin irritation test. Being all the six agents not irritant, retinal showed the most cytotoxic agents. The correlation between skin irritation and cytotoxicity ($IC_{50}$/ at different time point was 0.814, 0.757, 0.814 and 0.7 at 3, 24, 48 and 72 h, respectively. We also fecund that IC$_{20}$ and IC$_{80}$ of these agents showed similar correlation with skin irritation. These results therefore demonstrated that there is close correlation between skin irritation and cytotoxicity $IC_{50}$/ value by MTT in HaCaT cell at early time points by anti-wrinkle agents or IC$_{20}$ value. $IC_{50}$/ at earily time point or IC$_{20}$ values may be reliable alternative determinant of skin irritation.n.
The major concern of e-learning environment design is to create and improve artifacts that support human learning. To facilitate effective and efficient learning, e-learning environment designers focused on the contemporary information technologies. Web 2.0 services, which empower users and allow the inter-transforming interactions between users and information technologies, have been increasingly changing the way that people learn. By adapting these Web 2.0 technologies in learning environment, educational technology can facilitate learners' abilities to personalize learning environment. The main purpose of this study is to conceptualize comprehensively constructs for understanding the inter-transforming relationships between learner and learning environment and mutable learning environments' impact on the process through which learners learn and strive to shape their learning environment. As results, this study confirms conceptualization of four constructs by incorporating aspects of design that occur in e-learning environments with Web 2.0 technologies. First, learner-designer refers to active and intentional designer who is tailoring an e-learning environment in the changing context of use. Second, learner's secondary design refers to learner's design based on the primary designs by design experts. Third, transactional interaction refers to learner's inter-changeable, inter-transformative, co-evolutionary interaction with technological environment. Fourth, trans-active learning environment refers to mutable learning environment enacted by users.
인간 유전체에 존재하는 유전적 구조 변이(genetic structural variation) 중 하나인 유전체 단위반복변이(Copy Number Variation, CNV)은 유전자의 기능 발현과 밀접한 관련이 있다. 특히 특정 유전 질병이 있는 사람들을 대상으로 CNV와 유전자발현의 관계를 밝히는 연구가 계속 진행되고 있지만, 정상인 유전체에 대한 CNV의 기능적 분석은 아직 활발히 이루어지고 있지 않다. 본 논문에서는 다수의 정상인 샘플에서 찾아낸 공통된 CNV에 대하여 유전자들과의 기능적 관계를 유전자의 분자적 위치와 상관없이 밝힐 수 있는 분석 방법을 제시한다. 이를 위해 서로 다른 이질적인 생물학데이터를 통합하는 방법을 제시하고 공통된 CNV와 유전자와의 연관성을 분자적 위치와 상관없이 계산할 수 있는 새로운 방법을 제시한다. 제안된 방법의 유의성을 보이기 위해서 유전자 온톨로지 (Gene Ontology) 데이터베이스를 이용한 다양한 검증 실험들을 수행하였다. 실험결과 새롭게 제안된 연관성 측정방법은 유의성이 있으며 공통된 CNV와 강한 연관성을 갖는 유전적 기능의 후보들을 시스템적으로 제시할 수 있는 것으로 나타났다.
본 연구는 2002년 10월부터 2003년 9월까지 경상북도 봉화군 운곡천을 대상으로 수달의 배설물(Spraint) 및 배설지(Sprainting site)등의 흔적조사를 통해 얻은 GPS좌표를 중심으로 하여 국립지리원에서 발행한 1/25000 수치지도 및 현장조사에서 얻은 정보를 ESRI사의 Arcview를 통하여 수달의 최적 서식지분석에 이용하였다. 분석 결과 수달의 서식지 이용에는 먹이자원인 어류의 종다양도와 풍부도가 깊은 연관을 맺고 있으며 식생 등의 서식환경이 밀접한 연관을 맺고 있음을 확인하였다. 또한, 밀집된 주거지 등의 인간의 간섭은 수달의 서식지 이용에 교란요인으로 작용한다는 것을 알 수 있었다. 결국 수달의 이주(Trans-location)등 보전 및 복원을 위한 시도에서 적합 서식지를 선정하기 위해서는 인간의 간섭으로부터 배제와 풍부한 어족자원, 좋은 식생을 두루 갖춘 서식지를 찾아내는 것이 선행되어야 함을 시사한다.
We developed a novel on-chip activity assay using protein arrays for quantitative and rapid analysis of transglutaminase activity in mammalian cells. Transglutaminases are a family of $Ca^{2+}$-dependent enzymes involved in cell regulation as well as human diseases such as neurodegenerative disorders, inflammatory diseases and tumor progression. We fabricated the protein arrays by immobilizing N,N'-dimethylcasein (a substrate) on the amine surface of the arrays. We initiated transamidating reaction on the protein arrays and determined the transglutaminase activity by analyzing the fluorescence intensity of biotinylated casein. The on-chip transglutaminase activity assay was proved to be much more sensitive than the $[^3H]putrescine$-incorporation assay. We successfully applied the on-chip assay to a rapid and quantitative analysis of the transglutaminase activity in all-trans retinoic acid-treated NIH 3T3 and SH-SY5Y cells. In addition, the on-chip transglutaminase activity assay was sufficiently sensitive to determine the transglutaminase activity in eleven mammalian cell lines. Thus, this novel on-chip transglutaminase activity assay was confirmed to be a sensitive and high-throughput approach to investigating the roles of transglutaminase in cellular signaling, and, moreover, it is likely to have a strong potential for monitoring human diseases.
Although engineered Saccharomyces cerevisiae fermenting cellobiose is useful for the production of biofuels from cellulosic biomass, cellodextrin accumulation is one of the main problems reducing ethanol yield and productivity in cellobiose fermentation with S. cerevisiae expressing cellodextrin transporter (CDT) and intracellular β-glucosidase (GH1-1). In this study, we investigated the reason for the cellodextrin accumulation and how to alleviate its formation during cellobiose fermentation using engineered S. cerevisiae fermenting cellobiose. From the series of cellobiose fermentation using S. cerevisiae expressing only GH1-1 under several culture conditions, it was discovered that small amounts of GH1-1 were secreted and cellodextrin was generated through trans-glycosylation activity of the secreted GH1-1. As GH1-1 does not have a secretion signal peptide, non-conventional protein secretion might facilitate the secretion of GH1-1. In cellobiose fermentations with S. cerevisiae expressing only GH1-1, knockout of TLG2 gene involved in non-conventional protein secretion pathway significantly delayed cellodextrin formation by reducing the secretion of GH1-1 by more than 50%. However, in cellobiose fermentations with S. cerevisiae expressing both GH1-1 and CDT-1, TLG2 knockout did not show a significant effect on cellodextrin formation, although secretion of GH1-1 was reduced by more than 40%. These results suggest that the development of new intracellular β-glucosidase, not influenced by non-conventional protein secretion, is required for better cellobiose fermentation performances of engineered S. cerevisiae fermenting cellobiose.
들뢰즈와 가타리가 제기하는 느리고, 경험적인 교육은 시간 속에서 반복되는 지속을 경험해야만 가능하다. 잠재성과 현실성의 짝으로 이루어진 이 세계의 주체성은 '기계'로 표현된다. '기계'의 주체성은 생성 자체이다. 클라우드 상 어디에나 존재하면서 무의식적으로 빅데이터를 수집하는 정보사회의 주체성 또한 정보사회 자체이다. 정보사회는 개인의 욕망을 주체성의 발현에 앞서 관리하는 사회로 기울 위험을 안고 있다. '기계'는 언표적 배치와 기계적 배치로 이루어져 있다. 배치론에 입각한 사회과학은 반복되는 패턴, 언어성과 물질성의 공존, 경계에 대한 주의, 총체적 전체에 대한 부정이라는 특징을 공유한다. 시간 속에서 집합적 패턴이 구조적으로 변형되어 가는 양상을 띠는 배치의 교육학은 들뢰즈와 가타리의 본래 문제의식인 느리고, 경험적인 교육에 부합한다. 또, '교육-기계'의 물질성과 언표성을 고찰하는 작업은 탈인간 시대의 새로운 학습론, 교육론 확립에 기여할 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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