Incidence of virus diseases in red pepper of open field in Yeongyang-Gun, Gyeongbuk Province was investigated by reverse transcription-polymerase chain reaction in 2012-2016. The infection rate of Cucumber mosaic virus (CMV), Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), Pepper mottle virus, Potato virus Y, Pepper mild mottle virus and Tomato spotted wilt virus was 46.1%, 41.5%, 2.0%, 2.0%, 4.4% and 0.1% respectively. Incidence rate of single and mixed infection was 31.2% and 62.6%. Most of single infections were CMV and BBWV2. Among mixed infections, the incidence rate of CMV+BBWV2 mixed infection was the highest as 49.3% and most of mixed infections of triplex and tetraplex included CMV+BBWV2 mixed infection. CMV single infection caused mosaic, chlorosis, yellowing and vein necrosis and BBWV2 single infection induced cholosis and mosaic. CMV+BBWV2 mixed infection caused severe mosaic with chlorosis or malformation.
AL1-gene, necessary for the replication of the genome of a gemini virus TGMV, was inserted in the opposite direction to the promoter CaMV35S resulting in the construction of a plant transformation binary vector pAR35-2. The vector pAR35-2 contains the chimeric gene cassette involving the duplicated promoter CaMV35S, opposite direction of AL1-gene fusioned with hygromycin resistant gene, and the gene cassette of the neomycin phosphotransferase II gene. The plasmid was transferred to tobacco and tomato plants by leaf disk infection via Agrobacterium. The transgenic plants were selected and grown on the MS-agar medium containing kanamycin and hygromycin. The shoots induced from the calli were regenerated to the whole transgenic plants. The antisense AL1-gene was detected in the genomic DNA isolated from the leaves by using the PCR mediated Southern blot analysis. The expression of the antisense AL1-gene was also observed using the RT-PCR mediated Southern blot analysis. The observation of chloroplasts in guard cell pair indicated that the transgenic tomato plants were diploid.
For quarantine purpose, we selected five plant RNA viruses including Cucumber vein yellowing virus (CVYV), Cucurbit yellow stunting disorder virus (CYSDV), Potato aucuba mosaic virus (PAMV), Potato yellow dwarf virus (PYDV), and Tomato chlorosis virus (ToCV), which are not reported in Korea and cause serious economic losses to the family Cucurbitaceae or Solanaceae. To detect those viruses, we employed RT-PCR technique with specific oligonucleotide primer pairs and tested their detection efficiency for each virus. To design RT-PCR primers, coat protein was used for CVYV, CYSDV, and ToCV whereas RNA polymerase and nucleocapsid regions were used for PAMV and PYDV, respectively. The development of an RT-PCR based method proved a useful tool for rapid detection and identification of quarantine virus infections.
Cho Jeom-Deog;Kim Jeong-Soo;Kim Jin-Young;Kim Jae-Hyun;Lee Sin-Ho;Choi Gug-Seoun;Kim Hyun-Ran;Chung Bong-Nam
Research in Plant Disease
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v.11
no.2
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pp.213-216
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2005
Tomato spotted wilt virus (TSWV) occurred abruptly with a high incidence rate in 14 vegetable crops in Anyang area, Gyunggido in 2004. TSWV was identified by the symptoms on the indicator plants, immunocaptured reverse transcription-polymerase chain reaction (IC/RT-PCR), virion captured (VC)RT-PCR and RT-PCR using total RNA from the infected plants. Vegetable crops infected with TSWV included table tomato, cherry tomato, red pepper, lettuce, chicory, red leaf chicory, red mustard, dragon tongue, treviso, potato, perilla, sesame, pumpkin, and ssamchoo (hybrid of oriental cabbage and cabbage). The incidence of TSWV in fields ranged from 30 to $100\%$. TSWV usually produced necrosis, wilt and/or severe mosaic with typical single or double ring spots on the leaves. TSWV could be detected in Frankliniella occidentalis collected from the crops in the fields with $90\%$ rate by IC/RT-PCR.
Kim Jeong-Soo;Cho Jeom-Deog;Kim Jin-Young;Lee Sin-Ho;Chung Bong-Nam;Kim Jae-Hyun
Research in Plant Disease
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v.12
no.2
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pp.148-151
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2006
Tomato spotted wilt virus (TSWV) was occurred newly on the 4 ornamental plants of Impatiens balsamina (Balsam), Dahlia variabilis (Dahlia), Callistephus chinensis (Aster) and Zinnia elegans (Indian lilac) at Anyang area in Korea. TSWV produced the typical symptoms of single or double ring spots on the leaves and induced usually necrosis, wilt and/or severe mosaic.
Oxypetalum coeruleum, commonly known as Tweedia, is a perennial herbaceous plant of the Apocynaceae family native to southern Brazil and Uruguay. Tweedia plants are grown as one of the most popular ornamental flowers for floral arrangement in Korea. In May 2021, several tweedia plants in a single greenhouse in Gimje, Jeollabuk-do were found to show virus-like symptoms including necrotic rings, vein-clearing, chlorotic mottle, and mosaic on the leaves, and necrosis on the stems. Here, we have identified tomato spotted wilt virus (TSWV) in symptomatic tweedia leaves by applying high-throughput RNA sequencing. In the result, a single infection by TSWV was verified without mixed infections of different virus species. To confirm the presence of TSWV, a reverse transcription polymerase chain reaction was performed with a specific primer set to the N gene of TSWV. The complete genomic sequence of L, M, and S segments of TSWV 'Oxy' isolate were determined and deposited in GenBank under accession numbers LC671525, LC671638, and LC671639, respectively. In the phylogenetic tree analysis by maximum likelihood method, 'Oxy' isolate showed a high relationship with TSWV 'Gumi' isolate from Gerbera jamesonii in Gyeongsangbuk-do, Korea; for all three RNA segments. To our knowledge, this is the first report of TSWV infection of O. coeruleum in Korea.
Kim, Jeong-Soo;Lee, Su-Heon;Choi, Hong-Soo;Kim, Mi-Kyeong;Kwak, Hae-Ryun;Cho, Jeom-Deog;Choi, Gug-Seoun;Kim, Jin-Young
Research in Plant Disease
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v.15
no.1
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pp.1-7
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2009
Viruses diagnosed on crops including rice plants from farmers or agricultural extension agencies cover the country were 11 species including Broad bean wilt virus 2 (BBWV2) in 2008. Tomato spotted wilt virus (TSWV) was the most important virus having the detection rate of 22.9%. Two viruses of Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) and Tobacco leaf curl virus (TLCV) inducing leaf yellow and curl diseases on tomatoes were occurred newly with the detection rate of 12.2% and 4.0%, respectively, in 2008. Rice stripe virus (RSV) was occurred on 869.5 ha mainly at Jindo and Haenam areas in Jeollanamdo province. At Jindo area, 12 plots were damaged severely with the infected hill rate of 83.8%. At the main production area of oriental melon at Seongju, almost all fruits from whole sale market at Seongju were infected with Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) as the detection rate of 87%. The areas occurred TSWV in Korea were 25 totally from 2003 including 7 areas newly reported in 2008 including Naju in Jeoallanamdo. TSWV could be reduced as 0.1 % from 5.3% by covering insect proof net in vinyl house after chemical soil sterilization. Tomato yellow leaf curl disease was occurred on April in 2008 at Tongyoung area in Kyeongsangnamdo, and detected continuously at 13 areas, 7 in Kyeongsangnamdo, 4 in Jeollabukdo and 2 in Jejudo. Potato spindle tuber viroid (PSTVd) was occurred abruptly in a confined space of a civil breeding greenhouse and a cultivar evaluation field followed by disuse 17.4 M/T of potato tubers. No PSTVd was detected at 17 fields cultivated the related potatoes to the bred company by RT-PCR.
In August 2020, necrotic ringspots on leaves were observed on 20 from 143 Plantago asiatica plants in open fields in Eumseong, Chungcheongbuk-do. Eight symptomatic Plantago asiatica plants were subjected to investigation on viral infection by reverse transcription and polymerase chain reaction. Impatiens necrotic spot virus, tomato spotted wilt virus and cucumber mosaic virus were detected from the symptomatic plants. Two impatiens necrotic spot virus (INSV) isolates ('INSV-plantain kr1' and '-plantain kr5') were sequenced and analyzed by comparing L genomic segment, nucleoprotein (N) gene and non-structural protein S (NSs) gene sequences. The nucleotide sequence of 'INSV-plantain kr1' isolate (MW114834) was most closely related to that of a 'Phalaenopsis' isolate (GQ336991) from China in the L genomic segment. 'INSV-plantain kr1' and '-plantain kr5' isolates shared the highest identities with those from 'Pepe' isolate (LC384872) and 'J' isolate (AB109100) in the NSs gene, respectively, and with that from 'YSMi-SH' isolate (FN400773) in the N gene. Phylogenetic analysis based on L genomic segment grouped the INSV-plantain kr1 isolate together with isolates from Korea (LC384870), China (GU112505, GQ336991), and Italy (DQ425094). This is the first report on INSV in P. asiatica from Korea.
The kinds of crop requested from agricultural actual places of famers, Agricultural extension services and so forth was 8 including red pepper for vegetables, 4 including apple for fruit trees and 6 including chrysanthemum for flowers in 2010. The important vegetables in clinical diagnosis of viral diseases were tomato, watermelon and red pepper having the requested rate of 31.8%, 21.4% and 19.5%, respectively. On fruit trees, grape and apple were most common with the requested rate of 63.6% and 33.0%, orderly. On floral crops, tulip and cactus were damaged by viral diseases with the requested rate of 60.0% and 20.0%, orderly. On peppers and tomatoes, six viruses including Cucumber mosaic virus (CMV) and Broad bean wilt virus 2 (BBWV2) infected. Five viruses including Melon necrotic spot virus (MNSV) and CMV were identified from watermelons. On grapes, six viruses including Grapevine fleck virus (GFkV) infected. CMV was identified from six vegetables including pepper out of 8 kinds of vegetables and tulip plant. Total agents of virus and viroid species were 32 and 4 species, respectively, in 2010. Tomato yellow leaf curl disease by Tomato yellow leaf curl virus and Tobacco yellow leaf curl virus was occurred newly at 18 Si/Gun areas including Buan, Jeonbuk province in 2010 and the total areas were increased up to 58 Si/Gun from the first incidence in 2008. Tomato spotted wilt virus (TSWV) occurred newly at two areas of Jinan, Jeonbuk and Jeju in Jeju province in 2010, and the incidence areas were expanded to 25 Si/Gun areas from severe occurrence at Anyang area in 2004. No incidence of TSWV was recorded only in Gyeongbuk and Chungbuk province. Tomato bushy stunt virus occurred newly at Jinju, Gyeongnam, and it had the total incidence areas of 5 Si/Gun after first observation at Sacheon, Gyeongnam in 2004.
Alfalfa mosaic alfamoviruses(AIMV) were isolated from infected potato (Solanum tuberosum) and azuki bean (Paseolus angularis) in Korea. Two AIMV isolated from potatoes were named as strain KR (AIMV-KR1 and KR2) and AIMV isolated from azuki bean was named as strain Az (AIMV-Az). Each isolated AIMV strain was characterized by using their host ranges, symptom developments, serological relations and nucleotide sequence analysis of coat protein (CP) gene. Strains KR1, KR2, and Az were readily transmitted to 20 of 22 inoculated plant species including bean, cowpea, tomato, tobacco, and potato. AIMV-KR1 and KR2 produced the typical symptoms like chlorotic or necrotic spots in Chenopodium quinoa and Solanum tuberosum cv. Superior. AIMV-Az caused bright yellow mosaic symptom and leaf malformation in Nicotiana glauca, which were different from the common mosaic symptom caused by AIMV-KR1 and KR2. Electron microscope observation of purified virus showed bacilliform virions containing a single-stranded plus-strand RNAs of 3.6, 2.6, 2.0 and 0.9 kbp in length, respectively, similar in size and appearance to those of Alfamovirus. In SDS-PAGE, the coat protein of the two viruses formed a consistent band that estimated to be about 24kDa. The CP genes of the AIMV strains, KR1, KR2, and Az have been amplified by RT-PCR using the specific primers designed to amplify CP gene from viral RNA-3, cloned and sequenced. Computer aided analysis of the amplified cDNA fragment sequence revealed the presence of a single open reading frame capable of encoding 221 amino acids. The nucleotide and peptide sequence of viral CP gene showed that strain KR1, KR2, and Az shared highest nucleotide sequence identities with AIMV strain 425-M at 97.7%, 98.2%, and 97.2%, respectively. CP gene sequences of two strains were almost identical compared with each other. Altogether, physical, serological, biological and molecular properties of the purified virus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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