Effects of abscisic acid(ABA) and temperature on the anthocyanin accumulation and phenylalanine ammonia Iyase(PAL) activity were investigated in seedlings of Arabidopsis thaliana. In time course study, exogenous application of ABA $(50-1000\;{\mu}M)$ led to a noticeable increase in anthocyanin pigments which persisted over the following 5 days. Anthocyanins increased in concert with the chlorophyll loss. The activity of PAL, a key enzyme in the phenylpropanoid pathway, increased on exposure to ABA and reached maximum on the 4th day, This result shows that anthocyanin synthesis and PAL activity have a close physiological relationships. In the effects of temperatures ($10^{\circ}C,\;17^{\circ}C,\;25^{\circ}C$and $30^{\circ}C$) on anthocyanin accumulation and PAL activity in seedlings, a moderate-low temperatures ($17^{\circ}C$) enhanced both anthocyanin content and PAL activity, whereas elevated temperatures ($30^{\circ}C$) showed low levels of anthocyanin and PAL activity, suggesting a correlation between temperature-induced anthocyanin synthesis and the accumulation of PAL mRNA. Simultaneous application of ABA with temperatures Induced higher anthocyanin synthesis and PAL activity in seedlings than ABA or temperature stress alone. Moderate-low temperature with ABA exposure elicited the maximal induction of anthocyanin synthesis and PAL activity. Therefore, ABA treatment significantly increased thermotolerance in .A. thalinan seedlings. Ethephon and ABA showed similar mode of action in physiological effects on anthocyanin accumulation and PAL activity. Our data support that anthocyanins may be protective in preventing damage caused by environmental stresses and play an important role in the acquisition of freezing tolerance.
We previously identified the rice gene, OsSAP, as an encoder of a highly conserved putative senescence-associated protein that was shown to have anti-apoptotic activity. To confirm the role of OsSAP in inducing abiotic stress tolerance in rice, we introduced OsSAP and AtBI-1, a plant homologue of Bax inhibitor-1, under the control of the CaMV 35S promoter into the rice genome through Agrobacterium-mediated transformation. The OsSAP transformants showed a similar chlorophyll index after salinity treatments with AtBI-1. Furthermore, we compared the effects of salinity stress on leaves and roots by examining the hormone levels of abscisic acid (ABA), jasmonic acid (JA), gibberellic acid (GA3), and zeatin in transformants compared to the control. With the exception of phytohormones, stress-induced changes in hormone levels putatively related to stress tolerance have not been investigated previously. Hormonal level analysis confirmed the lower rate of stress in the transformants compared to the control. The levels of ABA and JA in OsSAP and AtBI-1 transformants were similar, where stress rates increased after one week and decreased after a two week period of drought; there was a slightly higher accumulation compared to the control. However, a similar trend was not observed for the level of zeatin, as the decrease in the level of zeatin accumulation differed in both OsSAP and AtBI-1 transformants for all genotypes during the early period of salinity stress. The GA3 level was detected under normal conditions, but not under salinity stress.
Proceedings of the Korean Society of Life Science Conference
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2005.04a
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pp.23-36
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2005
Bax, a mammalian pro-apoptotic member of the Bcl-2 family, induces cell death when expressed In yeast. To investigate whether .Bax expression can induce cell death in plant, we produced transgenic Arabidopsis plants that contained murine Bax cDNA under control of a glucocorticoid-inducible promoter. Transgenic plants treated with dexamethasone, a strong synthetic glucocorticoid, induced Bax accumulation and cell death, suggesting that some elements of cell death mechanism by Bax may be conserved among various orgarusms. Therefore, we developed novel yeast genetic system, and cloned several Plant Bax Inhibitors (PBIs). Here, we report the function of two PBIs In detail. PBIl is ascorbate peroxidase (sAPX). Fluorescence method of dihydrorhodamine123 oxidation revealed that expression of Bax in yeast cells generated reactive oxygen species (ROS), and which was greatly reduced by co-expression with sAPX. These results suggest that sAPX inhibits the generation of ROS by Bax, which in turn suppresses Bax-induced cell death in yeast. PBI2 encodes nucleoside diphosphate kinase (NDPK). ROS stress strongly induces the expression of the NDPK2 gene in Arabidopsis thaliana (AtNDPK2). Transgenic plants overexpressing AtNDPK2 have lower lovels of ROS than wildtype plants. Mutants lacking AtNDPK2 had higher levels of ROS than wildtype. H$_{2O2}$ treatment induced the phosphorylation of two endogenous proteins whose molecular weights suggested they are AtMPK3 and AtMPK6. In the absence of H2O2 treatment, phosphorylation of these proteins was slightly elevated in plants overexpressing AtNDPK2 but markedly decreased In the AtNDPK2 deletion mutant. Yeast two-hybrid and in vitro protein pull-down assays revealed that AtNDPK2 specifically interacts with AtMPK3 and AtMPK6. Furthermore, AtNDPK2 also enhances the MBP phosphorylation activity of AtMPK3 i'n vitro. Finally, constitutive overexpression of AtNDPK2 in Arabidopsis plants conferred an enhanced tolerance to multiple environmental stresses that elicit ROS accumulation In situ. Thus, AtNDPK2 appears to play a novel regulatory role in H2O2-mediated MAPK signaling in plants.
[ ${\Delta}^1$ ]pyrroline-5-carboxylate synthetase (P5CS) is a proline biosynthetic pathway enzyme and is known for conferring enhanced salt and drought stress in transgenics carrying this gene in a variety of plant species; however, the wild-type P5CS is subjected to feedback control. Therefore, in the present study, we used a mutagenized version of this osmoregulatory gene-P5CSF129A, which is not subjected to feedback control, for producing transgenic indica rice plants of cultivar Karjat-3 via Agrobacterium tumefaciens. We have used two types of explants for this purpose, namely mature embryo-derived callus and shoot apices. Various parameters for transformation were optimized including antibiotic concentration for selection, duration of cocultivation, addition of phenolic compound, and bacterial culture density. The resultant primary transgenic plants showed more enhanced proline accumulation than their non-transformed counterparts. This proline level was particularly enhanced in the transgenic plants of next generation ($T_1$) under 150 mM NaCl stress. The higher proline level shown by transgenic plants was associated with better biomass production and growth performance under salt stress and lower extent of lipid peroxidation, indicating that overproduction of proline may have a role in counteracting the negative effect of salt stress and higher maintenance of cellular integrity and basic physiological processes under stress.
Rice is one of the world's staple crops and is a major source of carbohydrate. Rice is exported from several countries, providing a major source of income. There are many documents reporting that rice is a salt-sensitive crop in its developmental stages. The objective of this investigation is to evaluate the effective salt-tolerance defense mechanisms in aromatic rice varieties. Pathumthani 1(PT1), Jasmine(KDML105), and Homjan(HJ) aromatic rice varieties were chosen as plant materials. Rice seedlings photoautotrophically grown in-vitro were treated with 0, 85, 171, 256, 342, and 427 mM NaCl in the media. Data, including sodium ion$(Na^+)$ and potassium ion$(K^+)$ accumulation, osmolarity, chlorophyll pigment concentration, and the fresh and dry weights of seedlings were collected after salt-treatment for 5 days. $Na^+$ in salt-stressed seedlings gradually accumulated, while $K^+$ decreased, especially in the 342-427 mM NaCl salt treatments. The $Na^+$ accumulation in both salt-stressed root and leaf tissues was positively related to osmolarity, leading to chlorophyll degradation. In the case of the different rice varieties, the results showed that the HJ variety was identified as being salt-tolerant, maintaining root and shoot osmolarities as well as pigment stabilization when exposed to salt stress or $Na^+$ enrichment in the cells. On the other hand, PT1 and KDML105 varieties were classified as salt-sensitive, determined by chlorophyll degradation using Hierarchical cluster analysis. In conclusion, the HJ-salt tolerant variety should be further utilized as a parental line or genetic resource in breeding programs because of the osmoregulation defensive response to salt-stress.
Root colonization by Pseudomonas chlororaphis O6 induces systemic drought tolerance in Arabidopsis thaliana. Microarray analysis was performed using the 22,800-gene Affymetrix GeneChips to identify differentially-expressed genes from plants colonized with or without P. chlororaphis O6 under drought stressed conditions or normal growth conditions. Root colonization in plants grown under regular irrigation condition increased transcript accumulation from genes associated with defense, response to reactive oxygen species, and auxin- and jasmonic acid-responsive genes, but decreased transcription factors associated with ethylene and abscisic acid signaling. The cluster of genes involved in plant disease resistance were up-regulated, but the set of drought signaling response genes were down-regulated in the P. chlororaphis O6-colonized under drought stress plants compared to those of the drought stressed plants without bacterial treatment. Transcripts of the jasmonic acid-marker genes, VSP1 and pdf-1.2, the salicylic acid regulated gene, PR-1, and the ethylene-response gene, HEL, also were up-regulated in plants colonized by P. chlororaphis O6, but differed in their responsiveness to drought stress. These data show how gene expression in plants lacking adequate water can be remarkably influenced by microbial colonization leading to plant protection, and the activation of the plant defense signal pathway induced by root colonization of P. chlororaphis O6 might be a key element for induced systemic tolerance by microbes.
Many studies have been conducted to understand plant stress responses to salinity because irrigation-dependent salt accumulation compromises crop productivity and also to understand the mechanism through which some plants thrive under saline conditions. As mechanistic understanding has increased during the last decades, discovery-oriented approaches have begun to identify genetic determinants of salt tolerance. In addition to osmolytes, osmoprotectants, radical detoxification, ion transport systems, and changes in hormone levels and hormone-guided communications, the Salt Overly Sensitive (SOS) pathway has emerged to be a major defense mechanism. However, the mechanism by which the components of the SOS pathway are integrated to ultimately orchestrate plant-wide tolerance to salinity stress remains unclear. A higher-level control mechanism has recently emerged as a result of recognizing the involvement of GIGANTEA (GI), a protein involved in maintaining the plant circadian clock and control switch in flowering. The loss of GI function confers high tolerance to salt stress via its interaction with the components of the SOS pathway. The mechanism underlying this observation indicates the association between GI and the SOS pathway and thus, given the key influence of the circadian clock and the pathway on photoperiodic flowering, the association between GI and SOS can regulate growth and stress tolerance. In this review, we will analyze the components of the SOS pathways, with emphasis on the integration of components recognized as hallmarks of a halophytic lifestyle.
Gambichler, Vanessa;Zuccarello, Giuseppe C.;Karsten, Ulf
ALGAE
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v.36
no.2
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pp.137-146
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2021
Intertidal macroalgae are regularly exposed to hypo- or hypersaline conditions which are stressful. However, red algae in New Zealand are generally poorly studied in terms of salinity tolerance. Consequently, two native (Bostrychia arbuscula W. H. Harvey [Ceramiales], Champia novae-zelandiae [J. D. Hooker & Harvey] Harvey [Rhodymeniales]) and one introduced red algal taxon (Schizymenia spp. J. Agardh [Nemastomatales]) were exposed for 5 days in a controlled salt stress experiment to investigate photosynthetic activity and osmotic acclimation. The photosynthetic activity of B. arbuscula was not affected by salinity, as reflected in an almost unchanged maximum quantum yield (Fv/Fm). In contrast, the Fv/Fm of C. novae-zelandiae and Schizymenia spp. strongly decreased under hypo- and hypersaline conditions. Treatment with different salinities led to an increase of the total organic osmolyte concentrations with rising salt stress in B. arbuscula and Schizymenia spp. In C. novae-zelandiae the highest organic osmolyte concentrations were recorded at SA 38, followed by declining amounts with further hypersaline exposure. In B. arbuscula, sorbitol was the main organic osmolyte, while the other taxa contained floridoside. The data presented indicate that all three red algal species conspicuously differ in their salt tolerance. The upper intertidal B. arbuscula exhibited a wide salinity tolerance as reflected by unaffected photosynthetic parameters and strong sorbitol accumulation under increasing salinities, and hence can be characterized as euryhaline. In contrast, the introduced Schizymenia spp. and native C. novae-zelandiae, which preferentially occur in the mid-intertidal, showed a narrower salinity tolerance. The species-specific responses reflect their respective vertical positions in the intertidal zone.
Pseudomonas sp. BCNU 106 accumulated approximately 4.12 mM trehalose after cultivation of 12 hr probably by the arising action of trehalose-6-phosphate synthase/phosphatase. The cDNA clones of trehalose-6-phosphate synthase/ phosphatase were isolated from Pseudomonas sp. BCNU 106, and named as PsTPS and PsTPP(Pseudomonas sp. BCNU 106 trehalose-6-phosphate synthase/phosphatase). The two mRNA levels of trehalose-6-phosphate synthase/ phosphatase peaked at 12 hr after exposure to toluene, and thereafter were declined slightly These results support an important role of trehalose accumulation by expressions of PsTPS and PsTPP in toluene-tolerance of Pseudomonas sp. BCNU 106.
Kim, Jun Hyeong;Kwon, Kang Mu;Yang, Jae Heon;Ki, Byeolhui;Kim, Dae Keun
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.50
no.4
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pp.299-304
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2019
In order to research the anti-oxidative activity of methanol extract of Phellinus baumii Pilat (Hymenochaetaceae), Caenorhabditis elegans model system was used. Ethyl acetate soluble fraction of the methanol extract showed the most potent DPPH radical scavenging activity. The ethyl acetate fraction was measured on its activities of superoxide dismutase (SOD), catalase, and oxidative stress tolerance with reactive oxygen species (ROS) level in C. elegans. Furthermore, to see if regulation of stress-response gene is responsible for the increased stress tolerance of C. elegans which treated by the ethyl acetate fraction, we checked SOD-3 expression using a transgenic strain. Consequently, the ethyl acetate fraction of P. baumii increased SOD and the catalase activities in a dose-dependent manner in C. elegans, reduced ROS accumulation dose-dependently. Besides, the ethyl acetate fraction-treated CF1553 worms showed higher SOD-3::GFP intensity than the control worms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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