This study was carried out to obtain the basic information for breeding cold-tolerant rice varieties with high yield-productivity through wide crosses between indica and japonica rice. Genetic analysis was conducted using 55 F$_1$s obtained from half-diallel crosses among eleven cultivars of various origin including indica and japonica rice. Screening for cold tolerance was done with cold-water irrigation after transplanting until ripening stage. Both general combining ability (GCA) and specific combining ability (SCA) effects were highly significant in all characters associated with dry matter accumulation at 30 and 50days after cold-water irrigation (DAC). The variance of GCA was much larger than that of SCA in plant height, shoot dry weight per plant (DWP), crop growth rate (CGR) and cold-water response index (CRI) of these characters except CRI of shoot dry weight per plant. The DWP, CGR and CRI of these characters of Gaochan 102, Tong88-7 and TR22183 were markedly higher than those of the others. GCA effects of these varieties on DWP, CGR and their CRI were also higher than those of the others, indicating that they are useful as promising parents for breeding cold-tolerant varieties. Analysis of genetic parameters for 11$\times$11 half-diallel F$_1$s revealed that inter-locus gene interaction were concerned in the expression of plant height at 50 DAC, CRI of DWP at 50 DAC, and CRI of CGR, and that intra-locus gene interaction for plant height and the other characters were partial dominance and over-dominance, respectively. Narrow-sense heritability (h$^2$$_{N}$) was the highest in plant height as 0.729, and the lowest in CRI of DWP at 30 DAC as 0.048, suggesting that selection for cold tolerance will be quite effective in case that the selection criterion is the performance itself.f.
We previously identified the rice gene, OsSAP, as an encoder of a highly conserved putative senescence-associated protein that was shown to have anti-apoptotic activity. To confirm the role of OsSAP in inducing abiotic stress tolerance in rice, we introduced OsSAP and AtBI-1, a plant homologue of Bax inhibitor-1, under the control of the CaMV 35S promoter into the rice genome through Agrobacterium-mediated transformation. The OsSAP transformants showed a similar chlorophyll index after salinity treatments with AtBI-1. Furthermore, we compared the effects of salinity stress on leaves and roots by examining the hormone levels of abscisic acid (ABA), jasmonic acid (JA), gibberellic acid (GA3), and zeatin in transformants compared to the control. With the exception of phytohormones, stress-induced changes in hormone levels putatively related to stress tolerance have not been investigated previously. Hormonal level analysis confirmed the lower rate of stress in the transformants compared to the control. The levels of ABA and JA in OsSAP and AtBI-1 transformants were similar, where stress rates increased after one week and decreased after a two week period of drought; there was a slightly higher accumulation compared to the control. However, a similar trend was not observed for the level of zeatin, as the decrease in the level of zeatin accumulation differed in both OsSAP and AtBI-1 transformants for all genotypes during the early period of salinity stress. The GA3 level was detected under normal conditions, but not under salinity stress.
Proceedings of the Korean Society of Life Science Conference
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2005.04a
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pp.23-36
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2005
Bax, a mammalian pro-apoptotic member of the Bcl-2 family, induces cell death when expressed In yeast. To investigate whether .Bax expression can induce cell death in plant, we produced transgenic Arabidopsis plants that contained murine Bax cDNA under control of a glucocorticoid-inducible promoter. Transgenic plants treated with dexamethasone, a strong synthetic glucocorticoid, induced Bax accumulation and cell death, suggesting that some elements of cell death mechanism by Bax may be conserved among various orgarusms. Therefore, we developed novel yeast genetic system, and cloned several Plant Bax Inhibitors (PBIs). Here, we report the function of two PBIs In detail. PBIl is ascorbate peroxidase (sAPX). Fluorescence method of dihydrorhodamine123 oxidation revealed that expression of Bax in yeast cells generated reactive oxygen species (ROS), and which was greatly reduced by co-expression with sAPX. These results suggest that sAPX inhibits the generation of ROS by Bax, which in turn suppresses Bax-induced cell death in yeast. PBI2 encodes nucleoside diphosphate kinase (NDPK). ROS stress strongly induces the expression of the NDPK2 gene in Arabidopsis thaliana (AtNDPK2). Transgenic plants overexpressing AtNDPK2 have lower lovels of ROS than wildtype plants. Mutants lacking AtNDPK2 had higher levels of ROS than wildtype. H$_{2O2}$ treatment induced the phosphorylation of two endogenous proteins whose molecular weights suggested they are AtMPK3 and AtMPK6. In the absence of H2O2 treatment, phosphorylation of these proteins was slightly elevated in plants overexpressing AtNDPK2 but markedly decreased In the AtNDPK2 deletion mutant. Yeast two-hybrid and in vitro protein pull-down assays revealed that AtNDPK2 specifically interacts with AtMPK3 and AtMPK6. Furthermore, AtNDPK2 also enhances the MBP phosphorylation activity of AtMPK3 i'n vitro. Finally, constitutive overexpression of AtNDPK2 in Arabidopsis plants conferred an enhanced tolerance to multiple environmental stresses that elicit ROS accumulation In situ. Thus, AtNDPK2 appears to play a novel regulatory role in H2O2-mediated MAPK signaling in plants.
Rice is one of the world's staple crops and is a major source of carbohydrate. Rice is exported from several countries, providing a major source of income. There are many documents reporting that rice is a salt-sensitive crop in its developmental stages. The objective of this investigation is to evaluate the effective salt-tolerance defense mechanisms in aromatic rice varieties. Pathumthani 1(PT1), Jasmine(KDML105), and Homjan(HJ) aromatic rice varieties were chosen as plant materials. Rice seedlings photoautotrophically grown in-vitro were treated with 0, 85, 171, 256, 342, and 427 mM NaCl in the media. Data, including sodium ion$(Na^+)$ and potassium ion$(K^+)$ accumulation, osmolarity, chlorophyll pigment concentration, and the fresh and dry weights of seedlings were collected after salt-treatment for 5 days. $Na^+$ in salt-stressed seedlings gradually accumulated, while $K^+$ decreased, especially in the 342-427 mM NaCl salt treatments. The $Na^+$ accumulation in both salt-stressed root and leaf tissues was positively related to osmolarity, leading to chlorophyll degradation. In the case of the different rice varieties, the results showed that the HJ variety was identified as being salt-tolerant, maintaining root and shoot osmolarities as well as pigment stabilization when exposed to salt stress or $Na^+$ enrichment in the cells. On the other hand, PT1 and KDML105 varieties were classified as salt-sensitive, determined by chlorophyll degradation using Hierarchical cluster analysis. In conclusion, the HJ-salt tolerant variety should be further utilized as a parental line or genetic resource in breeding programs because of the osmoregulation defensive response to salt-stress.
Heat stress is an agricultural problem for Gerbera jamesonii, and it often causes poor seedling growth, reduced flower yield and undesirable ornamental characteristics of flowers. However, little is known about the effect of heat stress on the morphological, physiological and biochemical characteristics of gerbera plants. Here, the responses of six cultivars of Gerbera jamesonii to heat stress were investigated. Under a 1-d heat treatment at $45^{\circ}C$, the leaves of gerbera cultivars showed yellowing, wilting, drying and death to varying degrees. The heat treatment also resulted in increased electrical conductivity, decreased soluble protein and chlorophyll contents, and the accumulation of malondialdehyde (MDA) and proline in leaves. Moreover, heat tolerance differed among the six tested gerbera cultivars. Our results demonstrated that among the six gerbera cultivars, 'Meihongheixin' is a heat-resistant cultivar, whereas 'Beijixing' is a heat-sensitive one. 'Shijihong' and 'Linglong' are relatively heat-resistant cultivars, and 'Dadifen' and 'Taiyangfengbao' are relatively heat sensitive.
To enhance phytoremediation, which removes heavy metal from soil, transgenic plants were applied to contaminated soil. We constructed a transformation vector expressing both $TgMTP_1$ (T. goesingense metal tolerance protein):HA and TgMTP:GFP genes. Transgenic plants were generated using an Agrobacterium-mediated transformation system that expressed the two vectors. Screening and analysis confirmed the incorporation of foreign genes into the Arabidopsis thaliana genome. Callus was induced in the 116 T3 line. These transgenic plants and calli were used for further analyses on the accumulation of Ni. The 116 T3-line plants and calli from selected lines were resistant to heavy metals and accumulated Ni in their leaves. The expression level of TgMTP RNA was equal in all leaves, but protein stability increased in the leaves with Ni treatment. According to these results, we suggest that $TgMTP_1$-overexpressing plants may be useful for phytoremediation of soil.
Proline is known as an osmotrotectant to enhance tolerance against both salt and dehydration stresses. A P5CS ($\Delta^1$-pyrroline-5-carboxylate synthetase) plays a major role in regulation of synthesis of proline. An overexpression of the mothbean P5CS gene in transgenic tobacco plant increased the levels of proline and osmotolerance. In an attempt to look for the possibility to use content of proline as well as a level of P5CS gene expression as molecular markers for salt tolerance, the amounts of proline and transcript levels of P5CS were measured as functions of either concentration of NaCl or length of treatment period among different species of zoysiagrass. Hybridzoysia showed the highest level of proline ($329\mu\textrm{g}$/g.f.w.) among five different species of zoysiagrass at 250 mM NaCl in 24 hours. The level of P5CS transcript was also the highest in the hybridzoysia at 250 mM NaCl in 24 hours. The transcriptions of P5CS gene were induced at the rates of 1.2, 1.2, 1.8, and 1.8, upon treatment of 250 mM NaCl in Z. japonica, Z. matrella, Z. sinica and hybridzoysia respectively. Based on a correlation between the level of P5CS transcript and the proline content among different species of zoysiagrass, a comparative structural analysis of the gene for P5CS from either Z. sinica or hybridzoysia may lead to an understanding of mechanism for salt tolerance shown differently among zoysiagrasses.
Abiotic stress conditions such as cold, drought, and salinity trigger physiological and morphological changes and yield loss in plants. Hence, plants adapt to adverse environments by developing tolerance through complex regulation of genes related to various metabolic processes. This study was conducted to construct a coexpression network for multidirectional analysis of salt-stress response genes in Brassica rapa (Chinese cabbage). To construct the coexpression network, we collected KBGP-24K microarray data from the B. rapa EST and microarray database (BrEMD) and performed time-based expression analyses of B. rapa plants. The constructed coexpression network model showed 1,853 nodes, 5,740 edges, and 142 connected components (correlation coefficient > 0.85). On the basis of the significantly expressed genes in the network, we concluded that the development of salt tolerance is closely related to the activation of $Na^+$ transport by reactive oxygen species signaling and the accumulation of proline in Chinese cabbage.
Bacterial biofilms are spatially structured communities that contain bacterial cells with a wide range of physiological states. The spatial distribution and speciation of copper in unsaturated Pseudomonas putida CZ1 biofilms that accumulated 147.0 mg copper per g dry weight were determined by transmission electron microscopy coupled with energy dispersive X-ray analysis, and micro-X-ray fluorescence microscopy coupled with micro-X-ray absorption near edge structure (micro-XANES) analysis. It was found that copper was mainly precipitated in a $75{\mu}m$ thick layer as copper phosphate in the middle of the biofilm, while there were two living cell layers in the air-biofilm and biofilm-medium interfaces, respectively, distinguished from the copper precipitation layer by two interfaces. The X-ray absorption fine structure analysis of biofilm revealed that species resembling $Cu_3(PO_4)_2$ predominated in biofilm, followed by Cu-Citrate- and Cu-Glutathione-like species. Further analysis by micro-XANES revealed that 94.4% of copper were $Cu_3(PO_4)_2$-like species in the layer next to the air interface, whereas the copper species of the layer next to the medium interface were composed by 75.4% $Cu_3(PO_4)_2$, 10.9% Cu-Citrate-like species, and 11.2% Cu-Glutathione-like species. Thereby, it was suggested that copper was initially acquired by cells in the biofilm-air interface as a citrate complex, and then transported out and bound by out membranes of cells, released from the copper-bound membranes, and finally precipitated with phosphate in the extracellular matrix of the biofilm. These results revealed a clear spatial pattern of copper precipitation in unsaturated biofilm, which was responsible for the high copper tolerance and accumulation of the biofilm.
Fructans are polyfructose molecules that function as nonstructural storage carbohydrates in several plants. In addition, it has been suggested that, due to their solubility, they can play an important role in helping plants survive periods of osmotic stress. In order to study the effect of levan synthesis on plant growth, the coding region of the levansucrase gene, which was isolated from Zymomonas mobilis, was introduced into tobacco plants using Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. The presence of the levansucrase gene in transgenic plants was verified by genomic DNA gel blot analysis. RNA gel blot and immunoblot analyses showed an accumulation of the corresponding transcript and protein product of the bacterial levansucrase gene in transgenic plants. Furthermore, a thin layer chromatography analysis revealed that fructans were synthesized and deposited in transgenic tobacco plants. When $T_1$ seeds were germinated and grown under polyethylene glycol-mediated drought stress or cold stress, the transgenic seedlings displayed a substantially higher level of growth than that of untransformed plants. These results suggest that fructans may playa significant role in the tolerance of plants under osmotic stress.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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