The purpose of this study was to regenerate human dental pulp tissues similar to native pulp tissues. Using the mixture of type I collagen solution, primary cells collected from the different tissues (pulp, gingiva, and skin) and NIH 3T3 ($1{\;}{\times}{\;}10^5{\;}cells/ml/well$) were cultured at 12-well plate at $37^{\circ}C$ for 14 days. Standardized photographs were taken with digital camera during 14 days and the diameter of the contracted collagen gel matrix was measured and statistically analyzed with student t-test. As one of the pulp tissue engineering, normal human dental pulp tissue and collagen gel matrix cultured with dental pulp cells for 14 days were fixed and stained with Hematoxyline & Eosin. According to this study, the results were as follows: 1. The contraction of collagen gel matrix cultured with pulp cells for 14 days was significantly higher than other fibroblasts (gingiva, skin) (p < 0.05), 2. The diameter of collagen gel matrix cultured with pulp cells was reduced to 70.4% after 7 days, and 57.1% after 14 days. 3. The collagen gel without any cells did not contract, whereas the collagen gel cultured with gingiva and skin showed mild contraction after 14 days (88.1% and 87.6% respectively). 4. The contraction of the collagen gel cultured with NIH 3T3 cells after 14 days was higher than those cultured with gingival and skin fibroblasts, but it was not statistically significant (72.1%, p > 0.05). 5. The collagen gel matrix cultured with pulp cells for 14 days showed similar shape with native pulp tissue without blood vessels. This approach may provide a means of engineering a variety of other oral tissue as well and these cell behaviors may provide information needed to establish pulp tissue engineering protocols.
Park, Jung-Hyun;Choi, Byung-Ho;Kang, Jung-Wan;Yook, Jong-In;Kim, Jin;Yi, Choong-Kook
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.26
no.6
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pp.565-580
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2000
This study was designed to evaluate the influence of cultured epidermal tissue graft and the administration of transforming growth factor(TGF)-${\beta}_3$ on maxillary growth in surgically created palatal defects. A total of 155 rats were divided into 2 groups according to surgical timing : postnatal 2 weeks(n=95), 4 weeks(n=40) and control(unoperated) group(n=20). The postnatal 2-week surgical group was subdivided into 3 groups according to repair methods: conventional surgery(Von Langenbeck technique)group(n=23); cultured tissue graft group(n=25); and full thickness skin graft group(n=25). Additionally, recombinant human TGF-${\beta}_3$ was administered(30ng or 150ng) on collagen matrix in surgically created palatal defects during surgery(9 conventional surgeries, 9 cultured tissue grafts) in 2-week-old rats. The results showed that all types of surgical treatment decreased maxillary growth compared with the control(unoperated) group(p<0.0001). On the other hand, the tissue graft group, whether cultured tissue or grafted skin, contributed to increased maxillary growth(p<0.0001).And exogenous TGF-${\beta}_3$ might play a role in connective tissue proliferation and new bone generation during wound healing on palatal defects. Our results suggest that grafting cultured epidermis with collagen matrix decreases the scar tension on maxillary growth more than conventional palatal surgery does. Therefore, exogenous TGF-${\beta}_3$ may contribute to accelerate wound healing on palatal defects.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.37
no.12
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pp.1654-1659
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2008
The aim of this study was to compare the fermentation characteristics of tissue cultured mountain ginseng, extruded tissue cultured mountain ginseng, and root hair of red ginseng. Also, pH, acidity, brix, reducing sugar, total sugar, and alcohol were analyzed. The extrusion conditions were barrel temperature of 110 and $140^{\circ}C$ and moisture content of 25 and 35%. Fermentation temperature was $27^{\circ}C$ for 15 days and the cultivation was fixed with Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus usamii, and Rhizopus japonicus. The results showed that pH, brix, reducing sugar content, and total sugar content of fermented broths were decreased after 5 days and then maintained steadily for the following 10 days. Acidity of final fermented broths were 1.12% (root hair of red ginseng), 1.19% (tissue cultured mountain ginseng), and $0.97{\sim}1.02%$ (extruded tissue cultured mountain ginseng), respectively. Alcohol content of final fermented broths were 3.82% (root hair of red ginseng), 0.91% (tissue cultured mountain ginseng), and $1.86{\sim}2.18%$ (extruded tissue cultured mountain ginseng). The fermentation efficiency of extruded tissue cultured mountain ginseng (barrel temperature $140^{\circ}C$, moisture content 25%) were the highest. In conclusion, the fermentation efficiency was increased by extrusion process.
The purpose of this study was to evaluate the response in aspect of attachment and growth rate of osteoblasts and growth rate of osteoblasts and human gingival fibroblasts to the commercially pure titanium(CP titanium)and titanium alloy(Ti-6AI-4V) that are used widely as implant materials, and to obtain the basic information to ideal implant materials. In the studly, commercially pure titanium in first test group, titanium alloy(Ti-6AI-4V) in second test group, cobalt-chrome-molybdenum alloy(Co-Cr-Mo alloy) in positive control group, and tissue culture polystyrene plate in negative control group were used. The results of this study were as follows. 1. Bone marrow cells cultured on CP titanium and Ti-6Al-4V showed significantly greater attachment and growth rate(p(0.05) compared to Co-Cr-Mo alloy in each time. 2. There were no significant differences(p>0.05) in attachment and growth rate of bone marrow cells cultured on CP titanium and Ti-6AI-4V or tissue culture plate. 3. Most bone marrow cells cultured on CP titanium, Ti-6Al-4V and tissue culture plate were attached well to each substratum in first 2days, and then, grew at higher growth rate. On the other hand, some cells cultured on Co-Cr-Mo alloy failed to attach in first 2 days, and then, attached cells grew at lower growth rate than other groups. 4. Attachment and growth rates of gingival fibroblasts cultured on CP titanium and Ti-6Al-4V showed no significant differences(p>0.05) compared to Co-Cr-Mo alloy in 2 days, but significantly greater increase(p<0.05) in 5 and 9 days. 5. There were no significantly differences(p>0.05) between growth rates on gingival fibroblasts cultured on CP titanium, Ti-6Al-4V and tissue culture plate in 2 and 5days, but a significant lower growth rate(p<0.05) on CP titanium and Ti-6Al-4V versus tissue culture plate. 6. Some gingival fibroblasts cultured on all specimen groups failed to attach, but attached cells grew well, especially on CP titanium, Ti-GAl-4V and tissue culture plate. 7. There were no significant differences(P>0.05) between growth rates of both bone marrow cells and gingival fibroblasts cultured on CP titanium and Ti-6AI-4V. As a result of this study, both commercially pure titanium and Ti-6AI-4V showed excellent biocompatibility and there was no significant difference in the cellular response to the both metals. Bone marrow cells cultured on each substratum showed significantly greater growth rate and responded sensitively to cytotoxic effects of metal surfaces compared to gingival fibroblasts. Considering cell response to the substrate, it was likely that the composition itself of titanium metals have no significant effect on the biocompatibility. Further study need to be done to evaluate the influence of surface characteristics on cellular responses.
Kim, Seong Sin;Kim, Byung-Ock;Park, Joo-Cheol;Jang, Hyun-Seon
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.36
no.3
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pp.757-765
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2006
Human periodontal ligament fibroblasts (hPDLF) are very important for curing the periodontal tissue because they can be differentiated into various cells. A tissue engineering approach using a cell-scaffold is essential for comprehending today's periodontal tissue regeneration procedure. This study examined the possibility of using an acellular dermal matrix as a scaffold for human periodontalligament fibroblast (hPDLF). The hPDLF was isolated from the middle third of the root of periodontally healthy teeth extracted for orthodontic reasons. The cells were cultured in a medium containing Dulbecco's modified Eagle medium supplemented with 10% fetal bovine serum at $37^{\circ}C$ in humidified air with 5% $CO_2$. The acellular dermal matrix(ADM) was provided by the US tissue banks(USA). Second passage cells were used in this study. The hPDLF cells were cultured with the acellular dermal matrix for 2 days, and the dermal matrix cultured by the hPDLF was transferred to a new petri dish and used as the experimental group. The control group was cultured without the acellular dermal matrix, The control and experimental cells were cultured for six weeks. The hPDLF cultured on the acellular dermal matrix was observed by Transmission Electron microscopy (TEM). Electron micrography shows that the hPDLF was proliferated on the acellular dermal matrix. This study suggests that the acellular dermal matrix can be used as a scaffold for hPDLF.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.35
no.2
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pp.111-116
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2009
Gymnema sylvestre, a traditional India medicine called a 'Gagaimogouip' in Korea, has been used to regulate sugar metabolism in patients with diabetes mellitus. First, we induced callus from Gymnema sylvestre leaf and mode extract from cultured callus. In this study, we investigated the anti-obesity effect of tissue-cultured Gymnema sylvestre leaf extract in 3T3-L1 cells. The tissue-cultured Gymnema sylvestre extract inhibited the cytoplasmic lipid accumulation as well as adipogenic differentiation of preadipocytes. The tissue-cultured Gymnema sylvestre extract inhibited insulin-induced predipocyte differentiation through the inhibition of expression of the early adipogenic transcription factor C/EBP-${\alpha}$ that regulate adipogenesis. These results indicate that tissue-cultured Gymnema sylvestre extract may be potential natural ingredient for slimming cosmetic products.
Safi, Ihab Nabeel;Hussein, Basima Mohammed Ali;Al-Shammari, Ahmed Majeed
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.52
no.3
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pp.242-257
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2022
Purpose: This study investigated periodontal ligament (PDL) restoration in osseointegrated implants using stem cells. Methods: Commercial pure titanium and zirconium oxide (zirconia) were coated with beta-tricalcium phosphate (β-TCP) using a long-pulse Nd:YAG laser (1,064 nm). Isolated bone marrow mesenchymal cells (BMMSCs) from rabbit tibia and femur, isolated PDL stem cells (PDLSCs) from the lower right incisor, and co-cultured BMMSCs and PDLSCs were tested for periostin markers using an immunofluorescent assay. Implants with 3D-engineered tissue were implanted into the lower right central incisors after extraction from rabbits. Forty implants (Ti or zirconia) were subdivided according to the duration of implantation (healing period: 45 or 90 days). Each subgroup (20 implants) was subdivided into 4 groups (without cells, PDLSC sheets, BMMSC sheets, and co-culture cell sheets). All groups underwent histological testing involving haematoxylin and eosin staining and immunohistochemistry, stereoscopic analysis to measure the PDL width, and field emission scanning electron microscopy (FESEM). The natural lower central incisors were used as controls. Results: The BMMSCs co-cultured with PDLSCs generated a well-formed PDL tissue that exhibited positive periostin expression. Histological analysis showed that the implantation of coated (Ti and zirconia) dental implants without a cell sheet resulted in a well-osseointegrated implant at both healing intervals, which was confirmed with FESEM analysis and negative periostin expression. The mesenchymal tissue structured from PDLSCs only or co-cultured (BMMSCs and PDLSCs) could form a natural periodontal tissue with no significant difference between Ti and zirconia implants, consequently forming a biohybrid dental implant. Green fluorescence for periostin was clearly detected around the biohybrid implants after 45 and 90 days. FESEM showed the invasion of PDL-like fibres perpendicular to the cementum of the bio-hybrid implants. Conclusions: β-TCP-coated (Ti and zirconia) implants generated periodontal tissue and formed biohybrid implants when mesenchymal-tissue-layered cell sheets were isolated from PDLSCs alone or co-cultured BMMSCs and PDLSCs.
Park, Chang-Min;Han, Na-Kyeong;Joung, Min-Seok;Paek, Kee-Yoeup;Choi, Jong-Wan
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.40
no.4
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pp.349-357
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2014
In this study, the shoot clumps extract of tissue-cultured Raoulia australis using the bioreactor culture system was tested for use a natural cosmetic ingredient. Tissue-cultured R. australis shoot clumps extract was tested anti-oxidant and anti-inflammatory activity for a cosmetic application. R. australis is a wild herbaceous plant of the asteraceae growing in New Zealand and Australia. Previous studies have reported anti-viral activity of the inhibitory effects for the growth of viruses induced meningitis, bronchitis and respiratory diseases but other biological effects are unknown. The shoot clumps extract of tissue-cultured R. australis showed higher anti-oxidant effect and anti-inflammatory effect than the natural R. australis extract. In DPPH, NBT and ABTS assay, the shoot clumps extract of tissue-cultured R. australis enhanced radical scavenging activity (up to 10~25% at $50{\mu}L/mL$) more than the natural R. australis extract. Also, the shoot clumps extract of tissue-cultured R. australis inhibited expression of iNOS and COX-2 protein in LPS-stimulated Raw 264.7 macrophages more than the natural R. australis extract. From this study, the shoot clumps extract of tissue-cultured R. australis displayed strong possibility as a new natural cosmetic ingredient for skin-care products.
Tissue reactions in gills of cultured red seabream, Pagrus major, toan epitheliocystis infection are described. Basophilic intracellular inclusions in gills contained prokaryotes, most probably a Chlamydia-like organisms according to morphological characteristic. A few types of tissue reaction were found around the inclusions: encapsulation, epithelial hyperplasia, lamellar fusion, and inflammation. It was considered that eosinophilic granule cells and macrophages might take part in defense reactions against this prokaryotic organism.
There was no significant difference in length and width of leaf and number of leaves per plant between tissue-cultured plants and conventionally propagated ones but chlorophyll content increased in tissue-cultured ones. Percent of sprouting from planted root segments significantly increased in tissue-cultured plants, resulting in yield increase of more than 200% per 10a. Root thickness of tissue-cultured plants at the time of planting influenced percent of sprouting and yield. Plants with root diameter ranging from 3 to 6mm gave good yield. When virus infection was monitored with N. tabacum and C. amaranticolor as indicator plants, 100% infection occurred in vegetatively propagated plants and introduced plants from China. whereas plants obtained from apical meristem showed 0% and 40% to 45% infection in vitro plantlets and 1 year old plants in vivo, respectively. Tobamovirus and unidentified virus particles were detected in electron microscopy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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