• 생명과학회지
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• 제21권6호
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• pp.783-787
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• 2011

3T3-L1 지방전구세포 분화 억제에 대한 Thaumatococcus daiellii 열매 유래 토마틴의 항비만 효과를 검토하였다. 3T3-L1 지방전구세포에 토마틴을 0-5 ${\mu}M$ 농도로 처리한 결과 세포생존율은 처리 농도 의존적으로 감소하였는데, 토마틴 8일 처리 후 1 및 3 ${\mu}M$ 농도에서 각각 97% 및 88.3%의 세포생존율을 보였다. 또한 토마틴 3 ${\mu}M$ 처리 농도에서 Oil-Red-O염색 지방구가 현저히 감소된 것으로 나타났다. 3T3-L1 세포 내 중성지방 농도는 양성 대조군에 비해 농도 의존적으로 감소하였다. 따라서 천연 식물성 토마틴은 3T3-L1 지방전구세포의 세포증식 억제 및 중성지방 농도 감소 효과를 보여 항비만 효과가 있는 것으로 밝혀졌다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제27권1호
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• pp.17-23
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• 2003

Agrobacterium-mediated transformation of American ginseng (Panax quinquefolius L.) with strain LBA 4404 containing a rice thaumatin-like protein gene is described. The selectable markers used were phosphinothricin acetyltransferase and hygromycin phosphotransferase genes. Epicotyl explants from seedlings were precultured for 5-7 days on Murashige and Skoog medium with ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid and 2,4 dichlorophenoxyacetic acid at 10 ${\mu}$M and 9 ${\mu}$M, respectively (ND medium), prior to Agrobacterium infection. The explants were immersed in a bacterial suspension for 20 min. A post-infection co-culture period of 3-4 days was provided on ND medium. Selection for transformed calli was conducted on ND medium with 20 mg/L phosphinothricin followed by 100 mg/L hygromycin over an 8-month period. it transformation frequency of 24.8% was achieved at the callusing phase. The presence of the transgenes in calli was confirmed by Southern hybridization and polymerase chain reaction analysis. The expression of the thaumatin-like protein gene in ginseng calli was demonstrated by Western blot analysis. Somatic embryos were produced from both transgenic calli and suspension cultures, and plantlets were recovered that expressed the transgenic thaumatin-like protein gene.

• 식품기술
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• 제3권3호
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• pp.5-14
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• 1990

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제45권3호
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• pp.257-265
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• 2018

감미료(sweetener)는 단맛을 느끼게 하는 첨가물 중 하나로 인공감미료와 설탕이 대표적이며, 단맛의 특성을 지닌 감미 단백질도 잘 알려져 있다. 본 연구는 천연 감미 단백질, brazzein, thaumatin 및 miraculin의 안정적인 생산을 위해 Agrobacterium방법으로 상추 세포를 형질 전환시켰다. 감미 단백질을 코딩하는 합성 유전자들은 상시적으로 발현하는 프로모터의 제어 하에 상추에 형질전환 하였다. 형질전환한 잎을 이용하여 RT-PCR 및 Western blot 분석을 실시한 결과 감미 단백질이 안정적으로 발현하는 것을 확인하였다. 형질전환 상추에서 발현한 단백질은 단맛을 유발하는 단백질 활성을 가지고 있었다. 이러한 결과는 유전자 재조합 감미 단백질들은 형질전환한 상추에 잘 발현된 것을 보여 주며, 이들 생산 시스템은 식물로부터 감미단백질 생산을 위한 좋은 대안이 될 수 있을 것으로 생각된다.

• 식물조직배양학회지
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• 제28권5호
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• pp.255-261
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• 2001

VVTL1은 포도 과육에서 특이적으로 다량 발현되는, PR5 계열의 thaumatin과 높은 상동성을 나타내는 단백질로서, 품종에 따라 염기서열의 차이를 나타낸다고 알려져 있다. 현재까지 포도의 VVTL1에 대해서 몇몇 연구가 진행되었지만, 우리나라에서 가장 많이 재배되는 품종인 캠벨에서는 전혀 이루어지지 않았다. 본 연구에서는 캠벨 품종으로부터 VVTL1-homolog 유전자의 게놈 DNA를 분리하여, 염기서열을 분석하였다. VVTL1-homolog 유전자는 일반적으로 PR5 유전자의 구조와 동일한 구조인, intron이 없는 하나의 exon으로만 구성되어 있었다. 염기서열로부터 추론된 VVTL1-homolog 단백질의 아미노산 서열은 VVTL1을 비롯한 다른 품종의 포도에서 분리된 TLP와는 달리 염기성의 등전점을 가지고 있었다. Primer extension 분석을 통해 전사개시 부위를 결정하였고, promoter영역을 포함하는 5'upstream 지역에 전사에 중요한 TATA box (4개)와 CAAT box (1개)가 존재하였으나, 이들의 위치와 수는 다른 PR5 유전자의 promoter와는 다랐다. 이러한 연구결과는 VVTL1-homolog 유전자의 발현이 과육 성숙과정동안 abscisic acid와 스트레스 또는 자극에 의해 발현이 유도되고 있음을 제시해준다. 포도 과육특이발현 promoter인 VVTL1-homolog 유전자의 promoter 분리는, 유전자의 도입에 의해 유용형질을 과육에 나타내는 포도품종을 개발하고자 할 때 효율적으로 사용될 수 있을 것으로 사료된다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권2호
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• pp.317-322
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• 2009

The proteins from 15 types of cultivar of hot peppers cultivated in Korea were extracted and its allergenicity was investigated by immunoblotting and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The immunoblotting of hot pepper proteins extracts (HPEs) against serum of hot pepper sensitized patients revealed dominant IgE binding to 14, 37, and 40 kDa molecules. The specific levels of IgE to HPEs sample No. 1, 3, and 7 were much higher than the other samples in patients. Also, IgE binding capacity of HPEs were not reduced by thermal processing and digestion in ELISA using human IgE antibody acquired from hot pepper sensitized patients. By means of Western blotting using anti-thaumatin IgY, thaumatin-like protein (TLP) acting as allergen in several plants and fruits was detected in tested hot peppers. This study demonstrates that the antigenic protein in hot peppers are present but are differently contained according to cultivars.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제43권4호
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• pp.397-404
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• 2016

Sweet and taste modifying proteins are natural alternatives to synthetic sweeteners and flavor enhancers, and have been used for centuries in different countries. Use of these proteins is limited due to less stability and availability. However, recent advances in biotechnology have enhanced their availability. These include production of sweet and taste modifying proteins in transgenic organisms, and protein engineering to improve their stability. Their increased availability in the food, beverage or medicinal industries as sweeteners and flavor enhancers will reduce the dependence on artificial alternatives. Production of transgenic plants using sweet and taste modifying genes, is an interesting alternative to the extraction of these products from natural source. In this review paper, we briefly describe various sweet and taste modifying proteins (such as thaumatin, monellin, brazzein, curculin and miraculin), their properties, and their application for plant development using biotechnological approaches.

• 한국식물병리학회:학술대회논문집
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• 한국식물병리학회 2002년도 총회 및 추계학술발표회
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• pp.78.2-79
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• 2002

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권5호
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• pp.379-386
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• 1998

본 연구에서는 천연 항균물질의 개발 이용을 위해 황기 종자로부터 인체에 무해한 천연 항균 단백질을 ion exchange chromatography 및 gel filteration을 이용하여, 순수 분리하고 특성을 조사하였다. 황기종자로부터 추출한 천연 항균 단백질은 Aspergillus ocraceus, Penicillium expensum, P. digitatum, Botrytis cineria의 포자 발아 및 효모인 Candida albicans의 생육을 현저하게 저해하였으며 ammonium sulfate 포화도가 0.4일 때 단백질의 침전량이 122.6 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 가장 많았고 항균력도 15.2 mm로 가장 높게 나타났다. 강력한 cation exchange chromatography인 Mono-S를 이용하여 FPLC에서 단백질을 분획하였을때 첫번째 peak에서 분획된 단백질군이 항균력을 보였으며 Superose 12HR gel filteration column을 이용하여 2차 분획 하였을 때 분자량이 19 kDa되는 단일 단백질만을 순수분리 할 수 있었다. 전기 영동한 polyacrylamide gel위에 곰팡이 포자를 중층하는 bio autography로 19 kDa 단백질 band의 항균력을 직접 확인하였으며 분리된 항균 단백질의 아미노 말단의 아미 노산 22잔기를 sequencing하고 thaumatin 및 zeamatin 유사 단백질들과 상동성을 측정한 결과 50%내외의 homology를 나타내었다. 분리된 항균 단백질은 곰팡이 균사가 성장하는 선단부위에 가장 먼저 침투하여 channel을 형성함으로 osmolysis를 일으켜 곰팡이의 생육을 억제하는 것으로 추측할 수 있었다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제25권6호
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• pp.725-746
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• 2002

The demand for new alternative "low calorie" sweeteners for dietetic and diabetic purposes has increased worldwide. Although the currently developed and commercially used highly sweet sucrose substitutes are mostly synthetic compounds, the search for such compounds from natural sources is continuing. As of mid-2002, over 100 plant-derived sweet compounds of 20 major structural types had been reported, and were isolated from more than 25 different families of green plants. Several of these highly sweet natural products are marketed as sweeteners or flavoring agents in some countries as pure compounds, compound mixtures, or refined extracts. These highly sweet natural substances are reviewed herein.