본 연구는 민들레에 각각 30, 50% 당을 첨가하고 15-20에서 120일간 발효를 하여 30% 당을 첨가하여 발효시킨 민들레 발효물(FD30), 50% 당을 첨가하여 발효시킨 민들레 발효물(FD50)로 진행되었다. 총 페놀성 화합물 함량은 FD30, FD50이 각각 $78.9{\pm}2.17$, $59.35{\pm}2.56$ mg/g으로 DWE(dandelion water extract)의 $54.2{\pm}1.49$ mg/g 보다 높은 결과를 나타냈다. $IC_{50}$으로 나타낸 DPPH 라디칼 소거활성은 FD30이 $118.7{\pm}2.03{\mu}g/mL$, FD50이 $123.40{\pm}2.15{\mu}g/mL$의 결과를 나타냈고 FD30이 높은 항산화 효과를 보인다는 것을 확인했다. 항염활성을 보기 위해 실시한 NO 소거능은 FD30, FD50 모두 2 mg/mL 농도로 처리했을 때 $8.8{\pm}1.72$, $11.8{\pm}2.87{\mu}M$, 같은 농도의 민들레추출물은 $4.9{\pm}1.20{\mu}M$를 나타냈다. 효소활성능은 FD50이 탄수화물 분해, 단백질 분해, 지질 분해에서 높은 활성을 보였다. 혈전용해 활성은 FD30, FD50이 각각 $0.56{\pm}0.28$, $1.39{\pm}0.20$ unit/mg protein 활성을 보였으며 DWE는 0.28 unit/mg protein 의 활성을 나타냈다. 이 연구를 통해 당을 첨가하여 발효시킨 민들레 발효물의 항산화 및 항염 활성을 확인하였고, 여러 가지 유용한 효소활성을 입증하였다.
본 연구는 민들레잎을 노루궁뎅이버섯 균사체로 발효한 후물과 에탄올로 추출하여 추출용매별 및 발효 전과 발효 후의 항산화 및 항염증 활성을 비교 평가하였다. 추출물의 항산화 활성을 탐색하고자 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, DPPH 라디칼 소거능, ABTS를 이용한 라디칼 소거 활성, FRAP을 이용한 총 항산화능을 측정하였다. 또한 RAW 264.7 대식세포를 이용하여 NO 생성량, 염증관련 단백질 및 사이토카인의 변화를 측정하였다. 민들레잎을 발효한 후 항산화 활성은 감소하였으나 오히려 항염증 활성은 증가하는 경향을 나타내었다. 특히 발효 민들레잎의 에탄올 추출물은 NO 생성 및 iNOS 단백질 발현을 효과적으로 억제하였으며 염증성 사이토카인인 IL-6를 억제하는 효과가 우수하였다. 이상의 결과로 항염증 소재로서 노루궁뎅이버섯 균사체를 이용한 발효 민들레잎의 에탄올 추출물의 활용 가능성을 확인하였다.
박력 밀가루에 대한 흰 민들레 분말의 대체량을 0~8%로 달리하여 제조한 쿠키의 물리 화학적 품질 특성, 산화방지 활성 및 소비자 기호도에 대한 실험과 조사를 진행하였다. 쿠키 반죽의 pH와 수분 함량은 흰 민들레 분말 첨가량이 증가함에 따라 유의적으로 감소하는 경향을 보였으나, 밀도는 증가하는 경향을 보였다(P<0.05). 쿠키의 퍼짐성과 손실률은 흰 민들레 분말의 첨가량이 증가함에 따라 유의적으로 증가하는 경향을 보였다(P<0.05). 명도(L*), 적색도(a*) 및 황색도(b*)는 유의적으로 감소하는 경향을 보였으며(P<0.05), 경도는 유의적으로 증가하는 경향을 보였다(P<0.05). 산화방지 활성을 나타내는 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl에 대한 전자공여능 및 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)에 대한 라디칼 소거능은 흰 민들레 분말의 첨가량이 증가할수록 유의적으로 증가하였으며(P<0.05), 두 지표는 서로 높은 상관관계를 보였다. 소비자 기호도 평가 결과, 맛을 제외한 모든 항목에서 2%와 4% 첨가군 사이에 유의적인 차이는 발견되지 않았지만 다른 시료에 비해 유의적으로 높은 평가를 받았다(P<0.05). 한편 맛은 2% 첨가군만 유의적으로 가장 높게 평가되어 흰 민들레 분말의 기능적 이점과 관능적 품질을 종합적으로 고려해 볼 때, 흰 민들레 분말의 최적 첨가량은 2%가 적절한 것으로 판단된다.
민들레의 부위별 항산화활성을 검토하기 위하여 지상부 및 지하부의 물, 50, 70, 100% 에탄올 용액과 열수추출조건을 이용하여 얻은 추출물의 DPPH 및 ABTS 라디칼 소거능을 분석하였다. 민들레 지상부 및 지하부 열수추출물의 DPPH 라디칼 소거능이 가장 우수한 것으로 분석되었으며, 추출물의 DPPH 라디칼 소거력은 열수추출물 > 70% 에탄올 추출물 > 50% 에탄올 추출물 > 100% 에탄올 추출물 > 물 추출물 순으로 나타났다. 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성을 검토한 결과 지상부 및 지하부의 추출물중 열수추출물이 가장 높은 ABTS 라디칼 소거능을 나타낸 반면 물추출물은 가장 낮은 소거능을 나타내어 DPPH 라디칼 소거능을 분석한 결과와 유사한 경향을 나타내었다. 또한 항산화활성이 가장 우수한 것으로 나타난 열수추출물을 이용하여 극성별 유기용매(클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올)을 이용한 분획물을 얻어 이들의 항산화활성을 검토하였다. ABTS 및 DPPH 라디칼 소거활성, 총 페놀성화합물의 함량을 분석한 결과 에틸아세테이트 분획물의 항산화 활성이 가장 우수한 것으로 나타났으며, 에틸아세테이트 분획물을 제외한 클로로포름, 부탄올, 물 분획물의 경우 지상부 분획물이 지하부보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다. 각 분획물들이 RAW 264.7 대식세포주에서 LPS 처리에 의한 nitric oxide 생성에 미치는 영향을 검토하였다. 지상부 및 지하부의 에틸아세테이트 분획물이 LPS 처리에 의해 증가한 nitric oxide의 생성을 효과적으로 억제하였으며, 지상부 에틸아세테이트 분획물 $20{\mu}g/mL$ 처리시 LPS 처리에 의해 증가된 NO 생성을 약 50% 저해하는 것으로 나타났으며, 이러한 효과는 지하부 에틸아세테이트 분획물보다 우수한 것으로 분석되었다. 본 연구는 민들레 부위별 다양한 추출조건에서 획득한 추출물들의 총 항산화활성을 비교분석하여 제시함으로써 소재개발을 위한 추출조건을 설정하는데 활용될 수 있을 것으로 판단되며, 또한 각 분획물들의 총 항산화활성 및 RAW 264.7 대식세포주를 이용하여 LPS 처리에 의해 증가된 nitric oxide의 생성억제능을 비교분석하여 제시함으로써 기능성 소재개발에 있어서 기초자료로 활용 할 수 있을 것으로 판단된다.
민들레 뿌리분말의 첨가비율(0, 5, 10, 15%)을 달리하여 제조한 민들레 약주의 이화학적 및 관능적 특성을 조사하였다. 민들레 뿌리분말 첨가량의 증가에 따른 pH 변화는 미미하였고, 산도와 당도는 15% 첨가구가 각각 가장 높은 함량을 나타났다. 환원당 함량은 민들레 뿌리분말 15% 첨가구가 발효 3일째에 다른 시료구에 비하여 가장 높았으며, 그 이후에는 급격하게 감소하여 다른 시험구와 비슷한 함량을 나타내었고, 알코올 함량은 발효가 진행됨에 따라 시험구 모두 증가하였다. 민들레 뿌리분말 첨가 비율을 달리하여 제조한 약주의 관능적 특성은 첨가 비율이 10, 15%로 증가할수록 종합적 기호도가 좋지 않았으며, 첨가 비율이 5%인 시험구가 색, 향, 맛, 목넘김, 종합적 기호도가 우수하였다. 이와같이 민들레 뿌리분말의 첨가 비율을 달리하여 제조한 약주의 이화학적 및 관능적 특성을 검토한 결과, 민들레 뿌리분말 5%를 첨가하여 제조한 약주가 가장 우수한 것으로 나타났다. 위의 실험 결과, 민들레 뿌리분말로 약주를 제조할 경우, 민들레 뿌리분말 5%를 첨가하는 것이 가장 적합함을 알 수 있었다.
한방에서 염증 치료 목적으로 사용하는 흰 민들레 뿌리의 열수 추출물을 제조하여 항염증 효과 및 산화 스트레스 개선효과를 확인하고자 하였다. ICR mice에 lipopolysaccharide(LPS)를 1회 복강 투여하여(10 mg/kg bw) 염증 및 산화스트레스를 유발하고, 한국에만 자생하는 흰 민들레 뿌리 열수 추출물을 1.4 g/kg bw 농도로 2회 경구 투여하였다. LPS에 의한 염증 유발은 체중 감소 현상으로 확인하였고, 민들레 뿌리 열수 추출물 투여군은 유의적으로 체중이 증가하여 염증 억제 효과가 관찰되었다. LPS 처리는 혈액의 중성지방질, 혈액 및 간의 reactive oxygen species(ROS), peroxynitrite 농도 그리고 간의 지질과산화 수준을 증가시켰다(P<0.05). LPS를 처리한 대조군에 비해 흰 민들레 뿌리 열수 추출물 투여군은 혈중 및 간의 중성지방질, ROS, peroxynitrite 농도 그리고 간의 지질과산화물 수준이 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 이는 흰 민들레 뿌리 열수 추출물이 간의 $NF-{\kappa}B$ 전사인자 및 이의 조절을 받는 COX-2의 단백질 발현을 억제함으로써 염증 관련 매개체 및 유리기 생성을 유의적으로 억제하였기 때문으로 생각된다. LPS 처리군에서 간의 중성지방질 농도가 감소한 것은 염증에 의해 간 조직이 손상되어 중성지방질의 합성이 억제되었기 때문으로 생각된다. 본 연구는 한방에서 사용하여 온 한국 토종 흰 민들레 뿌리가 $NF-{\kappa}B$ 전사인자의 발현을 억제함으로써 염증 및 산화 스트레스를 개선하는 효과가 있음을 확인하였다.
흰쥐에게 1% 콜레스테롤과 0.25% 콜산나트륨을 첨가한 고콜레스테롤혈증 유발 식이와 민들레잎 추출물을 분획별(열수추출물군, 에틸아세테이트추출물군, 에테르추출물군)로 나누어 급여하여 민들레 잎이 체내 항산화계에 미치는 영향을 구명하였다. 간조직 중의 cytochrome P-450 함량은 민들레 잎 분획별 추출물 급여에 의한 유의적인 변화가 관찰되지 않았으며, XO활성은 대조군에 비하여 굴들레잎 열수추출물 급여시 유의적으로 감소되었다. 간조직 중의 SOD활성은 대조군과 비교시 추출물 급여에 의하여 유의적으로 감소되었으나 분획 간의 차이는 나타나지 않은 반면 catalase활성은 민들레잎 추출물 급여에 의해 유의적으로 증가되었으며 에틸아세테리트추출물군은 에테르추출물군에 비하여 감소 정도가 유의적이었다. 간조직 중의 GSH-Px와 GST활성은 민들레 잎 추출물 급여시 대조군에 비하여 유의적인 증가를 나타내었으며 열수추출물군에서 특히 현저한 증가가 관찰되었다. GSH 함량은 추출물 급여에 따른 유의적인 차이는 관찰되지 않았으나 증가하는 경향을 나타내었다. 과산화지질 함량은 대조군에 비하여 민들레 잎 추출물 급여시 유의적으로 감소되었는데, 특히 열쑤추출물군의 감소효과가 현저한 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 고콜레스테를 혈증 유발 흰쥐에게 민들레잎 추출물 급여는 체내 항산화효소의 활성과 항산화제의 함량에 영향을 미쳐 체내 항산화능의 개선에 효과가 있을 것으로 사료된다.
결명자(Cassia obtusifolia) 및 포공영(Taraxacum platycarpum), 유근피(Ulmus macrocarpa)로 제조된 생약재 추출혼합물이 in vitro와 in vivo상에서 아토피 피부염에 미치는 영향을 실험하였다. HMC-1 cell을 이용하여 비만세포의 $\beta$-hexosaminidase 방출량을 측정한 결과, 단일 추출물보다 추출복합물이 탈과립을 억제하는 효과가 우수한 것으로 측정되었다. 그리고 HMC-1 cell에서 PMA와 A23187로 자극하였을 때 생성되는 염증성 cytokine의 분비에서도 추출혼합물의 저해 효과가 가장 높게 나타났다. 아토피 질환모델인 NC/Nga 마우스를 사용하여 생약재 추출혼합물의 아토피 저감효과를 측정한 결과, 진드기 추출물에 의해 발진된 마우스의 귀두께 및 조직학적인 부종 관찰을 통해 생약재 추출혼합물 농도가 증가함에 따라 대조군에 비해 귀 두께 및 부종의 감소가 관찰되었다. 또한 마우스의 혈중 IgE 농도와 이와 관련된 cytokine의 농도를 측정한 결과, 생약재 추출혼합물 투여농도가 증가함에 따라 IgE의 농도가 유의적으로 감소하였고, IgE의 과발현을 유도하는 IL-4의 분비 억제 및 IFN-$\gamma$의 분비가 증가되는 것으로 나타나 생약재 혼합추출물의 섭취가 아토피 피부염 증세 완화 효과에 도움이 되리라 사료된다.
We previously reported that the extract of Taraxacum platycarpum (AF-343) had several biological properties such as skin hydration and anti-inflammatory effects, thereby AF-343 be a promising anti-atopic dermatitis agent. However, few studies have been conducted to evaluate its effect on modulation of extracellular matrix proteins in human skin fibroblasts. The purpose of this study was to investigate the expressions of type I collagen, MMP-1, Smad2/3, and TIMP-1 proteins in AF-343-treated human skin fibroblasts. Human skin fibroblasts were treated by various concentrations of AF-343 (0~2 mg/ml). The expressions of type I collagen, matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), Smad2/3, and TIMP-1 proteins were analyzed by Western blot analysis. In addition, level of type I collagen mRNA was analyzed by CAT assay. Expression of type I collagen protein was increased in AF-343-treated human skin fibroblasts by dose and time-dependent manners. Consistent with this result, the expressions of phospho-Smad2/3 in skin fibroblasts were increased and MMP-1 expression was decreased by AF-343 treatment. TIMP-1 expression was not significantly changed in AF-343 treated skin fibroblasts. Extract of Taraxacum platycarpum (AF-343)-induced up-regulation of type I collagen expression was through increased expression of phospho-Smad2/3. These results were occurred combined with down-regulation of MMP-1 in skin fibroblasts. Taken together, this study indicated that AF-343 has property of the modulation of ECM in tissue as well as skin hydration and anti-inflammation.
Obesity has become a worldwide health problem. Orlistat, an inhibitor of pancreatic lipase, is currently approved as an anti-obesity drug. However, gastrointestinal side effects caused by Orlistat may limit its use. In this study the inhibitory activities of dandelion (Taraxacum officinale) against pancreatic lipase in vitro and in vivo were measured to determine its possible use as a natural anti-obesity agent. The inhibitory activities of the 95% ethanol extract of T. officinale and Orlistat were measured using 4-methylumbelliferyl oleate (4-MU oleate) as a substrate at concentrations of 250, 125, 100, 25, 12.5 and $4\;{\mu}g/ml$. To determine pancreatic lipase inhibitory activity in vivo, mice (n=16) were orally administered with com oil emulsion (5 ml/kg) alone or with the 95% ethanol extract of T. officinale (400 mg/kg) following an overnight fast. Plasma triglyceride levels were measured at 0, 90, 180, and 240 min after treatment and incremental areas under the response curves (AUC) were calculated. The 95% ethanol extract of T. officinale and Orlistat, inhibited, porcine pancreatic lipase activity by 86.3% and 95.7% at a concentration of $250\;{\mu}g/ml$, respectively. T. officinale extract showed dose-dependent inhibition with the $IC_{50}$ of $78.2\;{\mu}g/ml$. A single oral dose of the extract significantly inhibited increases in plasma triglyceride levels at 90 and 180 min and reduced AVC of plasma triglyceride response curve (p<0.05). The results indicate that T. officinale exhibits inhibitory activities against pancreatic lipase in vitro and in vivo. Further studies to elucidate anti-obesity effects of chronic consumption of T. officinale and to identify the active components responsible for inhibitory activity against pancreatic lipase are necessary.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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