Tobacco mosaic virus (TMV), TMV-common strain, causes severe damage on flue-cured tobacco in Korea. As the results, breeding programs were conducted to transfer the TMV resistance from NC567 to other cultivars. Advantage of F1, hybrid may not lie only in their heterotic value but also in directly combining of valuable dominant traits, e.g. for disease resistance, either in pairs or as groups already assembled in the two parents. A new TMV resistant flue-cured tobacco variety KF114 was developed from a cross as maternal parent MSNC567 and NC82 at the Suwon Experiment Station. KF114 was more vigorous growth characteristics in early stage than that of NC82, standard variety in Korea, and other characters were similar to those of NC82. It os high resistance to TMV, but bacterial wilt(Pseudomonas solanacerum) and black shank (Phytophthora parasitica var. nicotianae) is comparable to NC82. It should adapt well to the flue-cured production area and can reduce premature flowering under unfavorable weather conditions. Yield of KF114 is 1% to 5% higher, and nearly equal in value per KG compared with NC82. This variety, F1 hybrid, met acceptable standards for chemical and physical characteristics of cured leaf and high ranked good smoking taste by panel members in Korea Ginseng and Tobacco Research Institute.
Tobacco mosaic virus (TMV) was detected from Kimchi by biological and serological assay 5. Kimchi samples three month after cooked were collected, and were inoculated on N. tabacum var. Burley 21 and NC 95. Out of 33 samples, 6 showed typical symptoms induced by TMV, local necrotic lesions on Burley 21 and mosaic on NC 95. All saps from tobacco leaves showed the mosaic symptom reacted positively against TMV antiserum by agar gel double diffusion test. Based on the results, the Kimchi is considered as one of the important inoculum sources in Korea.
Three mild mutant strains of tobacco mosaic virus (TMV) were isolated from Nicotiana tabacum var. Samsun incubated at $38^{\circ}C$ for 10 days after inoculation with a wild type of TMV-OM strain. They were designated into Tg 5272, Tw 227 and Tw 333. All mild strains could be distinguished from TMV-OM by their reactions on different indicator plants. The mild strains induced the mild mottling without distinct symptoms, whereas the wild strain produced severe mosaic, rugose and stunting on tobacco and red pepper plants. Tw 227 and Tw 333 produced smaller necrotic spots than those of Tg 5272 and TMV-OM on N. glutinosa and Datura stramonium. The former two strains also produced ring spots and mosaic on Gomphrena globosa compared with necrotic spots by the latter strains. Three mild strains were serologically identical to TMV-OM. Their physical properties were thermal inactivation point $80-85^{\circ}C$, dilution end point between $10^{-4}\;and\;10^{-6}$, and longevity in vitro 7days or longer. Ultraviolet absorption spectra of purified preparations of the mild strains and TMV-OM were identical, with a minimum at 247nm, a maximum at 260nm, and a slight shoulder at 290nm. Electrophoresis of the strains in polyacrylamide-agarose gel showed that all the strains formed one major band and two minor bands, except for one minor band of Tw 333. However, when sodium dodecyl sulfate was added to the purified viruses before electrophoresis, each strain formed only one major band.
Genomic RNA sequence of a tobamovirus infecting Eutrema wasabi plant(TMV-W) was determined. The RNA is composed 6,298 nucleotide and contains four OREs encoding the protein of 180KD(OREI), 130KD(ORE2),30KD(ORF3) and 18KD(coat protein, ORF4). ORE4, ORF 3, ORF 2 and ORF 1 are overlaped by 130, 20 and 40 nucleotides, and the overapping region can be folded into a stable hairpin styucture. This includes the 3'non-coding region of 238 nucleotides, coat protein gene(537 nucleotides,179 amino acid), 30KD movement protein gene(825 nucleotides, 275 amino acid), 13(IKD protein gene(1,896 nucleotides, 632 amino acid) and 180KD protein gene(2,958 nucleotides, 986 amino acid). The genomic RNA sequence was compared with homologous regions of eleven other tobamoviruses. TMV-WTE was similar to TMV-WSF(98.6%) in nucleotide sequence.
국내에서 재배되고 있는 고추(Capsicum annuum L.)로부터 분리된 TMV pepper 계통을 density gradient centrifugation을 이용하여 순화하였다. 이로부터 바이러스의 total RNA를 분리하였고 RT-PCR에 의하여 TMV pepper 계통의 외피단백질 cDNA를 합성, 증폭하였으며 이를 pBluescript II SK- 벡터에 재조합하였다. 본 실험에서 바이러스 외피단백질과 3` non-coding region을 포함하는 재조합 클론 p1561과 p1562로부터 염기서열을 분석하였고 그 결과로 477 염기의 외피단백질 유전자를 포함하는 691 염기가 합성되었음을 확인하였으며 이것과 TMV common 계통으로부터 합성된 외피단백질 cDNA와의 최대 유사도는 69%였다. 또한 유추된 아미노산 서열에서 이들 두 계통간의 최대 유사도는 81%였다.
Three strains of W isolated from tobacco, tomato and Pepper plants in Korea were characterized based on biological response, serological relationship, and peptide mapping of the capsid Proteins. The strains designated as TMV-common, TMV-Pepper, and TMV-tomato could be distinguishable by different visual symptoms on 3 varieties of tobacco, one variety of tomato and Pepper for each among 27 plant specieces. Serological relationships were examined by agar gel double diffusion test. Only traceable or weak reaction was observed in the incompatible antigen-antibody combinations. The Pepper strain, however, showed trace in reaction with other two antisera. Peptide maps of the capsid proteins digested by V8 protease or by trypsin were also distinguishable, suggesting differences in composition and/or sequence of the amino acids among the strains.
Kim Young-Sook;Hwang Eui-Ii;Oh Jung-Hoon;Kim Kab-Sig;Yeo Woon-Hyung
Journal of the Korean Society of Tobacco Science
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v.26
no.2
s.52
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pp.79-84
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2004
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on tobacco mosaic virus (TMV) infection to tobacco plants, we found a bacterial isolate KTGBP10, which was identified as a Stenotrophomonas sp., strongly inhibited the infection of TMV. When the culture filtrate from KTGBP10 was applied on the upper surface of leaves of Xanthi-nc tobacco plants at the same time or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition of TMV infection was achieved. And $40\%$ inhibition was shown with application of the culture filtrate to the under surface of leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to the healthy ones during transplanting work was reduced by $87.1\~92.6\%$ when the culture filtrate or cell suspension was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. When the broth filtrate of KTGBP10 was supplied by soaking through the cut-leaves before and/or after virus inoculation, the TMV infection was also inhibited by $50.4\~65.3\%$.
Kim, Young-Sook;Hwang, Eui-ll;O, Jeong-Hun;Kim, Kab-Sig;Ryu, Myong-Hyun
The Plant Pathology Journal
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v.20
no.4
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pp.293-296
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2004
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on Tobacco mosaic virus (TMV) infection on tobacco plants, we found a bacterial isolate KTB3, and identified it as Acinetobacter sp. which strongly inhibited the infection of TMV When the culture filtrate from KTB3 was applied on the upper surface of the Xanthi-nc tobacco leaves at the same time, or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Likewise, 86% inhibition was achieved, when the culture filtrate was applied on the underside of the leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to healthy ones during transplanting work was reduced by 92%, when the culture filtrate was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. Antiviral substance from the culture filtrate was purified by ethanol precipitation, dialysis, DEAE-cellulose, and Sephadex G75 gel column chromatography. The partially purified active material which showed positive color reaction to sugar and protein inhibited TMV infection by 60% at 1 ${\mu}$g/ml.
Tobacco plants(Nicotiana tabacum cv. NC82) transformed with TMV CP cDNA were self-fertilized until 8th generation (R$_{8}$), and the transgenic plants from 6th to 8th generation were analized for their resistance to tobacco mosaic virus(TMV) and stability of the gene expression. The 6th generation of the plants(R$_{6}$) showed high resistance(81-91 %) to TMV at eight weeks after artificial inoculation with the virus. The transgenic cell line 601 was the most prominant in the expression of resistance. 98 % of the plants showed no symptom without any agronomic phynotepe variation when they were inoculated with the virus in a experimental field. However, 2% of the plants were revealed as delay type of symptom with mild mosaic on a few leaves. The viral resistance in greenhouse tests of the 7th generation (R$_{7}$) was 54-64%, and the number of delay type plants were increased than that of 6th generation plants. In the 8th generation, 81 % of the plants was complete resistant to the virus. The TMV CP cDNA of the transgenic plants of each generation was also confirmed by genomic PCR, and there was no systemic viral multiplication in the resistant plants. It suggests that the viral resistance and gene expression of the transgenic plants might be stable through the generations.ons.s.
The culture filtrate of Streptomyces sp. B25, which was identified in this experiment, was tested for the control of tobacco mosaic virus (TMV) with the susceptible tobacco cultivar, NC 82, under the field conditions following the preliminary examination of its characters for TMV control. Control efficacy of the culture filtrate against TMV infection continued over 50% up to 6 days after treatment, and its systemic effect was about 30% of the direct effect. In field conditions control efficacy of the culture filtrate against TMV infection was 95.3 % at 2 weeks after TMV inoculation, and decreased to 58.3 % at 3 weeks after inoculation. Five fold-dilution of the culture filtrate showed about half of the control efficacy by the stock culture filtrate. Analysis of the antibiotic material responsible for the inhibition of TMV infection through nuclear magnetic resonance experiments revealed that the antibiotic is antimycin $A_1$, which is firstly reported as an anti-phytoviral antibiotic in this experiment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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