• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제3권4호
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• pp.379-381
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• 1998

An angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor was isolated and partially purified from bovine blood plasma. Bovine blood plasma was obtained after removing blood cells by centrifugation, followed by the addition of anticoagulant to whole bovine blood. To precipitate plasma proteins, bovine blood plasma was treated with 4% trichloroacetic acid (TCA) as a final concentration .An ACE inhibitor was isolated from TCA supernatnat, using ultrafiltration, gel permeation chormatography, and reverse-phase high pressure liquid chromatogrpahy. The ACE inhibitor purified from TCA supernatant had IC50 values of 9.4$\mu$M.

• Applied Biological Chemistry
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• 제40권1호
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• pp.39-42
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• 1997

돼지혈액의 혈장으로부터 ACE 저해제들을 분리 정제하였다. 돼지 도축혈액을 먼저 혈액응고방지제를 첨가한후 원심분리에 의해 혈장과 혈구로 분리한 다음 혈장단백질을 최종농도 4% TCA로 침전시켰다. ACE 저해제들은 TCA 상등액과 혈장단백질 가수분해물로부터 한외여과, 겔여과크로마토그라피, 역상고속액체크로마토그라피 방법으로 분리되었는데 $IC_{50}4값들이 각각 $2\;{\mu}M,\;23\;{\mu}M$로 측정되었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제39권2호
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• pp.123-126
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• 1996

도축동물의 대부분 폐기되는 혈액으로부터 기능성 소재를 발굴하고 수질오염을 방지하기 위해서 소, 돼지 도축혈액으로부터 간단하고 신속한 방법으로 혈장 단백질을 분리하는 방법을 개발했고 그것을 혈분접착제로 응용하였다. 혈액을 원심분리한후 혈장단백질은 2% TCA 또는 0.6N HCl을 최종농도가 되게 첨가하여 침전시킴으로써 얻어졌다. 소, 돼지 혈장단백질을 비교 분석하기 위하여 SDA-PAGE를 하였고 얻어진 혈장단백질을 이용하여 혈분접착제로서 합판제조에 사용하여 다른 합성접착제와 접착성 시험을 한 결과 다른 합성 접착제와 비교해서 만족한 결과를 얻었다.

• KSBB Journal
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• 제18권5호
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• pp.371-376
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• 2003

프로바이오틱 생균인 B. polyfermenticus SCD의 유용성을 확인하기 위해 항산화 및 콜레스테롤 저하 효과를 검증하였다. DPPH법에 의한 항산화 활성은 48% 정도였으며, TCA법에 의한 활성은 45%로 측정되었다. 그리고 TBARS 법에 의해 측정된 활성은 stimulator가 존재할 때 60%에 달하였으며, SOD 유사활성은 15% 정도였다. 이러한 활성은 기존의 항산화제인 BHT나 $\alpha$-tocopherol의 1% 용액과 비교할 때, 비슷하거나 약간 낮은 수치를 보여 준다. 향후 항산화 물질이 정제되어 이 물질의 1% 용액과 1% 농도의 기존 항산화제의 활성을 비교하여야 한다. 그러나 이 같은 뚜렷한 B. polyfermenticus SCD의 항산화력을 바탕으로 천연 항산화제 개발이 가능하다고 판단된다. 한편 B. polyfermenticus SCD의 콜레스테롤 저하 효과는 0.3% oxgall이 존재할 때, 64% 정도였다. 이 수치는 oxgall이 존재하지 않을 때 수치(67%)와 비교할 때, 큰 변화가 없었다. 그리고 콜레스테롤 저하 기작은 세포내 흡착에 의한 것으로 판단되었다.

• KSBB Journal
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• 제18권2호
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• pp.94-99
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• 2003

Gluconacetobacter hansenii PJK의 경우 배지 조성 중 탄소원보다는 질소원 및 acetic acid가 BC 생산에 더 많은 영향을 미쳤다. 또한 BC 생산능은 pH 4.1-6.0 범위에서 배지의 초기 pH 영향을 거의 받지 않았으며 BC에 둘러싸인 균주보다 배양 상등액에 존재하는 균주의 BC 생산능이 더 우수하였다. G. hansenii PJK의 BC 생산은 fructose metabolism이 아닌 glucose metabolism으로 이루어지며 배지 성분 중 fructose와 lactate는 Cel$^{-}$ mutant의 발생 및 성장을 촉진시켰으며 TCA cycle에 위치하는 succinate의 첨가는 BC 생산에 거의 영향을 미치지 않았다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제10권1호
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• pp.85-91
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• 1981

S. aureus를 TCA로 처리(處理)하여 저분자물질(低分子物質)을 추출(抽出)한 후(後) STS법(法)에 준(準)하여 지질핵산(脂質核酸), 단백질(蛋白質) 및 잔사(殘渣)로 분획(分劃)하였다. 이와 아울러 초음파처리(超音波處理)로 균체(菌體)를 파쇄(破碎)한 후(後) 원심(遠心)침전을 SDS 및 Formamide를 사용(使用)하여 축차적(縮次的)으로 가용성(可溶性) 획분(劃分)을 추출(抽出)하고 얻어진 각(各) 획분(劃分)의 성질(性質)을 조사(調査)하였다. 그 결과(結果), 초음파(超音波)로 파쇄(破碎)한 균(菌)의 원심상징액(遠心上澄液)에서 균체(菌體) DNA의 91.3%가 검출(檢出)되었고 원심침전(遠心沈澱)으로부터는 SDS 처리(處理)에 의(依)하여 높은 비활성(比活性)(13.67unit/mg Protein)의 Malate dehydrogenase가 유지되었다. 한편, SDS 처리균(處理菌)의 원심침전물(遠心沈澱物)을 다시 열(熱) Formamide $150^{\circ}C$로 추출(抽出)하고 가용성획분(可溶性劃分) 및 잔사(殘渣)를 각각(各各) 산(酸) 가수분해(加水分解)한 후(後) Paper chromatsgraph하여 잔사(殘渣)로부터 Glucosamine을 확인(確認)하였다. 그러나 가용성획분(可溶性劃分)은 Ninhydrin반응(反應)에는 음성(陰性)이었고 환원당반응(還元糖反應)은 음성(陰性)이었다. 이상(以上)의 결과(結果)로 부터 초음파(超音波)로 파쇄(破碎)한 균체(菌體)의 원심상징액(遠心上澄液)은 주(主)로 원형질획분(原形質劃分)이며 SDS 및 Formamide에 의(依)하여 용출(溶出)되어 나온것은 각각(各各) 원형질막(原形質膜) 및 세포벽(細胞壁)의 Polysaccharide 획분(劃分)으로, Formamide 불용성분(不溶性分)은 Peptidsglycan 획분(劃分)으로 판정(判定)되었다.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1994년도 춘계학술대회 and 제3회 신약개발 연구발표회
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• pp.260-260
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• 1994

Mammalian pyruvate dehydrogenase complex(PDC) enzyme consists of multiple oopies of three major oligomeric enzymes-El, E2 E3. And protein X is one of the enzymatic constituents which is tightly bound to E2 subunit This complex enzyme is responsible for the oxidative decarboxylation of pyruvate producing of acetyl CoA which is a key intermediate for the entry of carbohydrates into the TCA cycle for its complete metabolic conversion to CO$_2$. And the overall activity of the complex enzyme is regulated via covalent nodification of El subunit by a El specific phosphatase ad kinase. Protein X has lipoyl moiety that undergoes reduction and acetylation during ezymatic reaction and has been known h be involved in the binding of E3 subunit to E2 core and in the regulatory activity of kinase. The purification of protein X has not been achieved majorly because of its tight binding to E2 subunit The E2-protein X subcomplex was obtained by the established methods and the detachment of protein X from E2 was accomplished in the 0.1M borate buffer containing 150mM NaCl. During the storage of the subcomplex in frozen state at -70$^{\circ}C$, the E2 subunit was precipitated and the dissociated protein X was obtained by cntrifegation into the supernatant The verification of protein X was accomplished by (1)the migration on SDS-PAGE, (2)acetylation by 〔2$\^$-l4/C〕 pyruvate, and (3)internal amino acid sequence analysis of tryptic digested enzyme.

• 한국균학회지
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• 제26권2호통권85호
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• pp.246-255
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• 1998

영지균사체로부터 기능적인 면역활성 물질을 얻고자, 여러 조건으로 추출된 ${\beta}-glucan$성 다당류(GAM)의 Raw 264.7 대식세포 활성 정도를 알아보았다. GAN으로 자극된 Raw 264.7 대식세포는 대조군보다 약 $2{\sim}5$배의 nitric oxide 생성을 촉진하였다. 대식세포의 활성화 정도는 GAM의 구조와 분자량 그리고 화학적 조성에 따라 NO생성에 차이를 보였다. 서당을 탄소원으로 배양된 균사체로부터 추출된 알칼리 가용성이며 수용성인 G-BUC로 활성화된 Raw 264.7세포는 $22{\mu}M$의 NO생성을 유도하였다. G-SUC(WS)는 87%의 탄수화물과 3.4%의 단백질로된 평균분자량 30 kD의 다당류이다. 탄수화물의 구성당은 48%의 포도당과 22%의 mannose등으로 구성된 glucomannan성 GAM이다. 세포분획성 GAM가운데 세포벽으로부터 추출된 알칼리 가용성(CW-AB-WS)인 ${\beta}-glucan$성 다당류가 가장 많은 NO생성을 촉진시켜 영지의 대식세포 활성 다당류로 가장 잠재력이 있는 다당류인 것으로 나타났다. NO생성에 GAN과 대식세포 활성물질(LPS 및 $IFN-{\gamma}$)의 혼합 효과는 독자적인 자극보다는 혼합하여 자극했을 때 NO의 생성이 증폭되었다. GAM으로 활성화된 대식세포의 유사분열은 대조군에 비해 현저히 억제되었으며, 활성화된 대식세포의 배양액은 in vitro에서 L1210 암세포 주에 세포독성을 나타내었다. 이와 같은 결과로 보아 영지의 ${\beta}-glucan$성 다당류(GAN)는 ${\beta}-anomeric$ glucan receptor를 갖고 있는 대식세포를 자극하여 NO를 생성하며, 이때 NO생성의 촉진하는 다당류의 조건은 어느정도의 수용성을 갖고 있는 소량의 단백질이 포함된 고분자성 ${\beta}$glucan다당류이다.