• 제목/요약/키워드: T7-tag

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Cloning, Expression, and Characterization of Para-Aminobenzoic Acid (PABA) Synthase from Agaricus bisporus 02, a Thermotolerant Mushroom Strain

  • Deng, Li-Xin;Shen, Yue-Mao;Song, Si-Yang
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제25권1호
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    • pp.66-73
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    • 2015
  • The pabS gene of Agaricus bisporus 02 encoding a putative PABA synthase was cloned, and then the recombinant protein was expressed in Escherichia coli BL21 under the control of the T7 promoter. The enzyme with an N-terminal GST tag or His tag, designated GST-AbADCS or His-AbADCS, was purified with glutathione Sepharose 4B or Ni Sepharose 6 Fast Flow. The enzyme was an aminodeoxychorismate synthase, and it was necessary to add with an aminodeoxychorismate lyase for synthesizing PABA. AbADCS has maximum activity at a temperature of approximately 25℃ and pH 8.0. Magnesium or manganese ions were necessary for the enzymatic activity. The Michaelis-Menten constant for chorismate was 0.12 mM, and 2.55 mM for glutamine. H2O2 did distinct damage on the activity of the enzyme, which could be slightly recovered by Hsp20. Sulfydryl reagents could remarkably promote its activity, suggesting that cysteine residues are essential for catalytic function.

A Performance Enhanced UHF RFID System with Modified I/Q Diversity Receiver

  • 전기용;윤창석;조성호
    • 한국통신학회논문지
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    • 제33권7A호
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    • pp.751-756
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    • 2008
  • In this paper, we propose a modified I/Q diversity scheme receiver of UHF RFID reader system. The modified I/Q diversity receiver is more robust than the conventional homodyne receiver in the wireless noisy, fading channel and phase noise environments by making use of additional axes. In particular, it is shown that the closer the phase difference ${\theta}(t)$ between the reader and the tag to ${\pi}/4$, the larger performance improvement we can get. The performance of the proposed receiver is verified by equations and is demonstrated by the computer simulation for various difference ${\theta}(t)$ cases.

반려동물 개인화서비스를 위한 융합 플랫폼 설계 (Design of Convergence Platform for companion animal Personalized Services)

  • 김삼택
    • 한국융합학회논문지
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    • 제7권6호
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    • pp.29-34
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    • 2016
  • 최근 스마트 강아지인식표 등의 사물인터넷(Internet of Things, IoT) 기술을 활용하여 반려동물의 건강관리를 실시간으로 수행하는 기기가 개발되고 수요 또한 증가하고 있으나 반려동물용 IoT 기기들은 복잡한 처리가 어렵고, 단순히 센서 정보을 이용 건강상태를 파악하기 때문에 고급기능을 구현하는데 한계가 있다. 본 논문은 통계적 분석을 활용하여 맞춤형 사료제작, 의약품제작, 반려동물 건강관리 등의 반려동물에게 맞춤형 개인화서비스가 가능한 통합 플랫폼을 설계한다. 반려동물이 착용하고 있는 IoT기기로부터의 센서 정보와 쇼핑몰에서의 고객의 구매 패턴 정보, 소셜미디어(SNS) 정보를 수집하는 미들웨어를 설계 한다. 또한 이를 통해 수집한 데이터를 데이터 베이스화하고 개인화서비스에 활용될 수 있도록 수집된 정보를 정제하고 분석 및 추론 가능한 분석기를 설계 한다.

시설내 온실가루이와 온실가루이좀벌의 발생 및 주내분석 (Occurrence and Within -Plant Distribution of Trialeurodes vaporariorum (Westwood)and Encarsia formosa (Gahan) in Greenhouse)

  • 박종대;김도익;박웅
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제37권2호
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    • pp.117-121
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    • 1998
  • 온실가루이의 발생량은 성충과 약충 모두 토마토보다 오이에서 많았다. 끈끈이 트랩에 온실가루이는 오이에 접종후 3일째부터 유인되기 시작하여 3회의 발생최성기를 보였으며 온실가루이좀벌은 접종 15일째부터 성충이 유인되었다. 온실가루이 성충은 오이잎의 최상위 부분에 주로 서식하고 있었으며 약충은 초기에는 상위부분에서, 40일째 이후에는 하위부분에서 주로 발생하였다. 온실가루이좀벌 성충은 중상위 부분에서 많이 발생하였으나 부위별 차이는 거의 없었으며, 온실가루이좀벌에 의한 온실가루이 mummy는 오이의 중하위부분에서 발생이 많았다. 온실가루이의 방제를 위하여 온실가루이좀벌을 방사하는 시기는 황색끈끈이 트랩에 온실가루이 성충이 1주일 동안 5마리 정도 잡히기 시작할 때 온실가루 이좀벌mummy를 오이 5주당 50마리(1tag)씩 방사한 경우 방사후 40일정도에 방제효과가 인정되었다.

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Nb-T2 합금의 파쇄분말을 사용한 Nb-Si-B계 합금의 제조 (Fabrication of Nb-Si-B Alloys Using the Pulverized Nb-T2 Alloy Powder)

  • 조민호;김성준;강현지;오승탁;김영도;이성;석명진
    • 한국분말재료학회지
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    • 제26권4호
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    • pp.299-304
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    • 2019
  • Nb-Si-B alloys with Nb-rich compositions are fabricated by spark plasma sintering for high-temperature structural applications. Three compositions are selected: 75 at% Nb (Nb0.7), 82 at% Nb (Nb1.5), and 88 at% Nb (Nb3), the atomic ratio of Si to B being 2. The microstructures of the prepared alloys are composed of Nb and $T_2$ phases. The $T_2$ phase is an intermetallic compound with a stoichiometry of $Nb_5Si_{3-x}B_x$ ($0{\leq}x{\leq}2$). In some previous studies, Nb-Si-B alloys have been prepared by spark plasma sintering (SPS) using Nb and $T_2$ powders (SPS 1). In the present work, the same alloys are prepared by the SPS process (SPS 2) using Nb powders and hypereutectic alloy powders with composition 67at%Nb-22at%Si-11at%B (Nb67). The Nb67 alloy powders comprise $T_2$ and eutectic ($T_2+Nb$) phases. The microstructures and hardness of the samples prepared in the present work have been compared with those previously reported; the samples prepared in this study exhibit finer and more uniform microstructures and higher hardness.

실시간 해운물류를 위한 능동형 IP-RFID 시스템 (Active IP-RFID System for Maritime Logistics)

  • 김태훈;이병하;박병권;최성필;문영식;정준우;김재중;최형림
    • 한국통신학회논문지
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    • 제40권12호
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    • pp.2511-2519
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    • 2015
  • 해운물류에서 컨테이너의 위치와 봉인 여부, 온도 정보 등 상태 정보를 전송하는 기술은 다수 개발되어 왔으나 전 물류환경에서 사용이 불가능 하거나 단순히 컨테이너의 정보만을 수신하여 전달하기 때문에 태그의 상태를 제어하는 등의 양방향 통신이 지원되지 않았다. 특히, 양방향 통신을 글로벌 해운물류 전 구간에서 지원하기 위해서는 태그를 식별할 수 있는 주소값이 관리되어야 한다. 이를 위해 433MHz 기반의 RFID를 개선하기 위한 연구는 "DASH 7"이라는 프로젝트 명으로 진행되었으나 근래에는 표준화나 개발참조문서 등의 진행이 더딘 상태로 더 이상 진행되지 않고 있는 실정이다. 이 논문에서는 RFID 태그에 가상 주소값을 부여하여 IP의 특징인 양방향 통신을 이용해 글로벌 해운물류에서 실시간 통신을 위한 능동형 IP-RFID 시스템 구성을 소개하고 이를 위한 처리과정 및 기능을 제안한다. 이 논문에서 제안하는 IP-RFID 시스템을 적용하면 해운물류 구간에서 실시간 상태 추적과 함께 태그의 제어에도 적용이 가능하다.

Dose-Dependent Inhibition of Melanoma Differentiation-Associated Gene 5-Mediated Activation of Type I Interferon Responses by Methyltransferase of Hepatitis E Virus

  • Myoung, Jinjong;Min, Kang Sang
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제29권7호
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    • pp.1137-1143
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    • 2019
  • Hepatitis E virus (HEV) accounts for 20 million infections in humans worldwide. In most cases, the infections are self-limiting while HEV genotype 1 infection cases may lead to lethal infections in pregnant women (~ 20% fatality). The lack of small animal models has hampered detailed analysis of virus-host interactions and HEV-induced pathology. Here, by employing a recently developed culture-adapted HEV, we demonstrated that methyltransferase, a non-structural protein, strongly inhibits melanoma differentiation-associated gene 5 (MDA5)-mediated activation of type I interferon responses. Compared to uninfected controls, HEV-infected cells display significantly lower levels of $IFN-{\beta}$ promoter activation when assessed by luciferase assay and RT-PCR. HEV genome-wide screening showed that HEV-encoded methyltransferase (MeT) strongly inhibits MDA5-mediated transcriptional activation of $IFN-{\beta}$ and $NF-{\kappa}B$ in a dose-responsive manner whether or not it is expressed in the presence/absence of a tag fused to it. Taken together, current studies clearly demonstrated that HEV MeT is a novel antagonist of MDA5-mediated induction of $IFN-{\beta}$ signaling.

Conception and Performance Analysis of Efficient CDMA-Based Full-Duplex Anti-collision Scheme

  • Cao, Xiaohua;Li, Tiffany
    • ETRI Journal
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    • 제37권5호
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    • pp.929-939
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    • 2015
  • Ultra-high-frequency radio-frequency identification (UHF RFID) is widely applied in different industries. The Frame Slotted ALOHA in EPC C1G2 suffers severe collisions that limit the efficiency of tag recognition. An efficient full-duplex anti-collision scheme is proposed to reduce the rate of collision by coordinating the transmitting process of CDMA UWB uplink and UHF downlink. The relevant mathematical models are built to analyze the performance of the proposed scheme. Through simulation, some important findings are gained. The maximum number of identified tags in one slot is g/e (g is the number of PN codes and e is Euler's constant) when the number of tags is equal to mg (m is the number of slots). Unlike the Frame Slotted ALOHA, even if the frame size is small and the number of tags is large, there aren't too many collisions if the number of PN codes is large enough. Our approach with 7-bit Gold codes, 15-bit Gold codes, or 31-bit Gold codes operates 1.4 times, 1.7 times, or 3 times faster than the CDMA Slotted ALOHA, respectively, and 14.5 times, 16.2 times, or 18.5 times faster than the EPC C1 G2 system, respectively. More than 2,000 tags can be processed within 300 ms in our approach.

대장균이 생산한 재조합 인체 감마인터페론의 발현과 정제 (Expression and Purification of Recombinant Human Interferon-gamma Produced by Escherichia coli)

  • 박정렬;김성우;김재범;정우혁;한명완;조영배;정준기
    • KSBB Journal
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    • 제21권3호
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    • pp.204-211
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    • 2006
  • IFN-${\gamma}$의 대량생산을 위한 기초연구로서 IFN-${\gamma}$의 아미노 말단에 glucagon과 ferritin을 융합파트너로 각각 결합시켜 재조합 IFN-${\gamma}$의 발현을 유도하였다. 대장균 내에서 발현되는 IFN-${\gamma}$는 그 자체로 매우 강한 소수성 결합의 양상을 나타내어 inclusion body 형태로 발현된다고 알려져 있으나 OrigamiTM(DE3) 균주로부터 50% 이상의 수용성 형태로 발현시켰다. IFN-${\gamma}$로부터 융합파트너를 제거할 수 있는 system을 개발하기 위해 융합파트너와 IFN-${\gamma}$ 사이에 enterokinase cleavage site를 도입하였으며, enterokinase에 의해 IFN-${\gamma}$에는 영향을 미치지 않고 효과적으로 융합파트너를 제거할 수 있었다. 재조합 IFN-${\gamma}$의 분리 및 정제를 위해 발현벡터상의 융합파트너와 IFN-${\gamma}$사이에 6X His-tag을 도입하였고 융합파트너의 N-말단에도 6X His-tag을 추가적으로 도입함으로써 융합파트너와 더불어 enterokinase에 의해 분해되지 않은 융합단백질을 Ni-NTA agarose column으로 제거함으로서 IFN-${\gamma}$를 완전 정제할 수 있었다. IFN-${\gamma}$의 발현을 유도하는 발현유도체로서 15 mM lactose를 이용하여 5 L 발효조에서 IFN-${\gamma}$의 발현을 검토한 결과, 재조합 균체의 단위 건조질량(dry cell weight, g)으로 약 11 g DCW/L 수준의 재조합 융합단백질을 얻을 수 있었다.

Homologous Expression and Quantitative Analysis of T3SS-Dependent Secretion of TAP-Tagged XoAvrBs2 in Xanthomonas oryzae pv. oryzae Induced by Rice Leaf Extract

  • Kim, S.H.;Lee, S.E.;Hong, M.K.;Song, N.H.;Yoon, B.;Viet, P.T.;Ahn, Y.J.;Lee, B.M.;Jung, J.W.;Kim, K.P.;Han, Y.S.;Kim, J.G.;Kang, L.W.
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제21권7호
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    • pp.679-685
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    • 2011
  • Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) produces a putative effector, XoAvrBs2. We expressed XoAvrBs2 homologously in Xoo with a TAP-tag at the C-terminus to enable quantitative analysis of protein expression and secretion. Addition of rice leaf extracts from both Xoo-sensitive and Xoo-resistant rice cultivars to the Xoo cells induced expression of the XoAvrBs2 gene at the transcriptional and translational levels, and also stimulated a remarkable amount of XoAvrBs2 secretion into the medium. In a T3SS-defective Xoo mutant strain, secretion of the TAPtagged XoAvrBs2 was blocked. Thus, we elucidated the transcriptional and translational expressions of the XoAvrBs2 gene in Xoo was induced in vitro by the interaction with rice and the induced secretion of XoAvrBs2 was T3SSdependent. It is the first report to measure the homologous expression and secretion of XoAvrBs2 in vitro by rice leaf extract. Our system for the quantitative analysis of effector protein expression and secretion could be generally used for the study of host-pathogen interactions.