in this study, hybrid bioreactor was used to apply physical stimuli in cell culture. Effect of the applied physical stimuli on the growth and differentiation of MC3T3-El cell in a three-dimensional Chitosan scaffold were studied by using the hybrid bioreactor. The hybrid bioreactor for physical stimulus was specially designed to apply uniaxial cyclic compressive and shear strain. Physical stimulus was applied over a period of 14 days with 150 cycles per day at a frequency of 0.5Hz. Strain magnitude was 2.5% of the scaffold size. Control group and physically stimulated group of the MC3T3-El tell were incubated and harvested at the indicated times (Day 6, 8, 10, 12, 14). The total amount of protein, which obtained information of cell growth, was determined by Lowey method. Alkaline phosphatase activity was examined by ELISA. Physically stimulated group using the hybrid bioreactor was increased in alkaline phosphatase activity comparing with control group. The nodule formation and calcium deposit of the physical stimuli group which resulted in cell differentiation was faster than that of control group.
We have previously demonstrated that intracellular expression of an RNA aptamer termed RRE40, which was selected in vitro to bind HIV Rev 10-fold much tighter than wild-type RRE, efficiently protected human CD4+ T cell line, CEM, from HIV-1. In this study, to evaluate the efficacy of the RRE40 RNA in clinical settings, polyclonal CD4+ peripheral blood lymphocytes (PBLs) were transduced with retroviral vectors expressing RRE40 decoy RNA and then challenged with clinical isolates of HIV-1. In contrast to the control cells transduced with vectors expressing control tRNA, intracellular expression of RRE40 RNA more effectively inhibited HIV-1 replication in CD4+ PBLs. However, transient and diminished inhibition, rather than complete inhibition, of HIV-1 replication in PBLs expressing RRE40 decoys have been observed. These results suggest that RRE40 decoy RNA would be useful to inhibit HIV-1 replication in cells. However, development of more efficient gene transfer protocols and/or more effective decoy RNAs would be needed to apply RNA decoy to modulate HIV-1 patient.
Distribution of tellurite and tellurate-reducing enzymes in the cell of Nocardia sp, the purifcation and the chemical properties of enzymes were investigated. Tellurite- and tellurate-reducing enzymes were located in the cytoplasm, but T. T. C. reduction part was in the cell membrane. Purification of tellurite- and tellurate-reducing enzymes was possible with the application of ammonium sulfate precipitation method and DEAE-Cellulose or CM-Cellulose column chromatographic method from the crude soluble part of the cell. On investigating the properties of purified enzyme, one of NADP, NADPH and reductive methylene blue(leucomethylene blue) was thought to react as a hydrogen donor. Both NADH and NADPH, or either of them would be physiological hydrogen donor.) In the reaction of this enzyme, either tellurite or tellurate reacts as a hydrogen acceptor, but on the other hand either selenate or selenate also reacts as a hydrogen acceptor.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.24
no.1
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pp.87-99
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1998
We have studied the effects of red ginseng root extract on the derease of MMS-induced gemotoxicity in cultured NIH3T3 cells. The increase in survival and the recovery from DNA synthesis inhibition in MMS-treated cells as a function of normal medium incubation time was potentiated, at a rate higher than those in UV-irradiated cells, by the presence of the ginseng extract. The extract also increased the MMS-induced excision repair as determined by unscheduled DNA synthesis. The amount of MMS-induced DNA single strand breads that are accumulated by polymerase inhibitors was increased, but as a rate lower rate than in UV-induced strand break, by the presence of the extract. These results suggest that the red ginseng extract increase MMS-induced repair and could be used as a reagent for protectiong alkylating agent-induced genotoxicity and cytotoxicity.
We investigated 23 lactic acid bacteria isolated from Korean breast milk-fed infant in order to select strains which show superior anti-allergic effect. The candidates were cultivated and then we obtained dried powders of tyndallized cells and supernatant concentrate separately. Screening was carried out with down-regulation of interleukin (IL) 4 and up-regulation of IFN-${\gamma}$ in mouse splenocytes. As a result of the screening, we selected Lactobacillus rhamnosus IDCC 3201 (RH3201) for oral feeding to ovalbumin-sensitized BALB/c mice. Oral administration of RH3201 as dead cell bodies and supernatant concentrate suppressed hyper-production of serum immunoglobulin (Ig) E levels compared to vehicle group. Such anti-allergic effects were achieved by improvement of the balance between cytokines produced from type-1 helper T (Th1) and type-2 helper T (Th2) lymphocytes. Therefore, RH3201 has potential to improve atopic symptoms by immunomodulatory effect.
The mitogen-activated protein(MAP) kinase signal transduction pathway represents an important mechanism by which mitogen, such as serum and PMA, regulate cell proliferation and differentiation. Target substrates of the MAP kinase are located within several compartments containing plasma membranes and nucleus. We now report that serum addition induces proliferation of the P388 murine leukemia cell, but PMA does not, while both serum and PMA treatment cause translocation of the MAP kinase, mainly p42$^{mapk}$ isoform, from cytosol into the nucleus, which was monitored by immunoblot analysis using polyclonal anti-ERK1 antibodies. We investigated whether the MAP kinase was capable of phosphorylating c-Jun protein and GST-fusion proteins, the P562$^{kk}$N-terminal peptides (1-77 or 1-123 domain) of the T cell tyrosine kinase, using the partially purified MAP kinase by SP-sephadex C-50, phenyl superose and Mono Q column chromatography. We found that the partially purified MAP kinase was able to phosphorylate c-Jun protein and the GST-fusion protein expressed using E.coli DH5$\alpha$ which is transformed with pGEX-3Xb plasmid vector carrying of p562$^{kk}$N-terminal peptide-encoding DNA. These results imply that tyrosine kinase receptor/Ras/Raf/MAP kinase pathway is a major mechanism for mitogen-induced cell proliferation in P388 murine leukemia cell and that the various MAP kinase isoforms may have their own target substrates located in distinct subcellular compartments.
Calcium/calmodulin-dependent protein kinase II (CaMK-II) is responsible for the phosphorylation of proteins involved in various cellular functions. Since the level of intracellular calcium ($Ca_2+$) oscillate during the cell cycle, it is expected that the activity of CaMK-II is also dependent on the cell cycle. The kinase activity in NIH3T3 cells which were arrested at or released from certain phase of the cell cycle was measured and compared to that in the normally growing asynchronous control cells to investigate whether the activity of this kinase is cell cycle-dependent. Cells were arrested at G0, G1, G1/S, G2/M and M phase, respectively by use of various drugs which do not have any effect on the kinase activity of CaMK-II at G0, G1, G1/s and G2/M phase was similar to that of the control cells, whereas lower at M. Calcium-independent activity of CaMK_II by autophosphorylation was higher at M and, thus, higher autonomy at M, which represented the physiologically relevant activity of CaMK-II. A similar pattern of activity change of the kinase was demonstrated during the cell cycle of synchronized cells which were released from G1 arrest. These results indicate that the activity of CaMK-11 is cell cycle-dependent and is activity during the mitosis.
Objectives: This study aimed to investigate the effects of rhubarb extract on osteoclast differentiation in bone marrow-derived macrophages (BMMs). Osteoclasts are vital for bone resorption and remodeling. Osteoclast dysregulation can contribute to various bone-related disorders that directly affect oral health. Rhubarb, a medicinal plant with anti-inflammatory properties, has been shown to modulate bone metabolism. Methods: BMMs were isolated from the femurs and tibias of 5-week-old C57BL/6 mice and cultured in the presence of mouse macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) for 3 days. Subsequently, BMMs were treated with M-CSF and receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) to induce osteoclast differentiation. Results: Rhubarb extract effectively suppressed osteoclast differentiation in BMMs. Furthermore, rhubarb extract inhibited the mRNA expression of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) and cathepsin K (CTSK), which are essential for osteoclastogenesis. Moreover, it inhibited the RANKL-induced expression of nuclear factor of activated T cell c1 (NFATc1), a crucial transcription factor in osteoclast differentiation. Conclusions: These results suggest that rhubarb extract promotes oral health by inhibiting osteoclastogenesis in BMMs. Thus, rhubarb extract shows promise as a therapeutic agent for bone-related disorders that directly affect oral health, particularly those associated with abnormal osteoclast activity. Further research and exploration of the underlying mechanisms are warranted to fully understand their potential clinical applications.
Lee Sang-Yup;Shon Won-Jun;Lee WooCheol;Baek Seung-Ho;Bae Kwang-Shik;Lim SungSam
Restorative Dentistry and Endodontics
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v.29
no.5
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pp.479-484
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2004
Immunoinhibitory protein extracted from sonicated Treponema denticola have been shown to suppress cell cycle progression of human lymphocytes. To study in detail about the effect of this microorganism on the function of lymphocytes. we investigated the levels of Interleukin-2 (IL-2) and Interleukin-4 (IL-4) production by T lymphocytes before and after the addition of $12.5{\;}\mu\textrm{g}/ml$ T. denticola sonicated extracts. In this study. levels of IL-2 and IL-4 produced from T cells pretreated with sonicated extracts were evaluated by using the quantitative sandwich enzyme immunoassay technique. In response to phytohemagglutinin (PHA) stimulation. T cell produced increased levels of IL-2 and IL-4. However. the expressions of both cytokines were significantly inhibited when PHA activated-T cells were pre-exposed to sonicated T. denticola extracts (p < 0.05). These findings suggest that the T. denticola sonicated extracts induced-immunosuppression in Th1 and Th2 cell functions could be a part of the pathogenic mechanism of the endodontic failure associated with this microorganism.
Hyun, Sun Hee;Kim, Eun Sun;Lee, Sang Min;Kyung, Jong Soo;Lee, Sang Myung;Lee, Jong Won;Kim, Mee Ree;Hong, Jin Tae;Kim, Young Sook
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.11
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pp.1665-1673
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2014
The objective of this study was to compare the compositions and immuno-enhancing effects of 6-year-old red ginseng powder (RGP) with those of its fractions. RGP was subjected to extraction with 100% ethanol to obtain an ethanol fraction (E) and residue 1 (R1). Then, R1 was subjected to extraction with distilled water to obtain water fraction (W) and residue 2 (R2). Chemical compositions were as follows: 4.94% acidic polysaccharides and 1.56% ginsenosides (amounts of Rg1, Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rd, and Rg3) in RGP, 0.11% acidic polysaccharides and 6.99% ginsenosides in E, 4.93% acidic polysaccharides and 0.40% ginsenosides in R1, 0.50% acidic polysaccharides and 0.30% ginsenosides in R2, and 7.46% acidic polysaccharides and 0.61% ginsenosides in W. Immuno-enhancing effects of fractions from RGP were examined based on suppression of immune responses by cyclophosphamide. In the first fraction test, the antibody response to SRBCs increased significantly in the R1-treated group, but not the E-treated group. In the second fraction test, W showed higher immuno-enhancing effect than R1 and R2. W, which contained the highest amount of acidic polysaccharides, restored numbers of T and B cells, macrophages, as well as $CD4^+$ and $CD8^+$ T cells in the spleen suppressed by cyclophosphamide. These results suggest that acidic polysaccharides from red ginseng may be more effective than saponin in enhancing immune functions and reducing immunotoxicity of cyclophosphamide.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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