콜레스테롤 생합성 과정에 있어서 속도조절 단계 효소의 하나인 squalene synthase에 대한 저해물질의 탐색을 목적으로, 30종의 다양한 천연물을 대상으로 squalene synthase에 대해 저해효과를 검토한 결과 녹차추출물에서 비교적 저해활성이 높고 재현성이 있게 저해효과를 나타내는 것으로 확인되었다. 녹차에 함유되어 있는 squalene synaase에 대한 저해물질의 용매추출성을 검토한 결과 ethyl acetate와 n-butanol 층에 저해물질이 많이 함유되어 있는 것으로 확인되었으며 저해물질은 녹차의 polyphenol 화합물인 catechin에 의한 것으로 추정되었다. Catechin 표준용액의 각 농도에 따른 squalene synthase 저해작용을 살펴 본 결과, (-)-epigallocatechin gallate, (-)-epicatechin gallate, (-)-epigauocatechin, (-)-epicatechin, (+)-catechin의 순으로 저해활성이 강한 것으로 나타났으며 가장 강한 저해활성을 나타내는 (-)-epigallocatechin gallate의 $IC_{50}$값은 $90{\mu}M$이었다.
심해상어 간유에서 추출한 천연유지는 스쿠알렌(Squalene)과 알콕시글리세롤(Alkoxyglycerol)을 함유하고 있다. 본 연구에서는 심해상어 간유에서 피부 보호능력이 있는 스쿠알렌과 면역작용이 우수한 알콕시글리세롤을 추출하고 GC-MS 분석을 통하여 정제과정을 거친 스쿠알렌과 알콕시글리세롤의 함량 변화를 비교하고 스쿠알란과 함께 물성을 평가하였다. 스쿠알렌의 함량은 정제과정을 거친 뒤에 35% 더 증가하였으며 알콕시글리세롤의 함량은 21.9% 더 증가한 것을 볼 수 있었다. 상어간유를 알콕시글리세롤 정제과정을 통해 지방산은 61%에서 4%로 57%의 지방산이 제거된 것을 확인할 수 있었고, 지방산 중 Palmitic acid와 Oleic acid의 함량이 크게 감소된 것을 확인할 수 있었다. 상어간유에 과산화물가와 산가는 스쿠알렌 정제과정을 거친 후 크게 낮아진 것을 확인하였고 불포화 지방산이 이중결합이 많은 스쿠알렌이 스쿠알란(Squalane)보다 요도드가가 월등히 큰 것을 확인하였다.
동맥경화증과 같은 심혈관 질환을 야기시키는 주요 위험요인인 혈중 콜레스테롤의 수준을 낮추기 위하여 콜레스테롤 생합성 과정의 속도조절단계 효소의 하나인 squalene synthase의 활성을 저해하는 물질을 분리 정제하여, 물질의 이화학적 특성과 생물학적 특성을 검토하였다. Squalene synthase 저해물질은 acetone extraction, ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, sephadex LH-20 column chromatography, 결정화 등을 이용하여 분리 정제하여 YUF-01을 얻었다. 기기분석을 통하여 구조분석을 행한 결과 YUF-01은 분자량 368, 분자식 $C_{20}H_{21}O_6$으로 분석되었으며 243과 421 nm 에서 UV-VIS 흡광을 나타내었고 $^{13}C$ NMR spectrum과 $^1H$ NMR spectrum을 검토하였을 때 aromatic ketone 구조인 curcuminoid 계통의 curcumin과 일치하였다. Squalene synthase에 대한 curcumin의 $IC_{50}$ 값은 $100{\mu}M$이었으며, non-competitive inhibitor로 작용하였다.
Park, Jong-Koo;Cho, Hi-Jae;Lim, Yoon-Gho;Cho, Youl-Hee;Lee, Chul-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제12권2호
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pp.222-227
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2002
Squalene synthase catalyzes the reductive dimerization of two molecules of farnesyl diphosphate to form squalene at the final branch point of the cholesterol biosynthetic pathway. Due to the unique position of this enzyme in the pathway, its inhibitors may have advantages as antihypercholesterolemic agents. Therefore, selective inhibitors of squalene synthase do not prevent the formation of the essential branch products of the isoprene pathway, such as dolichol, coenzyme-Q, and prenylated proteins, as might be expected for inhibitors of enzymes earlier in the pathway; for example, lovastatin and mevalotin. The current study reports that CJ90002, a pentagalloylglucose isolated from Paeonia moutan SIM (Paeoniaceae), which is an important Chinese crude drug used in many traditional prescriptions, was a potent inhibitor of rat microsomal squalene synthase, and also a potent inhibitor of cholesterol biosynthesis in vitro. In addition, the intraperitoneal and oral administration of CJ90002 had a significant lowering effect on plasma cholesterol levels in hamsters.
Squalene synthase plays an important role in the cholesterol biosynthetic pathway. Inhibiting this enzyme in hypercholesterolemia can lower not only plasma cholesterol but also plasma triglyceride levels. A squalene synthase inhibitor was screened from Prunus mume fruit, and then purified via sequential processes of ethanol extraction, HP-20 column chromatography, ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, and crystallization. The squalene synthase inhibitor was identified as chlorogenic acid with a molecular mass of 354 Da and a molecular formula of $C_{16}H_{18}O_9$ based on UV spectrophotometry, $^1H$ and $^{13}C$ NMRs, and mass spectrometry. Chlorogenic acid inhibited the squalene synthase of pig liver with an $IC_{50}$ level of 100 nM. Since chlorogenic acid was an effective inhibitor against the squalene synthase of an animal source, it may be a potential therapeutic agent for hypercholesterolemia.
본 연구는 수은독성에 대한 스쿠알렌의 방어효과를 알아보기위해 ICR계 웅성마우스$(25\sim30g)$를 수은단독 투여군, 수은-스쿠알렌 투여군으로 구분하였다. 신장의 조직학적 변화 여부를 위해 $HgCl_2$ (4.0mg/kg)를 1회 구강투여하였다. 스쿠알렌(200mg/kg)은 12시간 간격으로 투여하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 신장은 체내축적이 가장 높은 장기로 관찰됨에 따라 신장을 전자현미경을 통하여 관찰한 결과 수은단독 투여군의 경우 핵은 응축현상, 사립체는 기질안의 능선 소실과 팽창, 조면소포체는 리보솜의 탈락과 수조내강의 팽대가 관찰되었다. 스쿠알렌 동시투여군의 경우 48시간 후부터 크고 둥근모양의 핵, 기다란 형태의 정상적인 사립체, 그리고 리보솜이 부착된 정상적인 조면소포체가 관찰되었다. 이상의 실험결과 스쿠알렌이 주요조직에서 수은의 침착을 억제시키며, 수은에 의한 신장의 조직학적 손상을 감소시키는데 효과적인 것으로 사료된다.
This report provides the complete nucleotide sequences of the full-length cDNA encoding squalene synthase (SQS) and its genomic DNA sequence from a triterpene-producing fungus, Ganoderma lucidum. The cDNA of the squalene synthase (SQS) (GenBank Accession Number: DQ494674) was found to contain an open reading frame (ORF) of 1,404 bp encoding a 468-amino-acid polypeptide, whereas the SQS genomic DNA sequence (GenBank Accession Number: DQ494675) consisted of 1,984 bp and contained four exons and three introns. Only one gene copy was present in the G. lucidum genome. The deduced amino acid sequence of Ganoderma lucidum squalene synthase (GI-SQS) exhibited a high homology with other fungal squalene synthase genes and contained six conserved domains. A phylogenetic analysis revealed that G. lucidum SQS belonged to the fungi SQS group, and was more closely related to the SQS of U. maydis than to those of other fungi. A gene expression analysis showed that the expression level was relatively low in mycelia incubated for 12 days, increased after 14 to 20 days of incubation, and reached a relatively high level in the mushroom primordia. Functional complementation of GI-SQS in a SQS-deficient strain of Saccharomyces cerevisiae confirmed that the cloned cDNA encoded a squalene synthase.
본 연구에서는 미생물을 이용하여 개발한 발효 스쿠알렌의 안정성 향상을 위하여 마이크로좀-SQ20 (Microsome-SQ20)을 제조하고, 이에 대한 물리적 거동 및 특성과 효능효과에 대하여 연구하였다. 마이크로좀-SQ20의 외관은 투명한 액체로 고유의 냄새를 가지고 있었다. 색상은 무색이고, 비중은 0.928, pH는 5.82 (20%용액)로 화장품에 사용하는데 적합한 나노에멀젼이 형성되었다. 스쿠알렌의 주성분 함량은 20.05%로 안정하게 봉입이 된 것을 확인할 수 있었다. 마이크로좀-SQ20을 0.1% 수용액화하여 측정한 입자크기는 134.8 nm로 bluish한 유화상을 얻었다. F-SQ(Fermented squalene)과 MF-SQ(Microsome squalene)의 DPPH라디칼에 의한 항산화 효과는 각각 80.72%, 81.5%로, L-ascorbic acid와 비교하여 동등한 효과를 보였다. F-SQ 및 MF-SQ은 10 ppm에서 각각 150.3%, 129.9%의 세포생존율을 나타냈다. SQ, F-SQ, MF-SQ의 elastase 저해능은 10 ppm에서 각각 8.7%, 10.33%, 8.7%의 저해능력을 가지고 있음을 알 수 있었다. MMP-1 저해능력은 SQ, F-SQ, MF-SQ 모두 10 ppm에서 각각 1.55%, 41.44%, 31.79%를 나타내 F-SQ의 collagenase 저해능이 우수한 것을 알 수 있었다.
Nam Yee Kim;Woo-Yong ParK;Jong Shin Park;Yuna Kim;Hee Sook Kim
분석과학
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제36권2호
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pp.80-88
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2023
Fingerprints play a crucial role in the identification of potential suspects in criminal cases. However, determining the actual time, i.e., the time at which the fingermark was deposited, is challenging. Herein, we investigated the persistence and aging of fingerprints over time by observing the time evolution of latent fingerprints on a polystyrene box stored in a dark room. Fingerprint samples that were stored for up to two years could be detected with maximum accuracy using a black iron-oxide-based emulsion (black emulsion). To estimate the time of fingerprint deposition, fingerprint aging was studied by analyzing the lipid components of the fingerprints after their development. Cholesterol and squalene were selected as indicators of fingerprint aging, and their ratio was estimated to assess aging. In the case of fingerprint samples stored in a dark room for up to one month after deposition, the cholesterol/squalene ratio was approximately 0.01; it increased gradually to ≥ 0.1 over six months. A substantial reduction in the levels of cholesterol and squalene from the initial levels was also noted. Cholesterol and squalene were not detected after one year of storage. Thus, the extent of aging could be determined by analyzing the aging indicators for up to six months. Two cases that could cause error in the estimation of the fingerprint deposition time, namely, heating of the fingerprint sample before development and storage of the developed fingerprints in a dark room, were also investigated.
한국방사성폐기물학회 2005년도 Proceedings of The 6th korea-china joint workshop on nuclear waste management
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pp.107-116
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2005
Precipitated silicas modified by aluminium were characterised using inverse liquid chromatography in anhydrous heptane with squalene as probes. Their monolayer capacities of adsorption, Langmuir's and Henry's constants were determined from the desorption isotherms according to frontal analysis. A narrow band consisting of isotherms was observed. The introduction of aluminium has little influence on the monolayer capacity, Langmuir's constants and the Henry constant. Experimental data show that neither the amounts of aluminium on the silica nor the methods of the introduction of aluminium into the silica influence the interactions between the squalene and the silicas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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