Objectives : This study was performed to evaluate the effects of Hwangryunhaedok-tang(Huanglianjiedu-tang HHT) water extract on locomotor dysfunction induced by spinal cord injury(SCI) in rats. Methods : SCI was induced by mechanical contusion following laminectomy of 10th thoracic vertebra in Sprague-Dawley rats. HHT was orally given once a day for 14 days after SCI. Neurological behavior was examined with the Basso-Beattie-Bresnahan locomotor rating scale. Tissue damage and nerve fiber degeneration were examined with cresyl violet and luxol fast blue staining. Using immunohistochemisty, cellular damage to neurons and nerve fibers were examined against Bax and MAP-2. As inflammatory response markers, iNOS and COX-2 expressions were also examined. Results : 1. HHT ameliorated the locomotor dysfunction of the SCI-induced rats. 2. HHT attenuated the reduction of motor neurons in the ventral horn of the SCI-induced rat spinal cord. 3. HHT significantly reduced the number of Bax positive cells in the peri-lesion of the SCI-induced rat spinal cord. 4. HHT attenuated the reduction of MAP-2 positive cells in the peri-lesion of the SCI-induced rat spinal cord. 5. HHT significantly reduced the number of iNOS and COX-2 positive cells in the peri-lesion of the SCI-induced rat spinal cord. Conclusions : These results suggest that HHT improves the locomotor dysfunction of SCI by protecting motor neurons from cell death through anti-inflammatory effect.
Effects of Rhizoma gastrodiae on glucose oxidase-induced neurotoxicity was investigated in cultured newborn mouse spinal dorsal root ganglion(DRG) neurons that were treated in the media with or without glucose oxidase. In addition, the protective effect of Rhizoma gastrodiae extract against glucose oxidase-induced neurotoxicity was examined. Cytotoxic values were expressed as a percentage of number of living cells by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. In this paper, exposure of neurons to glucose oxidase resulted in a significant call death in a dose- and time-dependent manners in DRG neuron cultures. The decrease in cell viability induced by the glucose oxidase was blocked by Rhizoma gastrodiae extract. These results indicate that the neuroprotective effect of Rhizoma gastrodiae extract against glucose oxidase-induced neurotoxicity may result from a prevention or attenuation of oxidative damage induced by glucose oxidase.
Recent studies indicate that mitochondria are an important source of reactive oxygen species (ROS) in the spinal dorsal horn. In our previous study, application of malate, a mitochondrial electron transport complex I substrate, induced a membrane depolarization, which was inhibited by pretreatment with ROS scavengers. In the present study, we used patch clamp recording in the substantia geletinosa (SG) neurons of spinal slices, to investigate the cellular mechanism of mitochondrial ROS on neuronal excitability. DNQX (an AMPA receptor antagonist) and AP5 (an NMDA receptor antagonist) decreased the malate-induced depolarization. In an external calcium free solution and addition of tetrodotoxin (TTX) for blockade of synaptic transmission, the malate-induced depolarization remained unchanged. In the presence of DNQX, AP5 and AP3 (a group I metabotropic glutamate receptor (mGluR) antagonist), glutamate depolarized the membrane potential, which was suppressed by PBN. However, oligomycin (a mitochondrial ATP synthase inhibitor) or PPADS (a P2 receptor inhibitor) did not affect the substrates-induced depolarization. These results suggest that mitochondrial substrate-induced ROS in SG neuron directly acts on the postsynaptic neuron, therefore increasing the ion influx via glutamate receptors.
When glutamate was infected intrathecally, the result is similar to those produced by TPA injected. The involvement of protein kinase C (PKC) in the nociceptive responses in rat dorsal horn neurons of lumbar spinal cord was studied. In test with formalin, a PKC inhibitor (chelerythrine) inhibited dose-dependently the formalin-induced behavior response. Neomycin also inhibited it significantly. But, a PKC activator (12-O-tetradecanoylphorbol-13-ester, TPA) showed reverse effect. When gluatamate was injected intrathecally, we observed the result is smilar to those produced by TPA injection. On the other hand, intrathecal injection of glutamate induced thermal and mechanical hyperalgesia. In Tail-flick test, we examined the involvement of PKC on the glutamate-indeced thermal hyperalgesia. Chelerythrine showed an inhibitory effect and TPA enhanced thermal response. Glutamate decreased the mechanical threshold significantly. A pretreatment of chelerythrine and neomycin inhibited glutamate-induced mechanical hyperalgesia, but the effect of neomycin was not significant. TPA had little effect on the mechanical nociceptive response. These results suggest that the PKC activation through metabotropic receptor at postsynaptic region of spinal cord dorsal horn neurons may influence on the persistent nociception produced by chemical stimulation with formalin, thermal and mechanical hyperalgesia induced by glutamate.
To elucidate the involvement of interleukin-$1{\beta}$ converting enzyme (ICE) in the course of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), we induced EAE by immunizing rats with an emulsion of rat spinal cord homogenate with complete Freund's adjuvant supplemented with Mycobacterium tuberculosis (H37Ra, 5mg/ml) and then examined the expression of ICE in the spinal cord of rats with EAE. In normal rat spinal cords, ICE is constitutively, but weakly, expressed in ependymal cells, neurons, and some neuroglial cells. In EAE, many inflammatory cells are positive for ICE, and the majority of ICE+ cells were identified as ED1+ macrophages. During this stage of EAE, the number of ICE+ cells in brain cells, including neurons and astrocytes, increased and these cells also had increased ICE immunoreactivity. These findings suggest that the upregulation of ICE in both brain cells and invading hematogenous cells is stimulated by a secretory product from inflammatory cells, and that this enzyme is involved in the pathogenesis of EAE via the production of IL-1 beta.
The aim of this study was to investigate effects on joint mobilization in neurochemical changes of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d) and nitric oxide synthase (NOS) of the spinal cord neurons after right knee joint immobilization (RKJI) and in ultrastructural changes of the femoral nerves innervating the muscles acting on RKJI. A total of 15 guinea pigs were used and divided into 5 groups. Immunohistochemistry was performed to detect NADPH-d and NOS. NADPH-d and NOS were not expressed in the ventral horn of control and experimental groups, but were expressed or not in the dorsal horn according to the duration of release after RKJI and the presence or absence of joint mobilization. Ultrastructures of the femoral nerves in experimental groups had partial demyelination and condensed clumps in axon. Effects on manipulative therapy after RKJI were confirmed from expression of NADPH-d and NOS in the dorsal horn of the lumbosacral spinal cord. Manipulative therapy was more effective against a long-term immobilization than a short-term immobilization.
The spinal segmental myoclonus by viral radiculitis has been rarely reported and the pathophysiology remains to be elucidated. However, the hyperactivity of contiguous anterior horn neurons induced by viral irritation has been suggested to be a possible patho-mechanism. In general, spinal segmental myoclonus is not well-controlled by medication and the patient suffers from continuous involuntary movement. We recently experienced a case of spinal segmental myoclonus induced by herpes zoster radiculitis, and which was successfully relieved by epidural injections.
Recent studies have implicated that more rostral components of the trigeminal spinal nucleus including subnucleus oralis (Vo) in orofacial nociceptive mechanisms. Since there is only limited electrophysiological evidence, the present study was initiated to characterize the receptive field and response properties of malls nociceptive neurons in chloralose/urethan-anesthetized rats. Single neuronal activity was recorded in right subnucleus oralis, and types of nociceptive neurons classified wide dynamic range (WDR), NS (nociceptive specific) and deep nociceptive (D) and the mechanoreceptive field (RF) and response properties were determined. A total of 34 nociceptive neurons could be subdivided into 17WDR neurons, 12NS neurons and 5D neurons. Vo nociceptive neurons had RF involving maxillary and/or mandibular divisions mainly located in the intraoral and/or perioral regions. Majority of Vo nociceptive neurons showed spontaneous activity less than 1Hz. The NS and D neurons activated only by heavy pressure and/or pinch stimuli had high mechanical thresholds compared to WDR neurons activated also by tactile stimuli. Vo nociceptive neurons showed a progressive increase of response to the graded mechanical stimuli. 39% of Vo nociceptive neurons received C-fiber electrical input as well as A-fiber electrical input from their RF, and 45% of them responded to electrical stimulation of the right maxillary first molar. 41% of Vo nociceptive neurons responded to noxious heat applied to their RF, and 18% of them showed an immediate burst of discharges following MO application to the right maxillary first molar pulp. These results indicate that Vo is involved in the transmission of nociceptive information mainly coming from intraoral or perioral region including tooth pulp.
Park Jong Joo;Yook Tae Han;Song Beem Yong;Lee Kwang Gyu;Yu Yun Jo;Lee Chang Hyun
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.16
no.2
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pp.272-278
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2002
To investigate the anti-inflammatory and analgesic effects of Herba Chelidoniie, the extracts of Herba Chelidoniie treated in arthritic rat model. Complete Freund,s Adjuvant(CFA) were injected in the subcutaneous tissue of left foot paw of rats to induce arthritis. Herba Chelidonii extracts(HC) was administered immediately into the peritoneal cavity after CFA injection for 12 days. The immunohistochemical stainings for calcitonin gene-related peptide(CGRP) and substance P in the L4, L5 and L6 spinal dorsal horn and ganglia were done, and the paw swelling was measured with a micrometer and the blood leukocytes were counted. The results were as follows : The paw swelling of HC treated group was significantly decreased in 12th day after CFA injection compare to control group. The change of differential leukocytes counts of HC treated group increased the ratio of lymphocytes, and decreased the ratio of neutrophils compare to control group. The extent of CGRP immunoreactive nerve fiber of dorsal horn of HC treated group was weakly stained compare to control group. The number of CGRP immunoreactive neurons of L6 spinal cord of HC treated group was significantly decreased compare to control group. The extent of substance P immunoreactive nerve fiber of dorsal horn of He treated group was weakly stained compare to control group. The number of substance P immunoreactive neurons of L4, L5 and L6 spinal cord of HC treated group was significantly decreased compare to control group. These experimental results suggest that Herba Chelidonii extracts reduce the number of CGRP and substance P immunoreactive neurons and nerve fibers of spinal dorsal horns and ganglia, and decrease paw swelling in arthritic rat model, which may be closely related to analgesic and antiinflammatory effects of Herba Chelidonii.
Objective : To investigate the relation to the organs, shu points and mu points. The labeled common locations of the spinal cord and brain were observed following injection of pseudorabies virus(PRV) into the the kidney, UB23 and GB25. Methods : After survival times of 96 hours following injection of PRV, The fifteen rats were perfused, and their spinal cord and brain were frozen sectioned($30{\mu}m$). These sections were stained by PRV immunohistochemical staining method, and observed with light microscope. Results : In spinal cord, PRV labeled neurons projecting to the kidney, BL23 and GB25 were founded in cervical, thoracic, lumbar and sacral spinal segments. Dense labeled areas of cervical segments were overlap in lateral cervical n. and lamina III-V area. Thoracic segments were overlap in lateral spinal n., intermediolateral n. and lamina V-X areas. Lumbar segments were overlap in lamina I-V areas. Sacral segments were overlap in lamina IV, V and X areas. In brain, PRV labeled areas projecting to the kidney, UB23 and GB25 were overlap in the A1 noradrenalin cells/C1 adrenalin cells/caudoventrolateral reticular n./rostroventrolaterai n., raphe obscurus n,, raphe pallidus n., raphe magnus n., gigantocellular reticular n., locus coeruleus, subcoeruleus n., A5 cell group and paraventricular hypothalamic n.. Conclusions : This results suggest that PRV labeled overlap areas of projecting to the kidney may be correlated to shu and mu points related to the kidney. These morphological results provide that organs-shu(transport) and mu(alarm) points interrelationship may be related to the central autonomic pathways.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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