This study was carried out to investigate the fertilizing ability of round spematids isolated from seminiferous tubules. A round spermatid was introduced into the perivitelline space of a mature oocyte using Leitz micromanipulators and then subjected to electrofusion. Electrofusion was induced by applying a single DC pulse of 90V with a duration of 60$\mu$sec using Model 611 Square Wave Stimulator(Phipps and Bird, U.S.A) in 0.3 M sucrose fusion medium containing 0.05mM CaCl2 and 0.1mM MgSO4, Oocyte pre-activation was conducted by exposure to a single DC(80V, 80$\mu$sec) pulse in electrofusion medium at 1 hour before electrofusion. The incidence of fusion with pre-activated oocytes(23.8%, 57/239) was higher than that with nonactivated oocytes(6.7%, 3/45). The most of electro-stimulated mouse oocytes cleaved regardless of the success or failure of fusion. Karyotyping of embryos that developed into blastocysts after exposure to the fusion pulse were performe. We found that blastocysts from the fused oocytes were diploid whereas blastocysts from the unfused oocytes were haploid. About 11.7 and 11.5% of fused and unfused oocytes were developmental potentials of fused and unfused oocytes. Therefore, these results suggest that the mouse mture oocyte can be fertilized by fusion with a round spermtid and subsequently developed normally.
Lung fluke, Paragonimus heterotremus, is a flatworm causing pulmonary paragonimiasis in cats, dogs, and humans in Southeast Asia. We examined the ultrastructure of the testis of adult P. heterotremus with special attention to spermatogenesis and spermiogenesis using scanning and transmission electron microscopy. The full sequence of spermatogenesis and spermiogenesis, from the capsular basal lamina to the luminal surface, was demonstrated. The sequence comprises spermatogonia, spermatocytes with obvious nuclear synaptonemal complexes, spermatids, and eventual spermatozoa. Moreover, full steps of spermatid differentiation were shown which consisted of 1) early stage, 2) differentiation stage representing the flagella, intercentriolar body, basal body, striated rootlets, and electron dense nucleus of thread-like lamellar configuration, and 3) growing spermatid flagella. Detailed ultrastructure of 2 different types of spermatozoa was also shown in this study.
Kim, Min;Ki, Byeong Seong;Hong, Kwonho;Park, Se-pill;Ko, Jung-Jae;Choi, Youngsok
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.29
no.7
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pp.944-951
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2016
Tdrd12 is one of tudor domain containing (Tdrd) family members. However, the expression pattern of Tdrd12 has not been well studied. To compare the expression levels of Tdrd12 in various tissues, real time-polymerase chain reaction was performed using total RNAs from liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Tdrd12 mRNA was highly expressed in testis. Antibody against mouse TDRD12 were generated using amino acid residues SQRPNEKPLRLTEKKDC of TDRD12 to investigate TDRD12 localization in testis. Immunostaining assay shows that TDRD12 is mainly localized at the spermatid in the seminiferous tubules of adult testes. During postnatal development, TDRD12 is differentially expressed. TDRD12 was detected in early spermatocytes at 2 weeks and TDRD12 was localized at acrosome of the round spermatids. TDRD12 expression was not co-localized with TDRD1 which is an important component of piRNA pathway in germ cells. Our results indicate that TDRD12 may play an important role in spermatids and function as a regulator of spermatogenesis in dependent of TDRD1.
The morphological study was carried out to classify the spermatogenic germ cells of the seminiferous tubule in Korean Native Pheasant during the breeding season. The results were as follows : 1. The spermatogonia can be classified into the three types of A, In(intermediate) and B. 2. The primary spermatocyte can be classified into the five types as preleptotene, leptotene, zygotene, pachytene and diakinesis. 3. The maturing processes of nucleus of spermatid can be divided into seven steps. The round shape of the spermatid was changed to the elongated form during the spermiogenesis. This observation may be useful to the study of the breeding cycles in the Korean Native Pheasant.
The spermatogenesis of Siamese fighting fish, Betta splendens, belongs to Osphronemidae was investigated by light and electron microscopic observations. In primary spermatocyte stage, the nucleus was comparatively large ellipsoidal, and mitochondria showed a marked development in cytoplasm. In secondary spermatocyte stage, the germ cells were smaller than that of primary spermatocytes. The nucleus was a spherical shape and intercellular space was formed between germ cells. In spermatid stage, the early spermatids were not much different from a secondary spermatocyte. But, the chromatin condensation was occurred from the outside to the inside. The nucleus was more condensed. Intracellular space was larger than early spermatid. The mitochondria were rearranged in a middle piece, and occupied about half of the head part in early sperm. In sperm stage, the head of mature sperm was a spherical shape and had no acrosome. The flagellum was showed the typical 9+2 array of microtubules. Also, the tail of sperm had no lateral fins and outer coarse fibers. These ultrastructural characteristics can be used in classification of species.
LEE Jeong Yong;KIM Wan Ki;LEE Chae Sung;CHANG Young Jin
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.37
no.4
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pp.281-286
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2004
Spermatogenesis and sperm ultrastructure of the marsh clam (Corbicula japonica) were investigated by electron microscopic observations. Testis of the marsh clam consists of numerous spermatogenic follicle containing germ cells in the different developmental stages. Spermatogonia are located nearest the outer wall of the follicle, while spermtocytes and spermatids are positioned nearer to the lumen. Spematogonia are oval-shaped and about $5{\mu}m$ In diameter. Spermatogonia develop into spermatocyte, spermatid and spermatozoon. In the spermatid to about $2{\mu}m$ in diameter, cytoplasm decreases and mitochondria move to the base of the nucleus and fuse into several spheres, the centrioles become orthogonally oriented, a flagellum appears, and an acrosomal vesicle forms. The mature sperm has primitive type, consisting of a head, a midpiece and a tail. The sperm was arrow-shaped, and its head is about $8{\mu}m$ long and comprised of a long nucleus and an acrosome. The four mitochondria encircled the centrosome in midpiece. The flagellum had the classical 9+2 axoneme structure, and axonemal lateral fins in the tail were observed.
To examine the process of spermiogenesis in the Korean red-backed vole, Clethrionomys rufocanus regulus, the seminiferous epithelium in the testis, was studied by trasmission electron microscopy, and the following results were obtained based on the morphological characteristics of cell differentiation. 1. According to the fine structural differentiation, spermiogenesis was divided into Golgi, cap, acrosome, maturation and spermiation phases. Besides, these phases were sub-divided into two steps : early and late phases respectively, Thus, the spermiogenesis of Clethrionomys rufocanus regulus was divided into a total of ten steps. 2. In the changes of the chromatin, the chromatin granules began to be condenced in the late Golgi phase, regularizated at maturation phases, and a perfect nucleus of sperm was formed at the spermiation phases. 3. The sperm head had the falciform, and the formative period of sperm tail began to be develop in the early Golgi phase and completed at the spermiation phases. 4. In the morphological features of spermiation phases, the spermatid of early spermiation phase was divided into three types : (1) A-type spermatid contained cytoplasmic droplets in the neck region and middle piece, and the mitochondria was irregular, and arranged around the axoneme. (2) B-type contained cytoplasmic droplet in the middle piece only, and the mitochondria are arranged the center of axoneme regularly, and (3) In the C-type spermatid, the arrangement of mitochondria was regular, and was contained cytoplasmic droplet in the neck region only. In the late spermiation phase, only the sperm head was surrounded by cytoplasm of Sertoli cell or the matured sperm just before the spermiation from the cytoplasm of Sertoli cell.
Cha Shin-Woo;Bae Joo-Hyun;Son Woo-Chan;Shin Jin-Young;Shin Dong-Ho;Kim Sung-Ho;Park Seung-Chun;Kim Jong-Choon
Journal of Life Science
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v.15
no.3
s.70
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pp.387-396
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2005
The aims of the study were to establish a short-term screening test for detecting testicular toxicity of chemicals in rats and to determine whether a 2-week administration period is sufficient to detect testicular toxicity of 2-bromopropane (2-BP) as an example. Male Sprague-Dawley rats were subcutaneously administered with 1000 mg/kg/day of 2-BP or its vehicle for 2 weeks. Ten male rats each were sacrificed on days 3, 7 and 14 after the initiation of treatment. Parameters of testicular toxicity included genital organ weights, testicular sperm head counts, epididymal sperm counts, motility and morphology, and qualitative and quantitative histopathologic examinations. The early histopathological changes observed on day 3 of treatment included degeneration of spermatogonia and spermatocytes, multinuclear giant cells, mature spermatid retention, vacuolization of Sertoli cells, and decreased number of spermatogonia in stages II and V. On day 7 of treatment, atrophy of seminiferous tubules, exfoliation of germ cells, degeneration of spermatogonia and spermatocytes, multinuclear giant cells, mature spermatid retention, vacuolization of Sertoli cells, decreased number of spermatogonia in stages II and V, and decreased number of spermatocytes in stages VII and XII. On day 14 after treatment, a significant decrease in the weights of testes and seminal vesicles was found. Atrophy of seminiferous tubules, exfoliation of germ cells, degeneration of spermatogonia and spermatocytes, mature spermatid retention, vacuolization of Sertoli cells, decreased number of spermatogonia in stages II and V, and decreased number of spermatocytes in all spermatogenic stages were also observed. In addition, a slight non-significant decrease in testicular sperm head counts, daily sperm production rate and epididymal sperm counts was found. The results showed that 2 weeks of treatment is sufficient to detect the adverse effects of 2-BP on male reproductive organs. It is considered that the short-term testicular toxicity study established in this study can be a useful tool for screening the testicular toxic potential of new drug candidates in rats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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