본 연구는 제주도 축산진흥원과 농촌진흥청 난지농업연구소에서 사육되고 있는 제주마 5두를 사용하여 인공질을 이용, 정액을 채취하여 정액의 일반성상 및 CASA를 이용하여 정자의 운동성과 생사 염색으로 기형률을 조사하였다. 제주마 정액의 일반 특성으로 총 정액량은 평균 42.5ml이었으며 평균 pH는 7.3, 평균 정자농도는 평균 $198.5X10^6/m1$ 이었다. 정자의 운동성은 $64.3{\pm}23.2%$이며, motility parameters 별로 VAP $70.4{\pm}28.7{\mu}m/s,\;VSL\;69.6{\pm}28.9{\mu}m/s,\;VCL\;94.1{\pm}30.0{\mu}m/s,\;ALH\;2.3{\pm}0.7{\mu}m/s,\;BCF\;7.6{\pm}1.1Hz,\;STR\;99.1{\pm}1.2%,\;LIN\;77.1{\pm}12.7%$로 나타났다. 정자 부위별 기형률은 두부가 평균 4 %, 경부가 평균 20 %, 미부가 평균 4 %로 나타났다. 이 연구를 통해 천연기념물로 지정되어 있는 제주마의 유전자원 보존과 증식을 위한 인공수정기술의 실용화를 위한 기초 자료를 제공하고자 한다.
Tegumental and excretory-secretory proteins are reported as diagnostic antigens for human opisthorchiasis. Rhophilin associated tail protein1-like (OvROPN1L) protein of Opisthorchis viverrini sperm tail showed potential as a diagnostic antigen. The OvROPN1L recombinant fragments were assayed for diagnostic antigenicity for human opisthorchiasis using indirect ELISA. The strongest antigenic region was a N-terminus peptide of M1 - P56. One synthetic peptide (P1, L3-Q13) of this region showed the highest antigenicity to opisthorchiasis. Sera from other parasitic infections including Strongyloides stercoralis, hookworm, Taenia spp, minute intestinal flukes, Paragonimus spp showed lower reactivity to P1. Peptide P1 is located in the disordered N-terminus of ROPN1L supporting its suitability as linear epitope. In the Platyhelminthes the N-terminal sequence of ROPN1L is diverging with taxonomic distance further suggesting that peptide P1 has potential as diagnostic tool in the genus Opisthorchis/Clonorchis. It should be further evaluated in combination with peptides derived from other O. viverrini antigens to increase its diagnostic power.
본 연구는 수컷 살조개 Protothaca (Notochione) yessoensis의 정자 형성 과정 중 생식세포들의 분화와 성숙정자의 미세구조 특징에 관한 몇 가지 특징을 투과전자현미경 관찰에 의해 조사하였다. 본 종의 정자형태는 원시형(primitive type)으로, 이매패강, 이치아강(Heterodonta)에 속하는 다른 종들과 유사하다. 생식세포에 인접하여 연결되어 있는 보조세포들은 생식세포들의 발달을 위해 영양공급에 관여한다. 본 종의 정자의 핵형은 긴 원통형이며 첨체의 형태는 모자모양이다. 정자는 길이가 대략 $46{\sim}50{\mu}m$이며, 길다란 정핵(길이 약 $2.44{\mu}m$)과, 첨체(길이 $0.45{\mu}m$), 그리고 미부 편모(약 $42{\sim}46{\mu}m$)로 이루어져 있다. 미부 편모의 악소님(axoneme)은 9+2 구조를 나타낸다. 첨체소포의 특징으로써 basal ring의 기저부위에서 측면부위는 전자밀도가 불투명한 부위를 나타내나, 첨체소포의 앞쪽 정단부위는 전자밀도가 비교적 투명한 부위로 나타나는 특징을 보인다. 이것이 이치아강에 속하는 백합과와 또 다른 여러 과들에 속하는 종들의 정자들이 갖는 첨체소포의 공통특징이다. 따라서 이치아강이 갖는 이들 첨체소포가 갖는 공통특징은 분류의 key 또는 중요한 도구로써 계통 분류를 위해 사용될 수 있다. 정자 중편에 있는 미토콘드리아 수는 4개로 이치아강 내에서 백합과의 3종을 제외한 모든 종들과 다른 과들의 종들에서 공통으로 나타나고 있는데, 예외로, 개조개, 백합, 가무락조개 만은 중편의 미토콘드리아가 5개로 이루어져 있다. 미토콘드리아 수는 과나 또는 상과 수준에서 종들의 분류학적 분석을 할 경우, 분류 key 또는 중요한 도구로 사용될 수 있다.
한국산 대륙밭쥐 (Clethrionomys rufocanus regulus) 정자변태 과정을 알아보기 위하여 정소내 세정 관상피의 세포분화에 따른 형태적 특징들을 기초로 하여 전자현미경으로 관찰한 결과는 다음과 같다. 1. 대륙밭쥐의 정자변태 과정은 골지(Golgi), 두모(cap), 첨체(acrosome), 성숙(maturation) 및 이탈기(spermiation phase)로 구분하였고, 다시 각각 전후단계로 세분하여 전과정을 10단계로 나누었다. 2. 염색질 변화는 골지 후기에서 서서히 응축하여 성숙기에서 균질화되고, 이탈기에서 완전한 핵을 형성하였다. 3. 정자두부는 낫꼴모양을 가지며, 정자꼬리는 골지 전기에서 형성되기 시작하여 이탈기에서 완성되었다. 4. 이탈 전 후기의 정자세포의 형태적 특징으로서는, 이탈전기의 정자 세포는 3가지 유형으로 구분 되어졌다. (1).미토콘드리아의 불규칙 배열과 더불어 경부와 중편부에 세포질 소적을 함유한 정자세포(A-type). (2). 미토콘드리아가 축사를 중심으로 완전히 배열되고, 중편부에 세포질 소적을 함유한 정자세포(B-type). (3) 축사를 중심으로 미토콘드리아의 배열 후 경부에만 세포질 소적을 함유한 정자세포(C-type). 그리고 이탈후기의 경우, 정자세포들이 정자두부만 Sertoli cell의 세포질에 싸여져 있거나 또는 Sertoli cell의 세포질로부터 이탈되기 직전의 정자로 구분되었다.
To investigate the process of spermiogenesis of the Korean eastern Daubenton's bat, Myotis daubentonii ussuriensis, the testis obtained from mature male bats was studied by transmission electron microscope and were based on the variety and diagnostic characters of cell organells. The results obtained from the present study are as follows. According to the differentiation of the cell organells, the spermiogenesis of the Korean eastern Daubenton's bat, M. d. ussuriensis, was divided into Golg, cap, acrosome, maturation and spermiation phases. Besides, these Golgi, cap, acrosome, and maturation phase were subdivided into the steps of early and late phases repectively and matruation phase was subdivided into step of early, mid and late phases. Therfore, the spermiogenesisof M. d. ussuriensis has been divided into a total of 11 phases. The chromatin granules began to condense at the early cap phase, regularized at the acrosome phase, and a perfect nucleus of sperm was formed at the maturation phase. The chromatoid body was occurred in the upper cytoplasm of nucleus at the early Golgi phase, and it was accurred the posterior cytoplasm of the nucleus at the early maturatio phase. The formation of sperm tail began to be develop in the early golgi phase, and completed at the spermiation phase. The fiber structure of middle piece was consisted of nine outer doublets and two central singlet microtubules and Nos. 1, 5, 6 and 9 in the outer dense were larger than the others(2, 3, 4, 7, 8).
The internal ultrastructural changes of germ cells and external morphology of spermatozoon during the spermatogenesis in the rockfish, Sebastes inermis were studied using transmission and scanning electron microscope. The testis is seminiferous tubule type in internal structure. Seminiferous tubule consist of many cyst which contain numerous germ cells in same developmental stage. Spermatogonium contained a large nucleus with single nucleolus in interphase. Primary spermatocyte identified by the presence of synaptonemal complex in nucleus and the contained a number of mitochondria, endoplasmic reticula and Golgi bodies in cytoplasm. The nucleoplasm of secondary spermatocyte was more concentrated than that of the previous phase. Spermatids were more condensed in nucleus and cytoplasm, and show the long-spherical shape. In the cytoplasm of spermatid mitochondria located to lower portion of the nucleus and Golgi bodies located to upper portion, but proacrosomal granule is not appeared. The spermatozoon consist of the head and tail. No acrosome could be found in the head. The cytoplasmic collar of posterior part in sperm head contained mitochondria which surrounded axial filament. The well developed axonemal lateral fins were identified in sperm flagellum, and the axial filament of the flagellum consist of nine pairs of peripheral microtubules and one pair of central microtubules.
본 연구는 광학현미경과 전자현미경을 이용하여 소라, Batillus cornutus의 정자형성과정과 정자의 미세구조를 관찰하였다. 소라는 2003년 5월에 전라남도 완도군 연안에서 잠수하여 채집하였다. 실험개체의 크기는 각고 $60.0{\sim}69.9\;mm$였다. 소라의 정소는 다수의 정자형성소낭으로 구성되며, 이들 소낭 내에는 다양한 발달단계를 가지는 생식세포들이 존재하였다. 태사기의 제 1정모세포에서는 연접사복합체가 관찰되었다. 초기의 정세포에서는 골지체의 출현, 핵질 전자밀도의 증가 및 관상의 미토콘드리아가 확인되었다. 초기 정세포에서 관찰되는 아첨체과립은 전자밀도가 높은 작은 이형과립들로 구성되어 있었다. 정자변태과정의 중기부터는 핵의 후방에서 중심립이 확인되며, 이들 중심립을 중심으로 잘 발달되어진 미토콘드리아들이 위치하고 있었다. 이 시기에 아첨체과립은 응축되며, 얇은 막을 가진 첨체를 형성한다. 후기 정자변태과정 동안에 첨체는 길게 신장되어 원뿔모양으로 변화한다. 정자는 두부, 중편, 미부로 구성된다. 정자의 두부는 원형의 핵과 원뿔모양의 첨체로 구성되며, 미세섬유로 구성된 첨체기둥이 핵과 첨체 사이에 존재하고 있었다. 중편에는 5개의 미토콘드리아가 존재하고 있었다. 정자의 꼬리는 중심립에서 유래된 미세소관의 전형적인 "9+2" 구조를 하고 있었다.
난태생어류인 성숙한 블랙몰리(black molly, Poecilia sphenops)와 세일핀몰리(sailfin molly, Poecilia latipinna)의 정소를 적출하여 정자형성과정과 정자의 미세구조를 광학현미경과 전자현미경을 이용하여 관찰하였다. 정소는 부레와 창자사이에 위치하고 있었고 장축 7 mm, 단축 2 mm 정도의 크기로 흰색을 띠고 있었다. 두 종 모두 정자형성 과정은 정소낭(testicular cyst)에서 이루어졌으며, 각 정소낭 내에 동일한 분화시기의 생식세포가 분포하고 있었다. 제1정모세포는 타원형으로 관찰되었으며, 핵과 세포질의 전자밀도는 다른 생식 세포들에 비해서 매우 낮았고 미토콘드리아는 핵막주위에 분포하고 있었다. 제2감수분열 전기의 태사기에 나타나는 태기사복합체(synaptonemal complex)들이 확인되는 경우도 있었다. 두 종 모두 제2정모세포는 구형으로 정원세포보다 크기는 작았고 인은 발달되어 있지 않았으며, 핵의 전자밀도는 더 높아졌다. 특히 미토콘드리아는 세포질 전체에 분포하고 있었고 정세포가 정자로 발달하는 정자완성과정시기에 편모가 형성되는 경우가 일반적이지만 이미 제2정모 세포시기에 편모형성이 관찰되었다. 정자의 중편부위를 횡단한 결과 미토콘드리아는 2~4개 정도로 관찰되었고 편모의 미세소관 배열은 전형적인 두 종 모두 9+2 구조를 이루고 있었고 편모에 lateral fin이 발견되었다. 성숙한 정자의 두부형태는 구형인 정세포와 달리 장원추형이었으며 염색질 응축이 매우 뚜렷하였고, 두부에서 첨체는 관찰되지 않았으며 중편부의 미토콘드리아는 두 종 모두 8~10개가 종렬로 위치하고 있었다. 이상과 같이 두 종의 정자형성과정과 정자의 형태는 같으며 이런 특징은 난태생 송사리과 어류의 공통적인 특성으로 생각된다.
유미류와 하등 무미류 정충의 미세구조를 비교하고 미세구조적 형질에 의한 계통적 관계를 고찰하였다. 대부분의 유미류 정충은 subacrosomal rod, endonuclear canal, perforatorium, ring, marginal filament, 꼬리의 구성과 꼬리의 주축이 axial rod인7가지 양서 류의 원시 공유형질(symplesiomorphies)을 나타내었다. 하등 무미류 정충은 marginalfilament가 없으며 subacrosomal rod와 ring의 구조는 단지 Ascaphus와 Discoglossus의 두 속에서만 각각 보고되었다. 이러한 미세구조적 형질은 유미류와 하등 무 미류의 원시 공유형질로 간주되며 두 분류군 사이의 계통적 연속성을 보여준다. 또한 정자 꼬리의 구성, endonuclear canal과 perforatorium의 형성에서도 매우 밀접한 계통적 관계를 보여주었다.
The testis and epididymis are important organs of the male reproductive system; the functionis to produce, mature, transport, and store sperm. It is important to understand the localization and expressionof specific proteins based for the studies of its physiological processes. In this study, we investigated theexpression and distribution of galectin-3, one of beta-galactoside-binding proteins, in the testis andepididymis of mouse using western blot and imunohistochemistry. Western blot analysis revealed that theexpression of galectin-3, 29 kDa protein, was low in the testis. In the epididymis, high expression wasdetected in the body and tail part, but moderate expression in the head part. By immunohistochemicalanalysis, we found that positive localization of galectin-3 was detected in some myoid cells and Leydigin the epithelium of epididymis, especially in the epithelium of both body and tail of epididymis. Collectively,these results suggest that galectin-3 is constitutively expressed in the testis and epididymis of mouse withvarying intensity, and the role of galectin-3 in the male reproductive organ may be involved in the specificfunction of its structures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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