Yuh, In Suh;Cheong, Hee Tae;Kim, Jong Taek;Park, In Chul;Park, Choon Keun;Yang, Boo Keun
Journal of Animal Science and Technology
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v.55
no.4
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pp.237-247
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2013
This study was to examine single or combined in vitro effects of environmental endocrine disruptors on boar sperm characteristics, oxidative stress damage in sperm and development of porcine IVF embryos. Addition of various concentration of NP (10, 20, $30{\mu}M$), DBP (10, 50, $100{\mu}M$) and BPA (1, 5 or $10{\mu}g/ml$) on boar sperm characteristics such as percentages of sperm motility, viability, membrane integrity and mitochondrial activity were dose-dependently decreased within 3, 6 or 9 hr incubation period (p<0.05). The overall detrimental effects increased with incubation time increasement. NP, DBP and BPA showed the detrimental effects on sperm membrane and mitochondria of energy production organelles affecting cell viability with the dependancy of dose and incubation time. In combination effects, NP ($10{\mu}M$) + DBP ($10{\mu}M$) significantly decreased boar general sperm characteristics for 3 or 6 hr incubation period compared with control (p<0.05). When both of NP and DBP concentrations (NP; $30{\mu}M$, DBP; $100{\mu}M$) increase, the detrimental effects on sperm characteristics were larger than those of low concentration combination (p<0.05). The inhibitory effects of NP ($30{\mu}M$) + BPA ($10{\mu}g/ml$) on sperm characteristics were larger than those of NP ($10{\mu}M$) + BPA ($1{\mu}g/ml$) (p<0.05). DBP ($100{\mu}M$) + BPA ($10{\mu}g/ml$) decreased sperm characteristics compared with the low concentration combination (DBP $10{\mu}M$ + BPA $1{\mu}g/ml$, p<0.05). This result indicates the detrimental effects of both chemicals on sperm characteristics were dose dependent. Addition of NP ($30{\mu}M$) + DBP ($100{\mu}M$), NP ($30{\mu}M$) + BPA ($10{\mu}g/ml$), DBP ($10{\mu}M$) + BPA ($1{\mu}g/ml$) or DBP ($100{\mu}M$) + BPA ($10{\mu}g/ml$) significantly increased lipid peroxidation for 3 or 6 hr incubation period (p<0.05) compared with no addition control. NP (${\geq}20{\mu}M$) decreased the percentages of IVF embryo development from morulae and blastocyst stages (p<0.05) and its detrimental effects were dose-dependant. BPA 0, 1, 5 or $10{\mu}g/ml$ decreased significantly and dose-dependently the percentage of morulae plus and blastocysts (p<0.05). Combinations of DBP ($100{\mu}M$) plus NP ($30{\mu}M$) and DBP ($100{\mu}M$) plus BPA ($10{\mu}g/ml$) did not affect on morulae and blastocyst development, but NP ($30{\mu}M$) plus BPA ($10{\mu}g/ml$) has significant detrimental effect on embryo development at these stages (p<0.05). These overall results indicate that the partial detrimental effects on boar sperm characteristics and embryo development by NP, DBP, BPA or the combination of these chemicals might be due to the increasement of lipid peroxidation and free radical formation in the cell and there were no specific interaction effects on boar sperm and embryo degeneration among the combined treatments.
This experiment was carried out to examine the correlation among the semen characteristics of Holstein bulls. Seventy-two samples of semen were collected from 6 Holstein bulls, 2 to 10 years old. The characteristics of the semen were estimated by ordinary methods. The results obtained in this experiment were summarized as follows: 1. Semen characteristics on an average were 6.0 ml of volume, 16${\times}$108/ml of concentration, 92.4${\times}$108 of total sperm number(TSN), 72.1% of motility and 4.6% of abnormality. 2. Semen volume was positively high correlated (P<0.01) with total sperm number, but negative correlation was observed with the sperm motility (P<0.05) and semen concentration. 3. In relation to their age, older bulls semen volume and total sperm number were increased (P<0.01), but semen concentration and motility were decreased (P<0.01).
Seven rc mutant and seven normal male birds (Rhode Island Red suie, RIR) were used in this study to determine the effects of rc mutation on semen characteristics, testosterone profile and spermatogenic tissues. All birds were randomly selected at week 12 of age and housed in individual cages and were fed and watered ad libitum. The birds were exposed to a 14L:10D light cycle during experiment. Semen were collected at weeks 22 to 23 from each bird twice a week and evaluated for semen volume (SV), sperm concentration (SC), total sperm count (TSC), percent of sperm motility (%SM), dead sperm (%DS), and sperm metabolic activity (SMA). To determine the testosterone concentration (TC) in plasma, blood was collected at weeks 12, 16 and 18. Testicular tissue were collected, processed and evaluated for semineferous tubule diameter (STD), round spermatid number (RSN), percent elongated sperm (%ES) and semineferous tubules length (STL). Body weight (BW), comb weight (CW) and testes weight (TW) were weighted at the end of experiment (week 23). The SV, TSC and %SM were significantly higher in normal birds but the %DS was higher in blind birds (p<0.05). The SC did not differ significantly between the two groups but its value was higher in normal birds. The sperm metabolic activity in the first h of collection did not differ significantly between the two groups but after 24 h, the level of SMA in normal group was significantly higher (p<0.05). The level of TC did not differ significantly between the two genotype groups but normal birds had higher TC in all collections except the last one. The STD, RSN, %ES and STL in normal birds were higher when compared to blind birds but the differences were insignificant except for ES percent. The BW, CW and TW between the two groups did not differ significantly but the weights were higher in normal group compared to blind birds. Statistical analysis of semen characteristics, testosterone profile and histological factors were indicated detrimental effects of rc mutation in prepubertal RIR blind male birds due to lack of light.
Jun, Je-Cheon;Kim, Jin Hee;Park, Young Jae;Kang, Hee Woong;Chung, Jae Seung;Chung, Ee-Yung
The Korean Journal of Malacology
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v.28
no.2
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pp.165-174
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2012
The morphology and taxonomic values of the sperm in male Chlamys (Swiftopecten) swiftii were investigated by transmission electron microscope observations. The morphologies and ultrastructures of the sperm nucleus and the acrosome of this species are the vase type and long cone shape, respectively. Spermatozoa are approximately $45-50{\mu}m$ long including a sperm nucleus (approximately $2.60{\mu}m$ long), an acrosome (about $0.63{\mu}m$ long), and a tail flagellum (approximately $44-47{\mu}m$ in long). The axoneme of the sperm tail shows a 9+2 structure. In this study, the right and left basal rings in the acrosomal vesicle of this species show electron opaque part (region), and also the anterior apex part of the acrosomal vesicle shows electron opaque part (region). These characteristics of the acrosomal vesicle were found in Pectinidae and other several families in subclass Pteriomorphia. The number of mitochondria in the midpiece of the sperm of this species are four, as one of common characteristics appear in most species in Pectinidae in subclass Pteriomorphia. In addition, the satellite fibres are found near the distal centriole of this species, as have been reported in other species of Pectinidae in subclass Pteriomorphia. Accordingly, structutral characteristics which are found in the acrosomal vesicle, four mitochondria in the sperm midpiece and the appearance of the satellite fibers near the distal centriole of C. (S.) swiftii in Pectinidae (subclass Pteriomorphia), can be employed for phylogenetic and taxonomic analyses as taxonomic key or a significant tool.
Objective : To evaluate the effects of the reactive oxygen species (ROS) generated with a xanthine (X) and xanthine oxidase (XO) system on sperm function, the change of sperm characteristics, lipid peroxidation, and DNA fragmentation in bovine spermatozoa. Materials and Methods: ROS were produced using a combination of 1000 uM X and 50 mU/ml XO. The ROS scavengers: superoxide dismu tase (SOD) (200 U/ml) and catalase (500 U/ml) were also tested. Spermatozoa were incubated for 2 hours in BWW medium with a combination of X-XO supplemented with or without ROS scavengers at $37^{circ}C$ under 5% $CO_2$ incubator. Sperm movement characteristics by CASA (computer-aided sperm analysis), HOST (hypoosmotic swelling test), Caionophore induced acrosome reaction, malondialdehyde formation for the analysis of lipid peroxidation, the percentage of DNA fragmentation using the method of TdT-mediated nick end labelling (TUNEL) by flow cytometry were determined after 2 hours incubation. Results: The action of ROS on bovine spermatozoa resulted in a decreased in capacity for sperm motility, Ca-ionophore induced acrosome reaction and membrane integrity, an increased in malondialdehyde formation and the percentage of sperm with DNA fragmentation. In the effects of antioxidant, catalase completely alleviated the toxic effects induced by the ROS in terms of sperm function and characteristics, however SOD exhibited no capacity to reduce the toxic effects. Conclusion: The ROS can induce significant damages to sperm functions and characteristics. The useful ROS scavengers can minimized the defects of sperm function and various damages of spermatozoa.
The ultrastructures of germ cells during spermatogenesis and sperm morphology in male Mya arenaria oonogai, which was collected on the coastal waters of Samcheonpo, south coast of Korea, were investigated by transmission electron microscopic observations. In the early stage of the spermatid during spermiogenesis, a few granules and a proacrosomal granule, which is formed by the Golgi complex, appear on the spermatid nucleus, and then it becomes a proacrosomal vesicle. Consequently, it becomes an acrosome by way of the process of acrosome formation. The morphologies of the sperm nucleus type and the acrosome of this species have a curved cylindrical type and cone shape, respectively. The spermatozoon is approximately $48-50{\mu}m$ in length including a curved cylinderical sperm nucleus (about $2.65{\mu}m$ long), an acrosome (about $0.64{\mu}m$ in length) and tail flagellum ($40-45{\mu}m$ long). As some ultrastructural characteristics of the acrosomal vesicle, the peripheral parts of two basal rings show electron opaque part (region), while the apex part of the acrosome shows electron lucent part (region). These charateristics of the sperm belong to the family Myidae or some species of Veneridae in the subclass Heterodonta, unlike a characteristic of the subclass Pteriomorphia showing all part of the acrosome being composed of electron opaque part (region). Therefore, it is easy to distinguish the families or the subclasses by the acrosome structures. Exceptionally, In particular, a cylinder-like nucleus of the sperm is curved (the angle of the nucleus is about $20^{\circ}$), as seen in some species of Veneridae (range from $0^{\circ}-80^{\circ}$). The number of mitochondria in the midpiece of the sperm of this species are four, as one of common characteristics appeared in most species except for a few species in Veneridae in the subclass Heterodonta. Cross-sectioned axoneme of the sperm tail flagellum shows a 9+2 structure: the axoneme of the sperm tail flagellum consists of nine pairs of peripheral microtubules at the periphery and a pair of central doublets at the center.
Tanga, Bereket Molla;Qamar, Ahmad Yar;Raza, Sanan;Bang, Seonggyu;Fang, Xun;Yoon, Kiyoung;Cho, Jongki
Animal Bioscience
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v.34
no.8
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pp.1253-1270
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2021
Assessment of male fertility is based on the evaluation of sperm. Semen evaluation measures various sperm quality parameters as fertility indicators. However, semen evaluation has limitations, and it requires the advancement and application of strict quality control methods to interpret the results. This article reviews the recent advances in evaluating various sperm-specific quality characteristics and methodologies, with the help of different assays to assess sperm-fertility status. Sperm evaluation methods that include conventional microscopic methods, computer-assisted sperm analyzers (CASA), and flow cytometric analysis, provide precise information related to sperm morphology and function. Moreover, profiling fertility-related biomarkers in sperm or seminal plasma can be helpful in predicting fertility. Identification of different sperm proteins and diagnosis of DNA damage has positively contributed to the existing pool of knowledge about sperm physiology and molecular anomalies associated with different infertility issues in males. Advances in methods and sperm-specific evaluation has subsequently resulted in a better understanding of sperm biology that has improved the diagnosis and clinical management of male factor infertility. Accurate sperm evaluation is of paramount importance in the application of artificial insemination and assisted reproductive technology. However, no single test can precisely determine fertility; the selection of an appropriate test or a set of tests and parameters is required to accurately determine the fertility of specific animal species. Therefore, a need to further calibrate the CASA and advance the gene expression tests is recommended for faster and field-level applications.
Techniques for manipulation of spermatozoa and oocytes have been widely used for in vitro production(IVP) of Hanwoo. This study was conducted to examine the effects of theophylline and heparin on frozen-thawed Hanwoo sperm for enhancing the efficiency of IVP technique. Oocytes were inseminated with forzen bull semen treated with either theophylline or heparin for examining the effect of each substance on fertilization and subsequent development. More (P<0.05) oocytes formed pronucleus and develop to the morula and blastocyst stages after inseminated with sperm treated with heparin than after inseminated with sperm treated with theophylline. The pregnancy rate after embryo transfer was higher after heparin treatment than after theophylline treatment, but did not differ significantly. There was no significant difference of offspring delivery between two groups. In conculsion, theophylline and heparin can be used for enhancing the efficiency of IVP system for Hanwoo. Considering characteristics of these substance, theophylline may be useful in the artificial insemination system, which requires vigorous sperm motility. While, heparin supporting sperm viability in vitro can be effectively used for improving in vitro-fertilization system.
Objective: Sperm vitrification leads to the production of reactive oxygen species (ROS) that can damage the functional parameters of sperm. The present study aimed to investigate the antioxidant effect of Nigella sativa extract on motility, plasma membrane function, mitochondrial membrane potential (MMP), DNA damage, and intracellular ROS production. Methods: A total of 20 sperm samples were used. Samples were divided into six experimental groups, including groups with aqueous extract from N. sativa seeds at concentrations of 1% to 6%, a cryopreserved control group, and a fresh control group. Results: Statistical analysis showed significantly higher total sperm motility at concentrations of 3% to 6% than in the vitrified semen control group. Additionally, progressive motility and all motion characteristics at all concentrations were significantly higher than in the vitrified semen control group. The presence of N. sativa seed extract also improved the quality of the sperm parameters assayed in all experimental groups (1%-6%; intracellular ROS production, DNA damage, MMP, and sperm membrane function) compared to the control group. Conclusion: Higher concentrations of N. sativa led to improvements in all sperm parameters and sperm quality. These findings indicate that N. sativa seed extract is effective for improving the quality of sperm after vitrification.
Since the turn of the century, scientists have earnestly sought to develop a single laboratory assay or combination of laboratory assays which accurately predict the fertility of a semen sample. Most of these assays have focused on evaluating physical characteristics of sperm such as motility, viability, acrosomal integrity and morphology. In recent years new approches have been used to assess the functional aspects of a sperm that are needed to reach the oocyte, fertilize it and contribute to successful embryo development. Among these techniques are the ability of sperm to undergo a heparin induced acrosome reaction and in vitro fertilization, and the affinity of sperm to bind heparin binding protein. Intensification of research efforts in the area of control of sperm fertilizing ability should be a high priority, in view of undoubted benifits both to our basic understanding of sperm fertilizing ability and to our ability to modify it for Al industry.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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