Kim, Seul Ki;Paik, Haerin;Lee, Jung Ryeol;Jee, Byung Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제49권3호
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pp.196-201
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2022
Objective: This prospective consecutive study investigated the variation in sperm DNA fragmentation (SDF) in multiple semen samples from patients with cancer. Methods: Eighty-one patients with various cancers underwent multiple semen collections on 3 consecutive days for sperm cryopreservation prior to cancer treatment. A commercial Halosperm kit was used to measure SDF. Within- and between-subject coefficients of variation were estimated via random-effects analysis of variance to assess the consistency of semen parameters and SDF. Intraclass correlation coefficients (ICCs) were calculated to assess the magnitude of the between-subject component of variance relative to the total variance. Results: The volume of semen in the day-2 and day-3 samples was significantly lower compared with the day-1 sample. Most parameters showed high ICC values, suggesting that within-subject fluctuations were small relative to the between-subject variability. The highest ICC values were identified for the SDF (ICC, 0.68; 95% confidence interval [CI], 0.45-0.84) and semen volume (ICC, 0.67; 95% CI, 0.45-0.84). Conclusion: Our findings showed that repeated ejaculates from patients with cancer had stable SDF levels.
We observed MMPs expression in all sperm groups, with pro-MMP showing lower expression than active MMPs. According to the results from each freezing extender, the sperm membrane integrity (HOST: Hypoosmotic Swelling Test) analysis in TCGGD (Tris 250 mM, Citric acid 88 mM, Glucose 47 mM, Glycerol 3%, Dimethylsulpoxide 3.5 M) is 59.8 ± 0.7, TCGSD (Tris 250 mM, Citric acid 88 mM, Glucose 47 mM, Sucrose 0.1 M, Dimethylsulpoxide 3.5 M) is 59.3 ± 0.5 were significantly higher (p < 0.05) among the experimental groups. And MMPs analysis result, we observed MMPs expression in all sperm groups, with pro-MMP showing lower expression than active MMPs. The expression of active MMP-2 was the highest in sperms frozen in TCGSD and TCGD (Tris 250 mM, Citric acid 88 mM, Glucose 47 mM, Dimethylsulpoxide 3.5 M), Meanwhile, sperms from the TCGGD and TCGED (Tris 250 mM, Citric acid 88 mM, Glucose 47 mM, Ethylene glycol 3%, Dimethylsulpoxide 3.5 M) group showed lower level of active MMP-2 expression. Together, these results indicate that adding glycerol or sucrose to the sperm freezing buffer would not only suppress MMPs expression but also minimize DNA fragmentation, providing a mean to improve the success rate in the in vitro manipulation of rabbit sperms. Therefore, these results suggest that TCGGD or TCGSD extender method for freezing-thawing of rabbit sperm increased the viability after thawing.
Objective: To evaluate the results of CASA systems and to compare its results. Methods: Fifty semen sampales were analysed. Concentration, motility and forward progression were evaluated simultaneously on the same semen samples using Cell Soft System-3000 (CS system) and Sperm Quality Analyzer-V (SQA system). Results: Mean semen volume was $2.8{\pm}1.2\;ml$. Mean value of sperm concentration, motility, forward progression using CS system were $83.4{\pm}45.7{\times}10^6/ml$, $52.3{\pm}16.4%$ and $48.6{\pm}13.4%$, respectively. And mean value of sperm concentration, motility, forward progression using SQA system were $78.2{\pm}42.9{\times}10^6/ml$, $57.0{\pm}24.0%$ and $50.6{\pm}21.9%$, respectively. There were no statistical significancy of sperm concentration, motility, forward progression between the two devices. Conclusion: SQA system variables well correlated with the CS system. As a screening test for semen quality, CS system and SQA system is considered as useful in the management of male infertility.
Purpose : This study was conducted to investigate the dose dependent effects of Panax Ginseng on the reproductive functions in mice. Methods : We used the 8-week-old mice, and administered 0.2ml extract solution of Panax Ginseng in the different concentration once a day for 60 days. The control group was administered 0.2ml normal saline in the same way and duration. We counted the total, motile and normal sperm number of the cauda epididymis and measured the activities of sperm hyaluronidase, peroxidase and catalase of the isolated testis tissues. And we observed histological changes of surgically isolated testis by histochemical methods. Results : All Panax Ginseng extract solution groups showed significantly dose dependent differences in the total number, the motility and normality of sperms compared with the control group, respectively. In the histological analysis of the testicular tissues, all Panax Ginseng extract solution groups showed the enlargement of testicular lobe diameter and apparent angiogenesis between seminiferous tubules. And the activity of typical sperm enzyme, hyaluronidase, was significantly increased in the Panax Ginseng extract solution groups compared to the control group. In the antioxidant activity analysis, the activities of peroxidase and catalase were significantly increased in the Panax Ginseng extract solution groups compared to the control group. Conclusion : This study shows that Panax Giseng has the beneficial effects on the concentration, morphology and motility of sperm, the activities of sperm hyaluronidase, testicular peroxidase and catalase. We can suggest that Panax Ginseng be useful for the treatment of male infertility.
Baek, Sun Young;Chung, Hak Jae;Hong, Joon Ki;Cho, Eun Seok;Choi, Inchul
농업과학연구
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제47권3호
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pp.657-665
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2020
The objective of this study was to investigate whether supplementation of pentoxifylline (PTX; phosphodiesterase inhibitor) to thawed boar semen improves the post-thaw motility of sperm and affects the efficiency of artificial insemination (AI) and further development. To determine the concentration of PTX for AI, frozen-thawed semen was incubated with 0, 5, 10, and 20 mM PTX in an extender freezing medium, respectively, after thawing. Kinematic properties of sperm were examined with a computer-assisted semen analysis (CASA) system. In addition, viability and mitochondrial activity were also tested by LIVE/DEAD and a MitoTracker kit. There were no significant differences in the kinetic parameters of thawed sperm between control and treatment groups, but overall assessment parameters such as motility and rapid progressive were higher in the 10 mM PTX group. In the viability and mitochondrial assay, there were no significant differences observed in the PTX treatment, compared to the control. For further analysis, artificial inseminations were performed using frozen semen and 10 mM PTX treated cryopreserved semen, respectively. There were no differences in pregnancy rates and fetus weights among the groups until 30 and 40 days, but litter size was reduced and relatively low-birth weight was observed in the PTX group. In summary, our findings suggest that enhancement of in vitro sperm quality or non-toxicity supplemented by PTX may have detrimental effects on fetus development.
The ultrastructural characteristics of germ cell development during spermatogenesis and mature sperm morphology of in male Scapharca subcrenata were investigated by transmission electron microscope observation. Spermatogonia are located nearest the outer wall of the acinus, while spermatocytes and spermatids are positioned near the accessory cells. The accessory cells, which is in close contact with developing germ cells, contained a large quantity of glycogen particles and lipid droplets in the cytoplasm. Therefore, it is assumed that they are involved in supplying of the nutrients for germ cell development. The morphologies of the sperm nucleus and the acrosome of this species are the oval shape and cone shape, respectively. Spermatozoa are approximately 45-$50{\mu}m$ in length including a sperm nucleus (about $1.30{\mu}m$ in length), an acrosome (about $0.59{\mu}m$ in length), and tail flagellum (about 43-$47{\mu}m$). The axoneme of the sperm tail shows a 9 + 2 structure. As some characteristics of the acrosomal vesicle structures, the right and left basal rings show electron opaque part (region), and also the anterior apex part of the acrosomal vesicle shows electron opaque part (region). These characteristics of the acrosomal vesicle were found in Acinidae and other several families in subclass Pteriomorphia. These common characteristics of the acrosomal vesicle in subclass Pteriomorphia can be used for phylogenetic and taxonomic analysis as a taxonomic key or a significant tool. The number of mitochondria in the midpiece of the sperm of this species are five, as one of common characteristics appear in most species in Arcidae and other families in subclass Pteriomorphia. The acrosomal vesicles of Arcidae species do not contain the axial rod and several transverse bands in acrosome, unlkely as seen in Ostreidae species in subclass Pteriomorphia, These characteristics can be used for the taxonomic analysis of the family or superfamily levels as a systematic key or tools.
Javad Sadeghinezhad;Fatemeh Yarmahmoudi;Mohammad Mehdi Dehghan;Saeed Farzad Mohajeri;Ehsan Roomiani;Hadis Bojarzadeh;Mahdi Aghabalazadeh Asl;Ava Saeidi;Margherita De Silva
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제50권3호
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pp.160-169
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2023
Objective: Cryptorchidism is one of the main causes of infertility and can result in testicular cancer. This study aimed to present quantitative data on the damage caused by cryptorchidism using stereological analysis. Methods: Thirty newborn rats were randomly divided into control and experimental groups. The experimental group underwent surgery to induce unilateral cryptorchidism in the left testis, whereas the control group underwent a sham surgical procedure 18 days after birth. The testes were removed at designated time points (40, 63, and 90 days after birth) for stereological evaluation and sperm analysis. Total testicular volume, interstitial tissue volume, seminiferous tubule volume and length, and seminiferous epithelium volume and surface area were measured. Other parameters, such as sperm count, sperm morphology, and sperm tail length, were also examined. Results: Statistically significant differences (p<0.05) were observed between the experimental and the control groups at different ages regarding the volumes of various parameters, including the surface area of the germinal layer, the length of the seminiferous tubules, sperm count, and sperm morphology. However, no significant differences were observed in the epithelial volume and the sperm tail length of the groups. Conclusion: Given the substantial effect of cryptorchidism on different testicular parameters, as well as the irreversible damage it causes in the testes, it is important to take this abnormality seriously to prevent these consequences.
본 연구는 흰쥐의 정소에 방사선을 조사하였을 때 시간이 경과함에 따라 나타나는 정소세포 및 정자의 변화를 현미경학적으로 얻은 영상을 기초로 영상처리에 의한 정량분석을 통하여 정자의 변화에 대한 결과를 정량화함으로써 더 정확하고 객관적인 결과를 얻고자 하는데 그 목적을 두고 있다. 연구에는 8주 수령의 흰쥐를 대상으로 하였으며, 6 MV의 X선을 1회 2 Gy를 전신 조사하였다. 총 30 마리의 흰쥐를 대상으로 방사선을 조사하지 않은 정상대조군과 실험군을 조사 즉시, 조사 2시간, 4시간, 8시간, 24시간 후에 각 실험군 마다 5마리의 정소를 각각 적출하였다. 적출 후 Periodic acid Schiff 염색을 시행하여 정상대조군과 실험군에서의 정소세포와 정자의 상태를 관찰하였다. 방사선조사 후 24시간까지, 정소세포수와 정자수가 점차 감소하는 것을 정성적 및 정량적으로 유의함을 확인하였다.
Objectives: Bisphenol A diglycidyl ether (BADGE) is a liquid compound obtained by condensation of two molecules of epichlorohydrin with one molecule of bisphenol A. General and reproductive toxicity with BADGE has been reported higher than 1000 mg/kg/day. This study was performed to show the effects of acute exposure to BADGE below 1000 mg/kg/day on the testis in adult male rats. Methods: BADGE was administered by gastric lavage in a single dose of 500, 750, 1000, and 2000 mg/kg/day in 8-week old male SPF Sprague-Dawley rats. The right testis was processed for light microscopic analysis. The left testis was homogenized and spermatids were counted to determine the daily sperm production and daily abnormal sperm production. The sperm count, sperm motility, and incidence of abnormal sperm were estimated in the epididymis. In testicular sections, the seminiferous tubules were observed for qualitative changes. The progression of spermatogenesis was arbitrarily classified as full-matured, maturing, and immature. The specimen slide was observed at 3 points and 10 seminiferous tubules were evaluated at each point. Results: The male rats exposed to single oral dose of BADGE at 750, 1000, and 2000 mg/kg/day were significantly increased the number of immature and maturing sperm on the testis. There were no significant differences with respect to sperm head count, sperm motility, and sperm abnormality in the BADGE treatment groups. Conclusions: These results suggest that single oral exposure of BADGE 750 mg/kg/day can affect adult male testis development.
The cryopreservation of sperm has become the subject of research for successful artificial insemination technologies. Antifreeze proteins (AFPs), one of the factors necessary for effective cryopreservation, are derived from certain Antarctic organisms. These proteins decrease the freezing point of water within these organisms to below the temperature of the surrounding seawater to protect the organism from cold shock. Accordingly, a recent study found that AFPs can increase the motility and viability of spermatozoa during cryopreservation. To evaluate this relationship, we performed cryopreservation of boar sperm with AFPs produced in the Arctic yeast Leucosporidium sp. AFP expression system at four concentrations (0, 0.01, 0.1, and $1{\mu}g/ml$) and evaluated motility using computer assisted sperm analysis. DNA damage to boar spermatozoa was measured by the comet assay, and sperm membrane integrity and acrosome integrity were evaluated by flow cytometry. The results showed that motility was positively affected by the addition of AFP at each concentration except $1{\mu}g/ml$ (p<0.001). Although cryopreservation with AFP decreased the viability of the boar sperm using, the tail DNA analyses showed that there was no significant difference between the control and the addition of 0.1 or $0.01{\mu}g/ml$ AFP. In addition, the percentage of live sperm with intact acrosomes showed the least significant difference between the control and $0.1{\mu}g/ml$ AFP (p<0.05), but increased with $1{\mu}g/ml$ AFP (p<0.001). Our results indicate that the addition of AFP during boar sperm cryopreservation can improve viability and acrosome integrity after thawing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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