Kim, Seul Ki;Paik, Haerin;Lee, Jung Ryeol;Jee, Byung Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
/
제49권3호
/
pp.196-201
/
2022
Objective: This prospective consecutive study investigated the variation in sperm DNA fragmentation (SDF) in multiple semen samples from patients with cancer. Methods: Eighty-one patients with various cancers underwent multiple semen collections on 3 consecutive days for sperm cryopreservation prior to cancer treatment. A commercial Halosperm kit was used to measure SDF. Within- and between-subject coefficients of variation were estimated via random-effects analysis of variance to assess the consistency of semen parameters and SDF. Intraclass correlation coefficients (ICCs) were calculated to assess the magnitude of the between-subject component of variance relative to the total variance. Results: The volume of semen in the day-2 and day-3 samples was significantly lower compared with the day-1 sample. Most parameters showed high ICC values, suggesting that within-subject fluctuations were small relative to the between-subject variability. The highest ICC values were identified for the SDF (ICC, 0.68; 95% confidence interval [CI], 0.45-0.84) and semen volume (ICC, 0.67; 95% CI, 0.45-0.84). Conclusion: Our findings showed that repeated ejaculates from patients with cancer had stable SDF levels.
Objective: The usual seminal profile has been customarily used for diagnosing male infertility based on an examination of semen samples. However, sperm DNA fragmentation has also been causally linked to reproductive failure, suggesting that it should be evaluated as part of male infertility assessments. To compare the ability of the five most widely utilized methodologies of measuring DNA fragmentation to predict male infertility and reactive oxygen species by Oxisperm kit assay. Methods: In this case-control study, which received ethical committee approval, the participants were divided into fertile and infertile groups (50 patients in each group). Results: The alkaline comet test showed the best ability to predict male infertility, followed by the terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labelling (TUNEL) assay, the sperm chromatin dispersion (SCD) test, and the sperm chromatin structure assay (SCSA), while the neutral comet test had no predictive power. For our patient population, the projected cut-off point for the DNA fragmentation index was 22.08% using the TUNEL assay, 19.90% using SCSA, 24.74% using the SCD test, 48.47% using the alkaline comet test, and 36.37% using the neutral comet test. Significant correlations were found between the results of the SCD test and those obtained using SCSA and TUNEL (r = 0.70 and r = 0.68, respectively; p< 0.001), and a statistically significant correlation was also found between the results of SCSA and the TUNEL assay (r = 0.77, p< 0.001). Likewise, the results of the alkaline comet test showed significant correlations with those of the SCD, SCSA, and TUNEL tests (r = 0.59, r = 0.57, and r = 0.72, respectively; p< 0.001). Conclusion: The TUNEL assay, SCSA, SCD, and the alkaline comet test were effective for distinguishing between fertile and infertile patients, and the alkaline comet test was the best predictor of male infertility.
Alahmar, Ahmed T;Sengupta, Pallav;Dutta, Sulagna;Calogero, Aldo E.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
/
제48권2호
/
pp.150-155
/
2021
Objective: Oxidative stress (OS) plays a key role in the etiology of unexplained male infertility. Coenzyme Q10 (CoQ10) is a potent antioxidant that may improve semen quality and OS in infertile men with idiopathic oligoasthenoteratospermia (OAT), but the underlying mechanism is unknown. Therefore, the present study was undertaken to investigate the effect of CoQ10 on OS markers and sperm DNA damage in infertile patients with idiopathic OAT. Methods: This prospective controlled study included 50 patients with idiopathic OAT and 50 fertile men who served as controls. All patients underwent a comprehensive medical assessment. Patients and controls received 200 mg of oral CoQ10 once daily for 3 months. Semen and blood were collected and analyzed for sperm parameters, seminal CoQ10 levels, reactive oxygen species (ROS) levels, total antioxidant capacity, catalase, sperm DNA fragmentation (SDF), and serum hormonal profile. Results: The administration of CoQ10 to patients with idiopathic OAT significantly improved sperm quality and seminal antioxidant status and significantly reduced total ROS and SDF levels compared to pretreatment values. Conclusion: CoQ10, at a dose of 200 mg/day for 3 months, may be a potential therapy for infertile patients with idiopathic OAT, as it improved sperm parameters and reduced OS and SDF in these patients.
Objective: Although intracytoplasmic sperm injection (ICSI) is a way to deal with in vitro fertilization failure, 3% of couples still experience repeated fertilization failure after attempted ICSI, despite having sperm within normal parameters. These patients are a challenging group whose sperm cannot fertilize the egg during ICSI. Unfortunately, no test can predict the risk of fertilization failure. Phospholipase C zeta (PLCζ) and transition nuclear proteins (TNPs) are essential factors for chromatin packaging during sperm maturation. This study aimed to assess PLCζ1 and TNP1 expression in the sperm of patients with fertilization failure and the correlations among the DNA fragmentation index, PLCζ1 and TNP1 gene and protein expression, and the risk of fertilization failure. Methods: In this study, 12 infertile couples with low fertilization rates (<25%) and complete failure of fertilization in their prior ICSI cycles despite normal sperm parameters were chosen as the case group. Fifteen individuals who underwent ICSI for the first time served as the control group. After sperm analysis and DNA fragmentation assays, quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) and Western blot analyses were performed to compare the gene and protein expression of PLCζ and TNP1 in both groups. Results: DNA fragmentation was significantly higher in the fertilization failure group. The qRT-PCR and Western blot results demonstrated significantly lower PLCζ and TNP1 gene and protein expression in these patients than in controls. Conclusion: The present study showed that fertilization failure in normozoospermic men was probably due to deficient DNA packaging and expression of TNP1.
The current study was designed to evaluate the effects of the reactive oxygen species (ROS) generated with a xanthine (X) and xanthine oxidase system (XO) on sperm function and DNA fragmentation in porcine spermatozoa. ROS were produced by a combination of $1,000{\mu}M$ X and 50 mU/ml XO. The ROS scavengers such as superoxide dismutase (SOD) (200 U/ml) and catalase (CAT) (500 U/ml) were also tested. Spermatozoa were incubated for 2 hours in BWW medium with a combination of X-XO supplemented with or without antioxidants at $37^{\circ}C$ under 5% $CO_2$ incubator. Ca-ionophore-induced acrosome reaction, the proportion of swollen spermatozoa under hypo-osmotic condition, malondialdehyde formation for the analysis of lipid peroxidation, and the proportion of DNA fragmentation were determined after 2 hours incubation. The action of ROS on porcine spermatozoa resulted in decreased Ca-ionophore-induced acrosome reaction and membrane integrity, increased the formation of malondialdehyde, and the proportion of sperm with DNA fragmentation(p<0.05). The toxic effects caused by ROS were completely alleviated by CAT in terms of sperm function and characteristics, however SOD did not serve the same scavenger effect as CAT. To conclude, the ROS can cause significant damage to porcine sperm functions and characteristics, which can be minimized by the use of antioxidants.
Kim, Sung Woo;Jee, Byung Chul;Kim, Seul Ki;Kim, Seok Hyun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
/
제44권4호
/
pp.201-206
/
2017
Objective: The aim of this study was to compare the efficacy of swim-up and density gradient centrifugation (DGC) for reducing the amount of sperm with fragmented DNA, sex chromosome aneuploidy, and abnormal chromatin structure. Methods: Semen samples were obtained from 18 healthy male partners who attended infertility clinics for infertility investigations and were processed with swim-up and DGC. The percentages of sperm cells with fragmented DNA measured by the sperm chromatin dispersion test, normal sex chromosomes assessed by fluorescence in situ hybridization, and abnormal chromatin structure identified by toluidine blue staining were examined. Results: The percentage of sperm cells with fragmented DNA was significantly lower in the swim-up fraction (9.7%, p= 0.001) than in the unprocessed fraction (27.0%), but not in the DGC fraction (27.8%, p= 0.098). The percentage of sperm cells with normal X or Y chromosomes was comparable in the three fractions. The percentage of sperm cells with abnormal chromatin structure significantly decreased after DGC (from 15.7% to 10.3%, p= 0.002). The swim-up method also tended to reduce the percentage of sperm cells with abnormal chromatin structure, but the difference was not significant (from 15.7% to 11.6%, p= 0.316). Conclusion: The swim-up method is superior for enriching genetically competent sperm.
The objective of this study is to estimate the effect of adding TES to LEY and FGE freezing extender for the sperm viability, acrosomal morphology and DNA fragmentation from miniature pig sperm, we evaluated sperm characteristics in TFGE, TLE and LEY with various thawing condition ($37^{\circ}C$ for 20 sec, 45 sec and $75^{\circ}C$ for 5 sec, respectively), and in different concentration of glycerol at 1%, 1.5%, 3%. The sperm viability and normal acrosome intact(NAI) in TFGE (Viability : $60.3{\pm}2.4$, NAI : $58.6{\pm}2.2%$), TLE ($61.3{\pm}2.4$, $62.2{\pm}2.2%$) extender significantly(p<0.05) increased than that in LEY ($50.2{\pm}2.4$, $54.5{\pm}2.2%$) extender thawed at $75^{\circ}C$ for 5 sec. According to the results from glycerol concentration, the viability and NAI of miniature pig sperm in 1.5% glycerol TLE ($66.1{\pm}3.2$, $66.2{\pm}1.0%$) was highest among the experimental groups. In accordance with this, DNA fragmentation rates was the lowest in TLE ($43.3{\pm}0.5%$) while that in LEY ($63.5{\pm}2.3%$) is the highest. Therefore, these results suggest that TLE extender method for freezing- thawing of miniature pig sperm increased the viability after thawing.
Objective: This study examined whether the addition of triple antioxidants (3A)-10 µM acetyl-L-carnitine, 10 µM N-acetyl-L-cysteine, and 5 µM α-lipoic acid-in freezing-thawing medium during human sperm cryopreservation using the sucrose vitrification (SuV) and liquid nitrogen vapor (Vapor) techniques could improve post-thaw survival of spermatozoa. Methods: We analyzed 30 samples from healthy human sperm donors. Each sample was allocated into one of five groups: fresh control, SuV, SuV+3A, Vapor, and Vapor+3A. The sperm motility, morphology, viability, intracellular and extracellular reactive oxygen species (ROS) levels, and sperm DNA fragmentation (SDF) were evaluated. Results: The cryopreserved spermatozoa had significantly reduced percentages of motility (p<0.05) and viability (p<0.05). Antioxidant supplementation non-significantly improved these parameters (p>0.05). No significant differences were found in sperm morphology between the fresh and frozen-thawed groups (p>0.05). After freezing, the extracellular ROS levels in the frozen-thawed groups were significantly higher (p<0.05) than in the fresh group. However, we did not find any differences in intracellular ROS parameters among these groups (p>0.05). The SDF was higher in the SuV and Vapor groups than in the fresh group, but without statistical significance (p=0.075 and p=0.077, respectively). Conclusion: Cryopreservation had detrimental effects on sperm motility, viability, and extracellular ROS levels, without changing the morphology or intracellular ROS levels. Antioxidant supplementation was slightly effective in preventing SDF in frozen-thawed spermatozoa.
목 적: 인간 정자 핵 내의 DNA integrity는 배아의 발달 및 임신 유지에 중요한 역할을 하여 DNA integrity가 손상된 경우 불임과 유산의 원인이 된다고 하며, 정계정맥류는 DNA 손상을 일으키는 대표적인 원인 중 하나이다. 본 연구에서는 미세술기를 이용한 정계정맥류절제술로 정계정맥류를 교정을 하였을 때 정자 핵 내 DNA integrity가 어떠한 영향을 받는지에 대하여 알아보았다. 연구방법: 2006년 4월부터 2007년 4월까지 불임을 주소로 미세술기를 이용한 정계정맥류절제술을 받았던 18명의 환자에서 수술 전 후에 정액검사의 다른 지표들과 함께 정자 핵 내 DNA integrity가 어떻게 변화하였는지 조사하였다. 정자 핵 내 DNA integrity를 측정하는 방법으로 comet assay를 시행하였고, comet assay를 통한 DNA 손상 정도는 DNA fragmentation index (DFI)로 나타내었다. 결 과: 수술 후 4개월에 모든 환자에서 재발의 소견은 보이지 않았으며, DNA 손상 정도를 나타내는 평균 DFI는 수술 전에 19.3%, 수술 후에 13.7%로 유의한 변화를 보였다. 수술 전 DFI가 10 이상으로 비정상인 14명의 환자들 중 12명 (85%)에서 개선 소견을 보였으나, 수술 전 DFI가 10 미만인 정상 환자 4명에서는 1명 (25%)만이 개선 소견을 보였다. 수술 후 정자의 밀도, 운동성, 생존성에서 호전 양상을 보였으나 유의한 차이는 없었다. 결 론: 미세술기를 이용한 정계정맥류절제술을 통한 수술적 교정은 정액검사상의 다른 지표의 개선 뿐 아니라, 정자 핵 내 DNA 손상을 감소시킬 수 있다. 이상에서 정계정맥류의 수술적 교정으로 정자 핵 내 DNA integrity의 개선을 기대할 수 있으며, 이는 보다 양호한 정자를 많이 얻을 수 있어 자연임신이나 보조 생식술의 성공 가능성을 높일 수 있다는 점을 제시한다.
Septin4 belong to a family of polymerizing GTP-binding proteins that are required for many cellular functions, such as membrane compartmentalization, vesicular trafficking, mitosis, and cytoskeletal remodeling. Since, Septin4 is expressed specifically in the testis, we aimed to determine the association between Septin4 gene expression with sperm quality, DNA damage, and stress oxidative level in infertile patients. The present study included 60 semen samples that grouped into three groups: normozoospermia (n=20), asthenozoospermia (n=20), astheno-teratozoospermia (n=20). Initially, semen parameters were analyzed by using the World Health Organization protocol. The mRNA expression of Septin4 in sperm was examined using reverse transcription-polymerase chain reaction. Oxidative stress markers, i.e., total antioxidant capacity, superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase, and malondialdehyde, were determined by ELISA kit. The current study showed a statistically significant highly positive correlation in Septin4 gene expression with sperm motility, normal morphology, viability, capacity, and sperm mitochondrial membrane potential (MMP). However, it showed significant negative correlation with sperm DNA fragmentation. Septin4 had a significant correlation with stress oxidative factor and antioxidant enzyme levels. In conclusion, Septin4 gene expression provides clinical useful information for the diagnosis of male infertility. It might be a marker for discrimination between fertile and infertile patients. The current study showed a statistically significant highly positive correlation in Septin4 gene expression with sperm motility, normal morphology, viability, capacity, and sperm MMP. However, it shows significant negative correlation with sperm DNA fragmentation. Septin4 had a significant correlation with stress oxidative factor and antioxidant enzyme levels.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.