The acetylation state of histone is reversibly regulated by histone acetyltransferase (HAT) and deacetylase (HDAC). An imbalance of this reaction leads to an aberrant behavior of the cells in morphology, cell cycle, differentiation, and carcinogenesis. Recently, these key enzymes in the gene expression were cloned. They revealed a broad use of this modification, not only in histone, but also other proteins that involved transcription, nuclear transport, and cytoskeleton. These results suggest that HAT/HDAC takes charge of multiple-functions in the cell, not just the gene expression. HDAC is especially known to play an important role in carcinogenesis. The enzyme has been considered a target molecule for cancer therapy. The inhibition of HDAC activity by a specific inhibitor induces growth arrest, differentiation, and apoptosis of transformed or several cancer cells. Some of these inhibitors are in a clinical trial at phase I or phase II. The discovery and development of specific HDAC inhibitors are helpful for cancer therapy, and decipher the molecular mode of action for HDAC.
Background: Liver-expressed antimicrobial peptide-2 (LEAP-2) is an important component of innate immune system in teleosts. In order to understand isoform-specific involvement and regulation of LEAP-2 genes in mud loach (Misgurnus mizolepis, Cypriniformes), a commercially important food fish, this study was aimed to characterize gene structure and expression characteristics of two paralog LEAP-2 isoforms. Results: Mud loach LEAP-2 isoforms (LEAP-2A and LEAP-2B) showed conserved features in the core structure of mature peptides characterized by four Cys residues to form two disulfide bonds. The two paralog isoforms represented a tripartite genomic organization, known as a common structure of vertebrate LEAP-2 genes. Bioinformatic analysis predicted various transcription factor binding motifs in the 5'-flanking regions of mud loach LEAP-2 genes with regard to development and immune response. Mud loach LEAP-2A and LEAP-2B isoforms exhibited different tissue expression patterns and were developmentally regulated. Both isoforms are rapidly modulated toward upregulation during bacterial challenge in an isoform and/or tissue-dependent fashion. Conclusion: Both LEAP-2 isoforms play protective roles not only in embryonic and larval development but also in early immune response to bacterial invasion in mud loach. The regulation pattern of the two isoform genes under basal and stimulated conditions would be isoform-specific, suggestive of a certain degree of functional divergence between isoforms in innate immune system in this species.
Breast cancer susceptibility gene 1 (BRCA1), mapped on chromosome 17q21, is implicated in the mechanisms of cellular DNA repair. Inactivation of this gene is involved in the development of many human cancers, including breast cancer. This study aimed to investigate the prognostic value of BRCA1 promoter hypermethylation and expression in breast cancer cases. Sixty-one breast cancers were examined for BRCA1 hypermethylation by methylation-specific polymerase chain reaction (PCR), and 45 paired normal breast tissues were analyzed for altered BRCA1 mRNA levels by quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (qRT-PCR). Aberrant methylation status in BRCA1 was detected in 15 of 61 cases (24.6%), while reduced expression was found in 7 of 45 (15.6%). BRCA1 hypermethylation was statistically associated with tumor grade III (p=0.04), a high frequency of stage IIB (p=0.02), and triple-negative phenotype (OR= 3.64, 95%CI =1.1-12.3, p=0.03). Our findings indicated that BRCA1 promoter hypermethylation is a useful prognostic marker for breast cancer.
Liver is an organ having an ability to regenerate by itself when it is damaged or removed. Since the research on the liver regeneration so far was regarding on the cellular multiplications not the formation of the shape, we intended to analyze the expression pattern of Hox genes during liver regeneration. RNA samples isolated from liver at the time of partial hepatectomy, 4 hours as well as 3 days later following regeneration were used to perform RT-PCR with Hox-specific degenerate primers. The PCR products were cloned, sequenced and analyzed through BLAST program. Genes belonging to the AbdB type Hox genes (paralogous groups IX-XIII) expressed predominantly during regeneration, while the other group (I-VII), especially Hoxal and bl seemed to be expressed continuously before and after regeneration. These data altogether imply that paralogous group IX and X genes including Hoxa10 and d10 seemed to be regeneration specific genes of liver.
Lee Seong-Hun;Kang Sang-Ho;Park Yong-Hwan;Min Dong-Myung;Kim Young-Mi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.2
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pp.205-211
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2006
A quantitative analytical method to detect new lines of genetically modified (GM) maize, NK603 and TC1507, has been developed by using a real-time polymerase chain reaction (PCR). To detect these GM lines, two specific primer pairs and probes were designed. A plasmid as a reference molecule was constructed from an endogenous DNA sequence of maize, a universal sequence of a cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter used in most GMOs, and each DNA sequence specific to the NK603 and TC1507 lines. For the validation of this method, the test samples of 0, 0.1, 0.5, 1.0, 3.0, 5.0, and 10.0% each of the NK603 and TC1507 GM maize were quantitated. At the 3.0% level, the biases (mean vs. true value) for the NK603 and TC1507 lines were 3.3% and 15.7%, respectively, and their relative standard deviations were 7.2% and 5.5%, respectively. These results indicate that the PCR method developed in this study can be used to quantitatively detect the NK603 and TC1507 lines of GM maize.
The cyclic AMP receptor protein (CRP) homolog, GlxR, controls the expression of several genes involved in the regulation of diverse physiological processes in Corynebacterium glutamicum. In silico analysis has revealed the presence of glxR binding sites upstream of genes ptsG, adhA, and ald, encoding glucose-specific phosphotransferase system protein, alcohol dehydrogenase (ADH), and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH), respectively. However, the involvement of the GlxR-cAMP complex on the expression of these genes has been explored only in vitro. In this study, the expressions of ptsG, adhA, and ald were analyzed in detail using an adenylate cyclase gene (cyaB) deletion mutant and glxR deletion mutant. The specific activities of ADH and ALDH were increased in both the mutants in glucose and glucose plus ethanol media, in contrast to the wild type. In accordance, the promoter activities of adhA and ald were derepressed in the cyaB mutant, indicating that glxR acts as a repressor of adhA. Similarly, both the mutants exhibited derepression of ptsG regardless of the carbon source. These results confirm the involvement of GlxR on the expression of important carbon metabolic genes; adhA, ald, and ptsG.
Many therapeutic glycoproteins have been successfully generated in plants. Plants have advantages regarding practical and economic concerns, and safety of protein production over other existing systems. However, plants are not ideal expression systems for the production of biopharmaceutical proteins, due to the fact that they are incapable of the authentic human N-glycosylation process. The majority of therapeutic proteins are glycoproteins which harbor N-glycans, which are often essential for their stability, folding, and biological activity. Thus, several glyco-engineering strategies have emerged for the tailor-making of N-glycosylation in plants, including glycoprotein subcellular targeting, the inhibition of plant specific glycosyltranferases, or the addition of human specific glycosyltransferases. This article focuses on plant N-glycosylation structure, glycosylation variation in plant cell, plant expression system of glycoproteins, and impact of glycosylation on immunological function. Furthermore, plant glyco-engineering techniques currently being developed to overcome the limitations of plant expression systems in the production of therapeutic glycoproteins will be discussed in this review.
Centrobin/Nip2 was initially identified as a centrosome protein that is critical for centrosome duplication and spindle assembly. In the present study, we determined the expression and subcellular localization of centrobin in selected mouse tissues. Immunoblot analysis revealed that the centrobin-specific band of 100 kDa was detected in all tissues tested but most abundantly in the thymus, spleen and testis. In the testis, centrobin was localized at the centrosomes of spermatocytes and early round spermatids, but no specific signal was detected in late round spermatids and elongated spermatids. Our results also revealed that the centrosome duplication occurs at interphase of the second meiotic division of the mouse male germ cells. The centrobin protein was more abundant in the mitotically active ovarian follicular cells and thymic cortex cells than in non-proliferating corpus luteal cells and thymic medullary cells. The expression pattern of centrobin suggests that the biological functions of centrobin are related to cell proliferation. Consistent with the proposal, we observed reduction of the centrobin levels when NIH3T3 became quiescent in the serum-starved culture conditions. However, a residual amount of centrobin was also detected at the centrosomes of the resting cells, suggesting its role for maintaining integrity of the centrosome, especially of the daughter centriole in the cells.
To study calmodulin (CaM) gene expression and its regulation, rice CaM promoter (RCaM-2) was isolated and fused to $\beta-glucuronidase$ (GUS), reporter gene. X-Glue staining patterns revealed that GUS localization is high in meristemic tissues such as the stem apex, stolen tip, and vascular regions. GUS staining in the transverse sections of stem and petiole was restricted to the inside of the vascular system, and cortex and epidermis located outside of the vascular system usually did not show GUS staining even a plant that expressed strong activity. GUS activity was found to be tissue specific expressed and exhibited a dramatic transient increase in response to wounding. These results suggest that the 5'-flanking region of RCaM gene regulates wound-inducible expression.
Metallothionein (MT) is induced in the regenerating rat liver. We have investigated expression of MT gene by RT PCR as well as specific localization of MT by immunocytochemistry in regenerating rat liver after partial hepatectomy (PH). MT mRNA level started to increase from 1 h and reached the peak at 8 h after PH. The level decreased gradually by 24 h, and became similar to that of control group. In the immunocytochemical study, in all groups treated with primary antibody, immunogold particles indicating the presence of MT were evenly distributed throughout both cytoplasm and nucleus of the rat hepatocytes. Within the nucleus, the gold particles appeared to be intensely localized in the areas of euchromatin and nucleolus. Within the cytoplasm, gold particles did not seem to adhere to mitochondria or Iysosomes, but were freely distributed. However, rough endoplasmic reticulum was the obvious compartment on which the gold particles were localized. Time course of MT immunoreactivity revealed that distribution of gold particles in hepatocytes increased gradually by 24 h, and decreased at 48 h after PH. Briefly, PH resulted in the sharpest increase in the expression of MT mRNA at 8 h and in the immunoreactivity of MT at 24 h, respectively. It is suggested that the increase of MT mRNA expression, the intensity of immunoreactivity and the specific localization of MT may be associated with the compensatory cell proliferation followed by PH.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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