We have previously identified genes for four different protease inhibitors (PIs) that were induced upon rice blast infection in a rice blast resistant mutant SHM-11. Our expression analysis of the PIs indicated that induction of the PIs was the highest 24 hr after rice blast inoculation in the rice mutant SHM-11. Three PIs in the group of serine PIs were highly expressed while a cystein PI was weakly expressed upon rice blast inoculation. Four PIs were weakly induced 48 hr after pathogen inoculation in rice blast susceptible wild type rice plant. The simultaneous expression of three serine PIs was apparent from SHM-11 and two of them were induced in rice blast resistant Taebaegbyeo. One of them was induced in rice blast resistant Hwayeongbyeo while none of them were expressed in rice blast susceptible Nagdongbyeo and rice blast resistant Dongjinbyeo. Our results suggest that the expression of PI gene is rice cultivar specific and may be linked with the rice blast resistance in a specific rice mutant by the simultaneous expression of the PI genes.
Background: The regulation of maternal immunity is critical for the establishment and maintenance of successful pregnancy. Among many cell types regulating the immune system, innate lymphoid cells (ILCs) are known to play an important role in innate immunity. Although some reports show that ILCs are present at the maternalconceptus interface in humans and mice, the expression and function of ILCs in the endometrium have not been studied in pigs. Methods: Thus, we determined the expression, localization, and regulation of ILC markers, CD127 (a common marker for ILCs), BCL11B (a ILC2 marker), and RORC (a ILC3 marker) at the maternal-conceptus interface in pigs. Results: The expression of BCL11B and RORC, but not CD127, in the endometrium changed during pregnancy in a stage-specific manner and the expression of CD127, BCL11B, and RORC was greatest on Day 15 during pregnancy. CD127, BCL11B, and RORC were also expressed in conceptus tissues during early pregnancy and in chorioallantoic tissues during the later stage of pregnancy. BCL11B and RORC proteins were localized to specific cells in endometrial stroma. The expression of CD127 and BCL11B, but not RORC, was increased by the increasing doses of interferon-γ (IFNG) in endometrial explants. Conclusions: These results suggest that ILCs present at the maternal-conceptus interface may play a role in the establishment and maintenance of pregnancy by regulating the innate immunity in pigs.
Techniques used for the regulation of gene expression facilitate studies of gene function and treatment of diseases via gene therapy. Many tools have been developed for the regulation of gene expression in mammalian cells. The Lac operon system induced with isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) is one of the employed inducible systems. IPTG mimics the molecular structure of allolactose and has a strong affinity for the corresponding repressor. IPTG is known to rapidly penetrate into mammalian cells and exhibits low toxicity. In the present study, we developed a new inducible expression system that could regulate the expression of genes in mammalian cells using IPTG. Here we confirm that unlike other vector systems based on the Lac operon, this expression system allows regulation of gene expression with lactose in the mammalian cells upon transfection. The co-treatment with IPTG and lactose could improve the regulatory efficiency of the specific target gene expression. The regulation of gene expression with lactose has several benefits. Lactose is safe in humans as compared to other chemical substances and is easily available, making this technique very cost-effective.
Purpose: This cross-sectional study was designed to identify anger-expression types in late school-age children and to investigate the relation of anger and the anger-expression type to their eating disorders. Method: Two hundred fifty four children in elementary school were recruited from 14 to 25, April, 2008. The data were analyzed by using descriptive statistics, cluster analysis, t-test, ANOVA, and Tukey's multiple comparison test. Result: Three anger-expression types in late school-age children were found; Anger-in/out, Anger-control, and Low anger-expression types. Children frequently using the anger-out/in type among the three types and with a higher trait anger reported higher eating disorders. Particularly trait anger and unhealthy anger expression type were linked to eating disorders. Conclusion: This study suggests that a specific anger management program needs to be developed for late school-age children with high trait anger and frequently using the anger out/in expression type and Anger-control type than low anger-expression types. Further research needs to be done with large samples and discussed in terms of the role of gender in eating disorders.
Objective : Triptolide (TP) has been reported to suppress the expression of mitogen-activated protein kinase (MAPK) phosphatase-1 (MKP-1), of which main function is to inactivate the extracellular signal-regulated kinase-1/2 (ERK-1/2), the p38 MAPK and the c-Jun N-terminal kinase-1/2 (JNK-1/2), and to exert antiproliferative and pro-apoptotic activities. However, the mechanisms underlying antiproliferative and pro-apoptotic activities of TP are not fully understood. The purpose of this study was to examine whether the down-regulation of MKP-1 expression by TP would account for antiproliferative activity of TP in immortalized HT22 hippocampal cells. Methods : MKP-1 expression and MAPK phosphorylation were analyzed by Western blot. Cell proliferation was assessed by $^3H$-thymidine incorporation. Small interfering RNA (siRNA) against MKP-1, vanadate (a phosphatase inhibitor), U0126 (a specific inhibitor for ERK-1/2), SB203580 (a specific inhibitor for p38 MAPK), and SP600125 (a specific inhibitor for JNK-1/2) were employed to evaluate a possible mechanism of antiproliferative action of TP. Results : At its non-cytotoxic dose, TP suppressed MKP-1 expression, reduced cell growth, and induced persistent ERK-1/2 activation. Similar growth inhibition and ERK-1/2 activation were observed when MKP-1 expression was blocked by MKP-1 siRNA and its activity was inhibited by vanadate. The antiproliferative effects of TP, MKP-1 siRNA, and vanadate were significantly abolished by U0126, but not by SB203580 or SP600125. Conclusion : Our findings suggest that TP inhibits the growth of immortalized HT22 hippocampal cells via persistent ERK-1/2 activation by suppressing MKP-1 expression. Additionally, this study provides evidence supporting that MKP-1 may play an important role in regulation of neuronal cell growth.
과산화수소는 치아미백에 널리 사용되는 물질로 과다 사용시 치수세포에 손상을 일으킬 수 있다. 본 연구의 목적은 활성산소인 과산화수소에 의해 유도되는 상아모세포의 단계별 분화와 LOX isoforms과의 관계를 밝히고자 하였다. 치수세포에 분화유도 배지와 과산화수소를 시간과 농도별로 처리한 후 LOX 유전자 발현은 RT-PCR로 측정하였고, LOX enzyme activity는 고감도 형광분석으로 확인하였다. 또한 가장 많은 발현억제를 보인 LOX와 LOXL을 선택하여 siRNA 처리 후 분화표지자의 발현변화와 LOX enzyme activity를 확인하였다. 1. 과산화수소 처리에 따라 LOX, LOXL, LOXL3 mRNA 발현은 농도와 시간 의존적으로 감소하였으나 LOXL2와 LOXL4 mRNA는 변화가 없었다. 2. 과산화수소 처리된 LOX enzyme activity는 0.3 mM과 24시간에서 가장 많은 증가를 보였다. 3. ALP, OPN, OCN의 mRNA 발현은 LOX와 LOXL siRNAs 모두에서 억제되었고, DMP1과 DSPP는 LOX siRNA에서 더 많은 억제 효과를 보였다. 하지만, 분화단계별(초기, 중기, 말기) 차이는 보이지 않았다. 4. LOX와 LOXL siRNAs를 처리하여 LOX enzyme activity를 측정한 결과 LOX siRNA를 처리한 실험군에서 더 많은 억제효과를 보였다. 이러한 결과는 상아모세포 성장과 분화과정에 낮은 농도의 과산화수소가 분화를 유도하고 여기에 LOX가 관련됨을 알 수 있었다. 결론적으로, 과산화수소는 LOX 유전자 발현조절을 통해 치수세포의 성장과 분화에서 중추적인 역할을 할 것이라고 생각된다.
Contact hypersensitivity (CHS) serves as a good model of cell-mediated reaction. Epidermal langerhans cell (LC) are thought to playa crucial role in the regulation of immune reaction of the skin, which elicit the CHS response by presenting Antigen to trafficking Ag-specific T cells within the skin. However, contact hypersensitivity is regarded as a negative side of immunities, caused by increased damaging immune response. Therefore, the study of effector molecule causing immune suppression is thought to be meaningful in the skin immune response. For this aim, this study investigated the influence of pedunculagin on cytokine, IL-$\beta$ expression from langerhans cell (LC). In vitro and in vivo, pedunculagin up-regulated the expression of IL-1$\beta$ mRNA. After PMA stimulation in vitro and DNFB sensitization in vivo, the expression of IL-1$\beta$ mRNA was down-regulated. This results suggested that pedunculagin could be immuno-modulator in skin immune system by modulating IL-1$\beta$ expression.
To determine the effect of ERp57 expression on thrombopoiein (TPO) productivity in recombinant Chinese hamster ovary (rCHO) cells, TPO producing rCHO cell line with doxycycline-regulated ERp57 expression \Vas developed. The Erp57 expression level could be regulated by addition of different concentrations of doxycycline to culture medium. The doxycycline concentration of I ${\mu}g/mL$ was high enough to suppress the ERp57 expression. Up to 5 ${\mu}g/mL$ doxycycline concentration used in culture medium, no observable cytotoxic effect of doxycycline was detected during culture. Overexpression of ERp57 、 vas found to increase the specific TPO productivity ($q_{Tpo}$) without growth inhibition, probably due to the chaperone-like activity of ERp57 in CHO cells.
The rapid progress of molecular genetic methods over the past two decades has necessitated the development of methods to detect and quantify genetic activity within living bodies. Reporter genes provide a rapid and convenient tool to monitor gene expression by yielding a readily measurable phenotype upon expression when introduced into a biological system. Conventional reporter systems, however, are limited in their usefulness for in vivo experiments or human gene therapy because of its invasive nature which requires cell damage before assays can be performed. This offers an unique opportunity for nuclear imaging techniques to develope a novel method for imaging both the location and amount of gene expression noninvasively. Current developments to achieve this goal rely on utilizing either reporter enzymes that accumulate radiolabeled substrates or reporter receptors that bind specific radioligands. This overview includes a brief introduction to the background for such research, a summary of published results, and an outlook for future directions.
Three types of sludges including printing paper, newsprint and tissue paper were prepared at 5% concentration for filtration-expression operations. Filtration-expression characteristics of sludge were measured in different pressure and wastepaper powder dosage. Specific filtration resistance and porosity were calculated with theoretical formula. Higher pressure increased the progresses of filtration and expression while it decreased porosity. The addition of 5% wastepaper powder more accelerated the progresses of filtration and expression than that of 10% wastepaper powder. The lowest porosity value was also measured at 5% dosage of wastepaper powder. The decrease of porosity implied the decrease of moisture content in cake. The results indicated that dewatering of sludge was efficient in high pressure and 5% dosage of wastepaper powder.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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