Communications for Statistical Applications and Methods
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v.22
no.2
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pp.181-199
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2015
In a short history, RNA-seq data have established a revolutionary tool to directly decode various scenarios occurring on whole genome-wide expression profiles in regards with differential expression at gene, transcript, isoform, and exon specific quantification, genetic and genomic mutations, and etc. RNA-seq technique has been rapidly replacing arrays with seq-based platform experimental settings by revealing a couple of advantages such as identification of alternative splicing and allelic specific expression. The remarkable characteristics of high-throughput large-scale expression profile in RNA-seq are lied on expression levels of read counts, structure of correlated samples and genes, larger number of genes compared to sample size, different sampling rates, inevitable systematic RNA-seq biases, and etc. In this study, we will comprehensively review how robust Bayesian and non-parametric methods have a better performance than classical statistical approaches by explicitly incorporating such intrinsic RNA-seq specific features with flexible and more appropriate assumptions and distributions in practice.
Heptocvte-specific expression induced by Hepatitis B virus (HBV) enhancer 2-core gene promoter was examined in various hepatocyte and non-hepatocyte cell lines. using non-viral and retroviral vector systems in which chloramphenicol acetyltransferase (CAT) is used as a reporter. The non-viral plasmid containing the HBV enhancer 2-core promoter exhibited 22 and 66% of CAT activities in hepatoma cell lines. HepG2 and Hep3B, respectively when compared with CAT activity expressed by CMV promoter. The CAT activities, however. were found to be marginal in other tested hepatoma cell lines as well as mouse primary hepatocytes and non-hepatocytes. The HBV enhancer 2 located upstream the CMV promoter did not affect the CMV promoter activity nor provided hepatocyte-specific expression. Transfection of retroviral plasmid DNA containing the HBV enhancer 2-core promoter as an internal promoter exhibited high and specific CAT expression in HepG2 and Hep3B cell lines but the activity value was 5 to 10 fold lower than the non-viral plasmid with identical promoter. These results suggest that the usage of HBV enhancer 2-core promoter for liver specific expression is limited to certain vectors and hepatocyte cell lines.
This study is a understanding on technological specific expression to reflect of a research institute in modern architecture. For this study, it separately reduce space program, plan program, design elements of elevation, structural system, mechanical system, building material program to its expressional elements of research institute. Also, it's arranged about a specificity that is expressed for technology each plan elements of a research institute. As a result, elements what is expressive of technology on research institute are influenced an aesthetic expression, expression of an arrangement system, structural expression, expression of architectural organization, and it influences more getting feels technological specificity expressed an aesthetic, structural system, architectural composition, mechanical distribution system in order of their magnitude. This is offered suggestion what must be an achievable complex both a simply technological expression and aesthetic expression.
Effectiveness of transgene transfer into genome is crucially concerned in mass production of the bio-pharmaceuticals using genetically modified transgenic animals as a bioreactor. Recently, the mammary gland has been considered as a potential bioreactor for the mass production of the bio-pharmaceuticals, which appears to be capable of appropriate post-translational modifications of recombinant proteins. The mammary gland tissue specific vector system may be helpful in solving serious physiological disturbance problems which have been a major obstacle in successful production of transgenic animals. In this study, to minimize physiological disturbance caused by constitutive over-expression of the exogenous gene, we constructed new retrovirus vector system designed for mammary gland-specific expression of the hEPO gene. Using piggyBac vector system, we designed to express hEPO gene under the control of mammary gland tissue specific and lactogenic hormonal inducible goat ${\beta}$-casein or mouse Whey Acidic Protein (mWAP) promoter. Inducible expression of the hEPO gene was confirmed using RT-PCR and ELISA in the mouse mammary gland cells treated with lactogenic hormone. We expect the vector system may optimize production efficiency of transgenic animal and reduce the risk of global expression of transgene.
Proceedings of the Zoological Society Korea Conference
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1995.10b
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pp.82-82
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1995
Regulation of enzyme synthesis by transcriptional and translational control systems provides rather stable adaptation to change of amino acid level in the growth medium, while manipulation of enzyme activity through endproduct feedback inhibition represents rather short-term and reversible ways of adjusting metabolic fluctuation of amino acid level. Various control mechanisms interplay to regulate genes encoding enzymes for amino acid biosynthesis in the yeast, Sacchromyces cerevisiae. When amino acids are in short supply, genes under a cross-pathway regulatory mechanism Or general amino acid control (general control) increase their action, in which Gcn4p is the major positive regulator of gene expression. When cells are cultured in minimal medium, basal level expression is also regulated by supplementary control elements, where inorganic phosphate level is additionally involved. Most of amino acid biosynthetic genes are also regulated by the level of endproduct of the pathway. This pathway-specific regulatory mechanism is called specific amino acid control (specific controD, under which gene expression is reduced when endproduct is present in the medium. Derepression of a gene through general control can be usually overridden by repression through specific control, where the endproduct level of that particular pathway is high and not limiting. In this presentation, regulatory factors for basal level expression and general control of yeast amino acid biosynthesis will be discussed, m addition to pathway-specific repression patterns and interaction between CrOSS- and specific-control mechanisms. Preliminary results are also presented from the investigation of the cloned genes in the threonine biosynthetic pathway of the yeast. yeast.
Lee, Ji Yun;Lee, Yu Mi;Kim, Mi Jin;Choi, Je Yong;Park, Eui Kyun;Kim, Shin Yoon;Lee, Sam Poong;Yang, Jae Sup;Kim, Dong Sun
Molecules and Cells
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v.22
no.2
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pp.182-188
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2006
Dlx5 and Osx are master regulatory proteins essential for initiating the cascade leading to osteoblast differentiation in mammals, but the mechanism of osteoblast-specific expression is not fully understood. DNA methylation at CpG sequences is involved in tissue and cell type-specific gene expression. We investigated the methylation status of Dlx5 and Osx in osteogenic and nonosteogenic cell lines by methylationspecific PCR (MSP). The CpG dinucleotides of the Dlx5 and Osx promoter regions were unmethylated in osteogenic cell lines transcribing these genes but methylated in nonosteogenic cell lines. Treatment of C2C12 cells with 5-AzadC induced dose- and timedependent expression of Dlx5 and Osx mRNA by demethylating the corresponding promoters. Furthermore the mRNAs for the osteoblast markers ALP and OC, which were undetectable in untreated cells, gradually increased after 5-AzadC treatment. In addition, BMP-2 stimulation induced Dlx5 expression by hypomethylating its promoter. These findings suggest that DNA methylation plays an important role in cell type-specific expression of Dlx5 and Osx.
Bulked segregant analysis (BSA) and AFLP were used for isolation of genomic sex determination markers in Penaeus monodon. A total of 256 primer combinations were tested against 6-10 bulked genomic DNA of P. monodon. Five and one candidate female- and male-specific AFLP fragments were identified. Female-specific fragments were cloned and further characterized. SCAR markers derived from FE10M9520, FE10M10725.1, FE10M10725.2 and FE14M16340 provided the positive amplification product in both male and female P. monodon. Further analysis of these markers using SSCP and genome walk analysis indicated that they were not sex-linked. In addition, sex-specific (or differential) expression markers in ovaries and testes of P. monodon were analyzed by RAP-PCR (150 primer combinations). Twenty-one and fourteen RAP-PCR fragments specifically/differentially expressed in ovaries and testes of P. monodon were successfully cloned and sequenced. Expression patterns of 25 transcripts were tested against the first stranded cDNA of ovaries and testes of 3-month-old and broodstock-sized P. monodon (N = 5 and N = 7 - 10 for females and N = 4 and N = 5 - 7 for males, respectively). Five (FI-4, FI-44, FIII-4, FIII-39 and FIII-58) and two (M457-A01 and MII-51) derived RAP-PCR markers revealed female- and male-specific expression patterns in P. monodon. Surprisingly, MII-5 originally found in testes showed a higher expression level in ovaries than did testes of juvenile shrimps but a temporal female-specific pattern in P. monodon adults.
Controlled gene expression in specific cells is a valuable tool for gene therapy. We attempted to determine whether the lentivirus-mediated Tet-On inducible system could be applied to cancer gene therapy. In order to select the genes that induce cancer cell death, we compared the ability of the known pro-apoptotreic genes, Bax and tBid, and a cell cycle inhibitor, p21cip1/waf1, and determined that Bax was the most effective. For the cancer cell-specific expression of $rtTA2^S$-M2, we tested the matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) promoter and determined that it is highly expressed in cancer cell lines, including SNU475 cells. The co-transduction of two lentiviruses that contain sequences for TRE-Bax and $rtTA2^S$-M2, the expression of which is controlled by the MMP-2 promoter, resulted in the specific cell death of SNU475, whereas other cells with low MMP-2 expression did not evidence significant cell death. Our data indicate that the lentivirus-mediated Tet-On system using the cancer-specific promoter is applicable for cancer gene therapy.
Park, Seung-Won;Goo, Tae-Won;Kim, Seong-Ryul;Kang, Seok-Woo
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.23
no.1
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pp.137-141
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2011
A previous data was provided information for tissuespecific expression genes by means of whole-genome oligonucleotide microarray in the silkworm. We analyzed the tissue-specific expression patterns in the hemocyte tissue on 5 days of 5th instar larvae during the development of $B.$$mori$. Total 5 candidates pick out from the $Bombyx$$mori$ Microarray Database (BmMDB; http://silkworm.swu.edu.cn/microarray). To verify the hemocyte-specific expression, we analyzed by semi-quantitative and real-time quantitative RT-PCR using the highly expressed endogenous $Actin$ RNA as an intrinsic reference. In this study, we confirmed that one gene-sw17255- out of 5 candidates expressed in the hemocyte tissue, which was consistent with the previous data. Circulating hemocytes in the body fluid of the $B.$$mori$ are most powerful target organ for producing biomaterials. We need further studies to find hemocyte-specific promoter region from sw17255 gene. Finally, this result can be applied in creating transgenic silkworms as a biomedical insect.
Tissue-specific expression of the desired gene product in the targrt tissue is central to the concept of bioreactor. One approach is to use a tissue-specific promoter to drive desired gene. To investigate the feasibility of tissue-specific gene expression for bladder using the porcine uroplakin(UPII) promoter and its transcriptional control the efficacy of this promoter as well as well as fragments in regulating gene expression were cell lines using DNA transfection. (omitted)
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