Trichoderma harzianum ZF-2 producing laccase was isolated from decaying samples from Shandong, China, and showed dye decolorization activities. The objective of this study was to optimize its culture conditions using a statistical analysis of its laccase production. The interactions between different fermentation parameters for laccase production were characterized using a Plackett-Burman design and the response surface methodology. The different media components were initially optimized using the conventional one-factor-at-a-time method and an orthogonal test design, and a Plackett-Burman experiment was then performed to evaluate the effects on laccase production. Wheat straw powder, soybean meal, and $CuSO_4$ were all found to have a significant influence on laccase production, and the optimal concentrations of these three factors were then sequentially investigated using the response surface methodology with a central composite design. The resulting optimal medium components for laccase production were determined as follows: wheat straw powder 7.63 g/l, soybean meal 23.07 g/l, $(NH_4)_2SO_4$ 1 g/l, $CuSO_4$ 0.51 g/l, Tween-20 1 g/l, $MgSO_4$ 1 g/l, and $KH_2PO_4$ 0.6 g/l. Using this optimized fermentation method, the yield of laccase was increased 59.68 times to 67.258 U/ml compared with the laccase production with an unoptimized medium. This is the first report on the statistical optimization of laccase production by Trichoderma harzianum ZF-2.
To improve the productivity of Pleurotus ostreatus, different conditions of liquid spawn culture were tested. The optimum culture conditions were potato dextrose broth, incubation temperature of $22^{\circ}C$, and pH 6. Fifteen different media ('A' to 'O') containing 0.3% soybean meal (SM) were prepared by varying sugar and glucose contents. The cultures were propagated in SM media for 14 days, at $22^{\circ}C$, and pH 6. Their absorbances were higher after 14 days of incubation in the media containing both sugar and glucose. In particular, the absorbance of media containing 5 to 20% of glucose alone ('C', 'D', 'E', and 'F') tended to increase in the incubation period. Dry cell weight was lower in media containing less than 20% sugar or glucose alone than in media containing 30% sugar ('A') or 30% glucose ('B') alone. In sawdust media, in 900 mL-bottle, the optimum inoculation volume of liquid spawn was 15 to 20 mL. The texture of the mushroom cultivated with the liquid spawn was superior to that cultivated in the solid spawn.
Objective: The objective of this study was to investigate effects of supplementation of culture media from solid-state fermented Isaria cicadae (I. cicadae) on performance, serum biochemical parameters, serum immune indexes, antioxidant capacity and meat quality of broiler chickens. Methods: A total of 648 Arbor Acres male broiler chickens(1 d; average body weight, 42.93±0.47 g) were randomly assigned to 6 treatments, each with six replicates and 18 broiler chickens per replicate. Broiler chickens were fed phase I (d 1 to 21) and phase II (d 22 to 42) diets. The phase I diets were corn and soybean-meal based diets supplemented with 0%, 2%, 4%, 6%, 8%, or 10% culture media from solid-state fermented I. cicadae respectively. The phase II diets were corn and soybean-meal based diets supplemented with 0%, 1.33%, 2.67%, 4.00%, 5.32%, or 6.67% culture media from solid-state fermented I. cicadae respectively. Results: In phase I, the broiler chickens with the supplementation of culture media had increased body weight gain and feed intake (linear and quadratic, p<0.05) with increasing inclusion of culture media. The levels of serum total antioxidant capacity (T-AOC), glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) increased linearly (p<0.05). In phase II, levels of serum T-AOC and interleukin-1β increased linearly (p<0.05), and GSH increased (p<0.05). In the kidney, GSH and glutathione peroxidase (GSH-Px) concentrations increased (linear and quadratic, p<0.05) and SOD concentration increased linearly (p<0.05). Compared to the control, shear force and drip loss of breast muscle decreased (linear and quadratic, p<0.05). Drip loss of leg muscle decreased linearly and quadratically (p<0.05). Conclusion: Dietary supplementation of culture media from solid-state fermented I.cicadae which was enriched in both wheat and residual bioactive components of I. cicadae enhanced the growth performance of broiler chickens. It also improved body anti-oxidative status and contributed to improve broiler meat quality.
Media optimization for the production of MR-387A and B, novel aminopeptidase M inhibitors by Streptomyces sp. SL-387 isolated from a soil was studied. Optimized medium was consisted of 1% glucose, 3% soybean meal, 0.2% yeast extract, 0.1% beef extract, 0.3% NaCl, 0.01% $K_2HPO_4$, 0.3% $CaCO_3$, 0.001% $MnCl_2{\cdot}4H_2O$, 0.001% $ZnCl_2{\cdot}7H_2O$, and 0.0005% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and adjusted to pH 7.0 before autoclaving. When the optimized medium was used as a fermentation medium, maximum productivity of MR-387 was reached at 120 hours of fermentation, and total productivity was 909.1 U/ml.
1. Amylase producing bacteria have been isolated from natural sources and was identified out. The above strain is identical to Bacillus subtillis in every details of physiological and morphorogical characteristics by this investigations. 2. Sikworm chrysalis nad chlorella extracts are prove to be further effective for the stimulation of amylase production than any other sources. The former silkworm extract is more stronger in its activity. 3. It is found that effective results had been accepted by a less soybean meal addition per that of wheat bran in the mixture ratio of them, also less addition of corn is needed in the mixture ratio of between corn and whear bran. In the mixing ratio of wheat bran per silkworm or chlorella extracts, the addition of wheat bran is necessary for stimulation of amylase production. 4. Fro the stimulation of amylase production, the effective substances from natural sources and its order of activity in cultral media cultral media is proved as follows, silkworms ext.>chlorella ext.>alcohol>skim-milk and peptone>fermented milk>radish leaf ext.
Lentinula edodes liquid spawn growth under explosive aeration (supplying air with tiny bubbles) and soybean meal addition to liquid culture medium were investigated in terms of mycelial growth and residual free sugar content. The two treatments were effective for homogeneous culturing of mycelial spawn and for separating colonies during multiplication after an exponential growth period without limiting sustaining nitrogen nutrients. The mycelial growth and carbon dioxide concentration were greatest on the 13th day since the inoculation. At 12th day, however, free sugars were almost depleted in the upper part of the liquid medium. Total nitrogen content within precipitated mycelia was the highest at the 13th day. Chitin and sucrose contents in the mycelia were the highest at the 18th day, but ergosterol content became highest at 22 days. These results suggest that Lentinula edodes liquid spawn is ready in 18 days after inoculation.
Keratinase is widely used in certain industrial applications. The present study sought to improve the culture conditions of Bacillus subtilis SMMJ-2 to facilitate mass production of keratinase. Strain SMMJ-2 was irradiated by ultraviolet light and the resulting isolates were tested for keratinase activity. Isolates displaying elevated keratinase activity were selected and used to determine the optimum temperature (24, 30, 37, 45, $55^{\circ}C$) for bacterial keratinase production during a 4 day incubation period. The highest enzyme activity (55 units/mL/min), from a Bacillus subtilis SMMJ-2 mutant (mutant No. 2) was demonstrated following incubation at $30^{\circ}C$. The effects of carbon and nitrogen sources on keratinase production were confirmed by measuring the enzyme activity from the culture broth of the mutant strain cultured in various media containing different carbon source and nitrogen sources during a 4 day period. The optimal medium composition for producing keratinase consisted of 1% glucose, 0.7% $K_2HPO_4$, 0.2% $K_2HPO_4$, and 1.2% soybean meal. Optimal initial pH and temperature for producing keratinase were 7.0 and $30^{\circ}C$, respectively. Keratinases produced by B. subtilis SMMJ-2 and the mutant No. 2 were purified from the culture broth which used soybean meal as a nitrogen source. Membrane ultrafiltration, DEAE-sephacel ion exchange and Sephadex G-100 gel chromatography were used to purify the enzymes. The purified keratinases from both B. subtilis SMMJ-2 and the mutant No. 2 showed single bands and their molecular weights were estimated as 28 kDa and 42 kDa, respectively on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis.
Park, Seong-Wan;Yoon, Young-Bae;Wang, Hee-Sung;Kim, Young-Kee
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.54
no.4
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pp.252-257
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2011
To remove excess nitrate from the agricultural environments, Enterobacter amnigenus GG0461 has been isolated as a bacterial strain having high capability of nitrate uptake activity. This strain was able to remove nitrate more than 3,000 ppm (50 mM) in the Pseudomonas agar F (PAF) medium. Therefore, it could be a candidate strain for a nitrate scavenger in the various contaminated environments, such as agricultural soils, livestock sewage, and industrial wastewater. In order to develop medium for the large-scale production of the strain GG0461, each component of PAF medium was replaced with the corresponding commercial product and the optimal conditions for bacterial growth and nitrate uptake activity were measured. Glycerol was replaced with the commercially available product and the nitrogen source was substituted with commercial tryptone, yeast extract, soybean meal, and fermented fish extract. Bacterial growth and nitrate uptake activity were maximal in the media containing 2% tryptone, followed by yeast extract, soybean meal, and fermented fish extract. The pH of the growth medium containing 2% tryptone was decreased by the bacterial nitrate uptake, suggesting that the nitrate uptake is mediated by a nitrate/proton antiporter. This result shows that the medium containing commercial tryptone was good enough for the physiological activity of the strain GG0461. Each component of PAF medium was successfully replaced with the corresponding commercial product except peptone. In conclusion, the composition of medium for the cultivation of the strain GG0461 was determined as 2% tryptone, 1% glycerol, plus required salts according to the composition of PAF medium.
Media optimization for the production of thermostable protease specifically hydrolyzing defatted soybean meal (DSM) from Bacillus licheniformis NS70 was performed by two methods, one-at-a-time method and response surface methodology (RSM). The best carbon source and nitrogen source for the protease production were lactose and DSM, respectively. The maximum protease production estimated by RSM was 606 U/L at 1.11% lactose and 0.43% DSM, the value of which was nearly consistent to the experimental value of 599 U/L. Yeast extract suppressed the protease production. The medium pH was slightly increased at the beginning stage of fermentation, and it tended to decrease after 8 hours. The optimal pH for the protease production was 7.2 in the batch fermentation.
To improve the productivity of shiitake mushroom (Lentinula edodes), seven different types of media for liquid spawn (denoted as "A" to "G") were prepared with 0.3% soybean meal and varying sugar and glucose concentrations. During 14 days of incubation, the pH of the liquid culture gradually acidified with increasing incubation period. Additionally, there was a significant, but not prominent, difference in the degree of acidification depending on the sugar to glucose ratio. Liquid spawn culture "G," which had the highest sugar content was the most acidic on the last day of incubation. Mycelium dry weight increased significantly with increasing incubation period, and there was no significant difference in mycelium dry weight irrespective of the sugar to glucose ratio even after 14 days of culture. The inoculation of liquid spawn in sawdust medium with an inoculation volume ${\geq}45mL$ and incubation period of 15 to 18 days were the optimal culture conditions. Productivity of fruit bodies in sawdust medium and mushrooms treated with liquid spawn was significantly higher compared to solid spawn treatment. The mushrooms treated with liquid spawn had better chewiness, and the free amino acid content, which is associated with savory taste, was higher in these mushrooms compared to those treated with solid spawn.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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