The optimal condition for the production of a glucan and a fructan synthesizing enzymes from Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1149 were studied based on the different medium compositions. Response surface methodology was applied to find the optimistic condition showing the relationship between the fermentation response (enzyme activities) and the fermentation variable concentrations of yeast extract, peptone concentration, K2HP04 concentration and sucrose. Optimum medium composition for both enzymes production was $0.75\%$ yeast extract, $0.72\%$ peptone, $1\%$ K2HP04 and $2.17\%$ sucrose. Using this medium, the activities produced in culture was 0.90 U/m~ for glucosyltransferase (GTase) and 0.96 U/ml for fructosyltransferase (FTase). After purification of 1149FTase by consecutive chromatographies using Sephadex G-150 and DEAE-Sepharose, a 1149FTase of 210 kDa on $7\%$ polyacrylamide gel was isolated and it synthesized soluble fructan. The 1149GTase showed a band of 180 kDa on $8\%$ polyacrylamide gel after purification using Bio-Gel P-100 gel chromatography and DEAE-Sepharose ion exchange chromatography and it synthesized insoluble glucan. The linkages of polymers were determined by methylation using Hakomori reagent and following NMR analysis. The glucan was composed of a(1~6) and a(1~3) linkages and the fructan was levan.
Four isoforms of calcium binding proteins containing 2 EF hand motifs and a dynein light chain-like domain in the human liver fluke Opisthorchis viverrini, namely OvCaBP1, 2, 3, and 4, were characterized. They had molecular weights of 22.7, 21.6, 23.7, and 22.5 kDa, respectively and showed 37.2-42.1% sequence identity to CaBP22.8 of O. viverrini. All were detected in 2- and 4-week-old immature and mature parasites. Additionally, OvCaBP4 was found in newly excysted juveniles. Polyclonal antibodies against each isoform were generated to detect the native proteins in parasite extracts by Western blot analysis. All OvCaBPs were detected in soluble and insoluble crude worm extracts and in the excretory-secretory product, at approximate sizes of 21-23 kDa. The ion-binding properties of the proteins were analyzed by mobility shift assays with the divalent cations $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$, $Zn^{2+}$, and $Cu^{2+}$. All OvCaBPs showed mobility shifts with $Ca^{2+}$ and $Zn^{2+}$. OvCaBP1 showed also positive results with $Mg^{2+}$ and $Cu^{2+}$. As tegumental proteins, OvCaBP1, 2, and 3 are interesting drug targets for the treatment of opisthorchiasis.
콩 단백질은 글리시닌과 $\beta$-콘글리시닌을 주요 성분으로 한다. 영양성 및 가공 특성을 개선하기 위하여 유전자공학적인 방법을 시도하였다. 즉 $\beta$-콘글리시닌의 $\beta$-서브유니트를 유전자 클로닝하고 대장균에서 발현시켰다. 발현벡타는 pET 21d이며 플라스미드를 구축하여 E. coli BL21(DE3)에 형질전환 시켰다. 발현된 단백질은 균체 전체 단백질의 20%이며 가용화 상태로 축적되었다. 축적 발현단백질은 천연의 $\beta$-콘글리시닌과 동일항 트리머로 확인되었다. 정제는 황산암모늄 20~40% 분별침전, Q-Sepharose 이온교환크로마토그라피, Butyltoyopearl 소수성 컬럼크로마토그라피로 하였다. 이것은 콩 단백질의 특성을 규명하는데 필요한 대장균 대량 발현계를 확립하고 발현 단백질의 정제방법을 확립한 결과이다.
Uraniferous black slates of the Okchon sequence occur in Koesan (northeast) through Miwon-Boun (middle) to the southwest off Taejon (southwest) within the Okchon fold belt. The Uraniferous balck slates in the southwest off Taejon are particularly well developed in Chubu (northeast) and Moksso-ri (middle) areas whereas they are less developed in Jinsan (southwest) area. The uraniferous beds range from less than a meter to 40 meters in thickness and range from less than 0.02% $U_3O_8$ (cut-off-grade) to 0.05% $U_3O_8$ in the southwestern district off Taejon. Electron microprobe analysis of uranium-minerals found in graphitic slate samples enables to estimate their major compositions semi-quantitatively so that uraninite, ferro-uranophane and chlopinite are tentatively identified. Uranium-minerals are closely associated with carbon and metal sulfides. Correlation analysis of trace element concentrations revealed that U and F.C., and U and Mo are lineary correlative respectively and their correlation coefficients are positively high whereas those of U and V, U and Mn, and U and Zr are negatively low, implying that uranium mineralization has been closely related with concentrations of carbon and molybdenum. Stable isotope analyses of pyrite sulfur range widely from +11.5% to -23.3% in ${\delta}^{34}S$ values whereas those of graphite carbon fall within a narrow range between -23.3% and -28.9% in ${\delta}^{13}C$ values. The wide range of ${\delta}^{34}S$ values suggests that the sulfur could be of meteoric origin rather than of igneous source. The narrow range of ${\delta}^{13}C$ values, which are close to those of coal, indicates that the graphite is organic carbon in origin. Therefore, it is concluded that the uranium mineralization in the Okchon sequence took place primarily in sedimentary environment rich in organic matter and sulfide ion, both of which served as the reducing agents to convert soluble uranyl complex to insoluble uranium dioxide.
Pellicularia sasakii의 생육을 저해하는 한 균주를 토양으로부터 분리하였으며 Pseudomonas aeruginosa 3120으로 동정하였다. P. aeruginosa 3120의 배양액으로부터 분리 정제된 암갈색의 MRL3120 항생물질은 ethylacetate, chloroform 및 methanol에 용해되었으며 곰팡이뿐만 아니라 gram 양성 및 음성세균에도 활성을 나타내었다. UV, IR, EI-MS spectra 및 다른 물리화학적 특성의 분석결과로부터 MRL3120은 2개의 N-methyl-N-thioformylhydroxylamine과 1개의 Cu 이온으로 구성된 chelate 화합물로서 fluopsin C와 유사한 구조를 가진 것으로 추정되었다. Soybean meal을 포함하는 발효배지에 $CuSO_4$의 첨가는 항진균 활성을 증가시켰으나 EDTA(0.1%)의 존재하에서는 활성이 없었다. Soybean meal 대신 soytone을 포함하는 발효배지에서 MRL3120은 생산되지 않았지만 $CuSO_4$의 첨가에 의해 빠르게 생산되었다.
Three types of xylanases (EC 3.2.1.8) were detected in the strain Aspergillus niger A-25, one of which, designated as XynIII, also displayed ${\beta}-(l,3-1,4)-glucanase$ (EC 3.2.1.73) activity, as determined by a zymogram analysis. XynIII was purified by ultrafiltration and ion-exchange chromatography methods. Its apparent molecular weight was about 27.9 kDa, as estimated by SDS-PAGE. The purified XynIII could hydrolyze birchwood xylan, oat spelt xylan, lichenin, and barley ${\beta}-glucan$, but not CMC, avicel cellulose, or soluble starch under the assay conditions in this study. The xylanase and ${\beta}-(l,3-1,4)-glucanase$ activities of XynIII both had a similar optimal pH and pH stability, as well as a similar optimal temperature and temperature stability. Moreover, the effects of metal ions on the two enzymatic activities were also similar. The overall hydrolytic rates of XynIII in different mixtures of xylan and lichenin coincided with those calculated using the Michaelis-Menten model when assuming the two substrates were competing for the same active site in the enzyme. Accordingly, the results indicated that XynIII is a novel bifunctional enzyme and its xylanase and ${\beta}-(l,3-1,4)-glucanase$ activities are catalyzed by the same active center.
토양에서 분리된 Alkaline Protease생산균주는 Bacills subtilis로 동정되었다. 본 균주의 최적배양온도는 최적 배지조건에서 $35^{\circ}C$이며, 초기 배지 pH는 10.5였다. 효소역가는 Casein-Folin법으로 약 2,300 Unit/ml로 나타났다. 배양액에 일련의 정제과정을 실시한 결과 정제배수 9.2, 회수율 14%의 정제효소를 얻었으며, 분자량은 19,000이었다. 정제효소의 반응최적온도는 $70^{\circ}C$, 최적 PH는 12였다. $Fe^{++}$에 의해 활성이 저하되었으며, 또한 serine protease inhibitor인 PMSF에 의해 활성이 저해되었다. 이것으로 부터 본 효소는 활성부위에 serine을 갖는 serine protease의 일종임을 알 수 있었다.
The water uptake by fine aerosol in the atmosphere has been investigated at Gosan, Korea during ABC-EAREX 2005. The concentration of inorganic ion and carbon components, size distribution, and light scattering coefficients in normal and dry conditions were simultaneously measured for $PM_{2.5}$ by using a parallel integrated monitoring system. The result of this study shows that ambient fine particles collected at Gosan were dominated by water-soluble ionic species (35%) and carbonaceous materials (18%). In addition, it shows the large growth of aerosol in the droplet mode when RH is higher than 70%. Size distribution of the particulate surface area in a wider size range ($0.07-17{\mu}m$) shows that the elevation of RH make ambient aerosol grow to be the droplet mode one around $0.6{\mu}m$ or the coarse mode one, larger than $2.5{\mu}m$. Hygroscopic factor data calculated from the ratio of aerosol scattering coefficients at a given ambient RH and a reference RH (25%) show that water uptake began at the intermediate RH range, from 40% to 60%, with the average hygroscopic factor of 1.10 for 40% RH, 1.11 for 50% RH, and 1.17 for 60% RH, respectively. Finally, average chemical composition and the corresponding growth curves were analyzed in order to investigate the relationship between carbonaceous material fraction and hygroscopicity. As a result, the aerosol growth curve shows that inorganic salts such as sulphate and nitrate as well as carbonaceous materials including OC largely contribute to the aerosol water uptake.
산업구조의 변화와 더불어 많은 수의 휴ㆍ폐광산이 생김에 따라 그에 따른 환경오염 문제가 발생되고 있다. 특히 주로 황철광에서 생성된 폐수의 중금속 이온과 낮은 pH는 생태계를 파괴하는 피해를 입힌다. 따라서 산성광산폐수의 처리를 위한 많은 방법들이 연구되고 개발되고 있다. 본 연구에서는 산성광산 폐수의 생물학적 처리에서 사용되는 4가지 유기물원들의 중금속 처리 능력을 비교 분석하였다. 버섯퇴비, 참나무 퇴비, 슬러지 cake, 우분의 4가지 유기물원 중 산성 광산 폐수의 처리에 효과가 있는 것은 참나무 퇴비와 우분이었다. 참나무 퇴비는 주로 이온 교환이나 -OH와 -COO-등의 작용기에 의한 흡착에 의해서 중금속을 처리하였으며, 우분을 사용한 경우는 자체 내에 존재하고 있는 황산염환원균의 활성에 의해서 중금속을 처리하였다. 따라서 이 두 가지 유기물원을 혼합하여 사용한다면 상호 보완 작용에 의해 효과적인 처리 효율을 얻을 수 있을 것이다.
Hot water-soluble crude polysaccharide (HCAP-0) that was obtained from the fruits of Capsicum annuum showed potent anti-complementary activity. The activity was unchanged by pronase digestion, but decreased by periodate oxidation. The HCAP-0 was fractionated by DEAE ion-exchange chromatography to give two major fractions, HCAP-II and III. These two fractions were finally purified by gel filtration to give HCAP-IIa, HCAP-IIIa1, and IIIa2 fractions that had high anti-complementary activities. The HCAP-IIIa1 and IIIa2 consisted of homogeneous polysaccharides. The anti-complementary activities were unaffected by treatment with polymyxin B, indicating that the modes of complement activation were not due to preexisting lipopolysaccharide. The molecular weight and sugar content of HCAP-IIIa2 had potent anti-complementary activity. The highest yields were 55 kDa and 75.9%, and the molar ratio of galactose (Ara:Gal, 1.0:4.6) was higher than other sugars. The crossed immuno-electrophoresis showed that both classical and alternative pathways were activated by HCAP-IIIa2.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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