${\beta}$-Ionone의 인체 비소폐암세포 A-549 cells (human non-small lung cancer A-549 cell)에 대한 anti-proliferative effect에 관한 연구를 수행하였다. A-549 cell에 다양한 농도의 ${\beta}$-ionone (1, 5, 10, and 15 ${\mu}M$)을 2, 4, 6일 간 처리하고, 배양 2일에 A-549 cell의 생육억제와 관련되는 biochemical marker를 측정하였다. ${\beta}$-Ionone은 A-549 cell 생육을 dose와 time 의존적으로 저해하였다. ${\beta}$-Ionone 배양 2일의 $IC_{50}$은 5.0 ${\mu}g/ml$이었다. ${\beta}$-Ionone은 농도 의존적으로 apoptosis를 유도하였다. ${\beta}$-Ionone은 p53, p21 및 Bax protein 수준을 증가시켰으나, Bcl-2 protein 발현은 억제시켰다. ${\beta}$-ionone은 cytosol cytochrome c 함량을 증가시켰고, caspase-9과 caspase-3 효소 활성증가를 유도하였다. 또한, ${\beta}$-ionone은 $cPLA_2$와 COX-2 protein level을 감소시켰다. 이와 같은 결과는 ${\beta}$-ionone의 A-549 cell에 대한 생육억제효과는 Bax와 Bcl-2 gene 발현을 reciprocal regulation하여 유도한 apoptosis와 $cPLA_2$ 및 COX-2 protein 발현 억제에 기인함을 의미한다.
Guanine nucleotide-binding protein subunit alpha-s ($Gn{\alpha}s$) is a small subunit of the G protein-couple signaling pathway, which is involved in the formation of coat color. The expression level and distribution of $Gn{\alpha}s$ were detected by quantitative real-time-polymerase chain reaction (qPCR), western blot, and immunohistochemistry to investigate the underlying mechanisms of coat color in white and black skin tissues of mice. qPCR and western blot results suggested that $Gn{\alpha}s$ was expressed at significantly higher levels in black mice compared with that of white mice, and transcripts and protein possessed the same expression in both colors. Immunohistochemistry demonstrated $Gn{\alpha}s$ staining in the root sheath and dermal papilla in hair follicle of mice skins. The results indicated that the $Gn{\alpha}s$ gene was expressed in both white and black skin tissues, and the expression level of $Gn{\alpha}s$ in the two types of color was different. Therefore, $Gn{\alpha}s$ may be involved in the coat color formation in mice.
Four-and-a-half LIM-only protein 3 (FHL3) is a member of the LIM protein superfamily and can participate in mediating protein-protein interaction by binding one another through their LIM domains. In this study, the 5'- and 3'- cDNA ends were characterized by RACE (Rapid Amplification of the cDNA Ends) methodology in combination with in silico cloning based on the partial cDNA sequence obtained. Bioinformatics analysis showed FHL3 protein contained four LIM domains and four LIM zinc-binding domains. In silico mapping assigned this gene to the gene cluster MTF1-INPP5B-SF3A3-FHL3-CGI-94 on pig chromosome 6 where several QTL affecting intramuscular fat and eye muscle area had previously been identified. Transcription of the FHL3 gene was detected in spleen, liver, kidney, small intestine, skeletal muscle, fat and stomach, with the greatest expression in skeletal muscle. The A/G polymorphism in exon II was significantly associated with birth weight, average daily gain before weaning, drip loss rate, water holding capacity and intramuscular fat in a Landrace-derived pig population. Together, the present study provided the useful information for further studies to determine the roles of FHL3 gene in the regulation of skeletal muscle cell growth and differentiation in pigs.
Food protein-induced enterocolitis syndrome (FPIES) is a non-IgE mediated hypersensitivity disorder, which is associated with mainly gastrointestinal symptoms and has a delayed onset. The vomiting and/or diarrheal symptoms of FPIES typically begin in the first month of life in association with a failure to thrive, metabolic acidosis, and shock. Therefore, the differential diagnosis of FPIES and neonatal or infantile sepsis-like illnesses or gastroenteritis is difficult. The early recognition of indexes of suspicion for FPIES may help in the diagnosis and treatment of this disorder. The diagnosis of FPIES is generally made through clinical practice and food-specific IgE test findings are typically negative in this condition. Therefore, oral cow's milk challenge (OCC) remains the valid diagnostic standard for FPIES. An investigation of positive OCC outcomes helps to find out a diagnostic algorithm of criteria of a positive challenge in FPIES. Moreover, it has not been clearly determined in infantile FPIES when $1^{st}$ follow up-oral food challenge (FU-OFC) should be performed, with what kind of food protein (e.g., cow's milk, soy), and how much protein should be administered. Hence, to prevent the risk of inappropriate FU-OFC or accidental exposure and achieve appropriate dietary management, it is necessary to identify tolerance rates to major foods under the careful follow up of infantile FPIES patients. On the other hand, small intestinal enteropathy with villous atrophy is observed in FPIES and this enteropathy seems to be in part induced by both of epithelial apoptosis and intercellular junctional complex breakdown. The purpose of this report is to introduce an update on diagnostic and therapeutic approaches in FPIES and suggest the possible histopathological evidences in this disorder.
This study aimed to verify the nutritional and curative effects of protein hydroysate in rats model with gastric ulcer induced by restraint and water-immersion stress. Sprague-Dawley, famale rats weighing approximtely 200g were forced in 5$\times$5$\times$15cm plexiglas cage. The restraint and water immersion stress was carried at 20$\pm$2$^{\circ}C$ for 8-hours. After stress 4 kinds of diets(10% casein, 20% casein, 10% casein hydrolysate, 20% casein hydrolysate) were given for 5 days. In the gastric ulcer rats model, the growth, gastric emptying rate, trypsin activity in gastrointestinal content, plasma total protein, albumin, $\alpha$-amino-N, UUN, creatinine and hydroxyproline of the urine and nitrogen retention were analyzed for nutritional effects of dietary nitrogen levels(10%, 20%) and sources (casein, casein hydrolysate). The results were as follows ; In gastric ulcer rats model, severeness of ulcer, plasma protein, gastric emptying rate, nitrogen retention rate were not different between 20% casein-fed group and 20% casein hydrolysatefed group. But 10% casein hydrolysate-fed group had more curative group. The casein hydrolysate diet-fed group was lower trysin activity in small intestianl content than the casein-fed group, at both casein level(10%, 20%). Finally at 20% levels, there was no difference between casein and casein hydrolysate diet, but 10% level, casein hydrolysate diet was more curative of ulcer than casein diet in gastric ulcer rat model. The results of this study provide useful information concerning diet therapy for the patients with gastrointestinal diseases and the field of enteral diet materials.
This study was conducted to compare the nutritional properties of cookies made with Israeli carp Cyprinus carpio (C-IC) to those made without Israeli carp (control). The proximate composition of C-IC per 100 g was 4.1 g moisture, 9.7 g protein, 29.2 g lipid, 1.4 g ash, and 55.6 g carbohydrates. Moisture, protein and ash contents were significantly higher and the carbohydrate content was significantly lower (P<0.05) in C-IC than control, but there was no difference in lipid content (P>0.05). The total amino acid content of C-IC per 100 g was 9.46 g and the major amino acid was glutamic acid (2.49 g). The mineral contents of C-IC per 100 g were 216.6 mg calcium, 193.2 mg phosphorus, 170.9 mg potassium, and 18.2 mg magnesium, which were all significantly higher than the contents of the control (P<0.05). The major fatty acids of C-IC were 16:0, 18:1n-9, and 18:2n-6. The digestibility of C-IC in the small intestine was 51.3%, which was higher than the digestibility of the control. These results suggest that C-IC have better nutritional properties than the control.
The objective of this study was to investigate polymorphisms of BMPRIB (bone morphogenetic protein type IB receptor) gene and its effect on litter size traits in sheep. Three populations including 101 Small Tailed Han sheep, 79 Poll Dorset and 81 hybrids (Poll Dorset${\times}$Small Tailed Han sheep) were used to detect the polymorphisms in exon 6 region of sheep BMPRIB gene. A fragment of approximately 190bp was amplified by one pair of primers, the polymorphism was revealed from the analysis of three populations by the technique of PCR -SSCP, and a mutation from A to G at 746 of the coding region was confirmed by sequencing in several individual. Statistical results indicated the distribution of allele B (with a A$\longrightarrow$G mutation) and A (without mutation) or genotype AA, AB and BB frequencies differed in three populations. BB genotype (44.55%) and B allele (66.34%) frequencies of Small Tailed Han sheep were higher than those of the others. Analysis of variance showed that the polymorphism of BMPRIB gene was associated with positive effect on litter size traits. The means of genotype BB and AB were about 1.04 and 0.74 more than genotype AA for litter size (p<0.05). Analysis of BMPRIB genotype effects on litter size in three populations indicates the existence of genotype BB or B allele increases the litter size. It suggested that the polymorphism in exon 6 (at 746 in the coding region) of sheep BMPRIB gene may be used as a marker for early selection of prolificacy in sheep.
Patients with non-small-cell lung cancer (NSCLC) with epidermal growth factor receptor (EGFR) amplification or sensitive mutations initially respond to the tyrosine kinase inhibitor gefitinib, however, the treatment becomes less effective over time by resistance mechanism including mesenchymal-epithelial transition (MET) overexpression. A therapeutic strategy targeting MET and EGFR may be a means to overcoming resistance to gefitinib. In the present study, we found that picropodophyllotoxin (PPT), derived from the roots of Podophyllum hexandrum, inhibited both EGFR and MET in NSCLC cells. The antitumor efficacy of PPT in gefitinib-resistant NSCLC cells (HCC827GR), was confirmed by suppression of cell proliferation and anchorage-independent colony growth. In the targeting of EGFR and MET, PPT bound with EGFR and MET, ex vivo, and blocked both kinases activity. The binding sites between PPT and EGFR or MET in the computational docking model were predicted at Gly772/Met769 and Arg1086/Tyr1230 of each ATP-binding pocket, respectively. PPT treatment of HCC827GR cells increased the number of annexin V-positive and subG1 cells. PPT also caused G2/M cell-cycle arrest together with related protein regulation. The inhibition of EGFR and MET by PPT treatment led to decreases in the phosphorylation of the downstream-proteins, AKT and ERK. In addition, PPT induced reactive oxygen species (ROS) production and GRP78, CHOP, DR5, and DR4 expression, mitochondrial dysfunction, and regulated involving signal-proteins. Taken together, PPT alleviated gefitinib-resistant NSCLC cell growth and induced apoptosis by reducing EGFR and MET activity. Therefore, our results suggest that PPT can be a promising therapeutic agent for gefitinib-resistant NSCLC.
Kim, Han-Soo;Duan, Yishan;Ryu, Jae-Young;Kim, Sang-Woo;Jang, Seong-Ho
한국응용과학기술학회지
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제32권1호
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pp.7-15
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2015
In this study, the thermal treatment yam (Dioscorea batatas DECNE.) was analyzed for its proximate and nutritional compositions including mineral, vitamin, amino acids and fatty acids. Thermal treatment yam is mainly consisted of carbohydrate (70.3%) with small amounts of crude protein (15.8%), crude ash (5.1%) and crude fat (1.6%). It was found to be a good source of essential minerals such as K (1100.2 mg/100 g), Mg (99.4 mg/100 g), Ca (54.8 mg/100 g) and Na (44.9 mg/100 g) but Zn (4.8 mg/100 g) and Fe (0.2 mg/100g) content was low. Little amounts of vitamin E (8.3 mg/100g), vitamin C (3.5 mg/100g) and vitamin B1 (2.1 mg/100g) could be found. The amino acid analysis revealed that the yam was superior with respect to serine (1454.2 mg%), lysine (684.6 mg%) and histidine (684.6 mg%). Essential amino acids were calculated to be 2849.3 mg%. The amino acid profiles showed that thermal treatment yam is limiting in isoleucine and phenylaline. Linoleic acid was the most predominant fatty acids with the value of 47.3% followed by palmitic acid (24.7%) and oleic acid (12.7%). And the unsaturated fatty acids including oleic acid and linoleic acid were present in big quantities in thermal treatment yam.
Human cardiac fibroblasts (HCFs) have various voltage-dependent $K^+$ channels (VDKCs) that can induce apoptosis. Hydrogen peroxide ($H_2O_2$) modulates VDKCs and induces oxidative stress, which is the main contributor to cardiac injury and cardiac remodeling. We investigated whether $H_2O_2$ could modulate VDKCs in HCFs and induce cell injury through this process. In whole-cell mode patch-clamp recordings, application of $H_2O_2$ stimulated $Ca^{2+}-activated$$K^+$ ($K_{Ca}$) currents but not delayed rectifier $K^+$ or transient outward $K^+$ currents, all of which are VDKCs. $H_2O_2-stimulated$$K_{Ca}$ currents were blocked by iberiotoxin (IbTX, a large conductance $K_{Ca}$ blocker). The $H_2O_2-stimulating$ effect on large-conductance $K_{Ca}$ ($BK_{Ca}$) currents was also blocked by KT5823 (a protein kinase G inhibitor) and 1 H-[1, 2, 4] oxadiazolo-[4, 3-a] quinoxalin-1-one (ODQ, a soluble guanylate cyclase inhibitor). In addition, 8-bromo-cyclic guanosine 3', 5'-monophosphate (8-Br-cGMP) stimulated $BK_{Ca}$ currents. In contrast, KT5720 and H-89 (protein kinase A inhibitors) did not block the $H_2O_2-stimulating$ effect on $BK_{Ca}$ currents. Using RT-PCR and western blot analysis, three subtypes of $K_{Ca}$ channels were detected in HCFs: $BK_{Ca}$ channels, small-conductance $K_{Ca}$ ($SK_{Ca}$) channels, and intermediate-conductance $K_{Ca}$ ($IK_{Ca}$) channels. In the annexin V/propidium iodide assay, apoptotic changes in HCFs increased in response to $H_2O_2$, but IbTX decreased $H_2O_2$-induced apoptosis. These data suggest that among the VDKCs of HCFs, $H_2O_2$ only enhances $BK_{Ca}$ currents through the protein kinase G pathway but not the protein kinase A pathway, and is involved in cell injury through $BK_{Ca}$ channels.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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