본 연구는 집속형초음파자극시스템의 카트리지부를 시료로 사용하여 의료기기 안전성 평가 기준인 GLP(Good Laboratory Practice)에 관한 시험 중 동물실험을 통한 피부 자극 시험 및 피부 감작성시험을 진행하였다. New Zealand White Rabbit 암컷 6마리를 이용하여 IACUC 승인 후 시험을 진행하였으며, 실험기간 동안 사망한 개체 수는 없었으며, 실험동물에서 어떤 이상 증상도 관찰되지 않았다. 극성, 비극성 자극 지수는 모두 '0.0'으로 나타났다. 또한, 피부감작성 평가의 경우 IACUC 승인을 통한 기니피그 30마리를 통하여 대조군 및 실험군으로 나누어 시험검체 및 공시험액을 별도의 희석 없이 용출액 자체를 사용하여 모든 유도 및 유발단계를 적용하였다. 실험결과대조동물의 피부반응 등급은 0등급이었으며, 시험동물의 피부반응에서 1등급 이상을 나타내는 동물은 없었다. 두 시험 결과에서 피부의 이상 증상은 발견되지 않았으며, 인체에 적용하여 환자를 치료할 경우 시험에 사용된 시험재료로부터 피부의 이상 증상이 생기는 질환 등은 나타나지 않는지에 관하여 안정성을 알아 보고자 하였다.
Chronic ultraviolet (UV) radiation causes photoaging, which represents skin damage, disrupts skin barrier function, and promotes wrinkle formation. We investigated that the polysaccharide extract of an edible basidiomycetous white jelly mushroom, Tremella fuciformis, (TF-Glucan®) exhibited statistically photoprotective activity by inhibiting matrix metalloproteases (MMPs) and increasing collagen synthesis, and an anti-inflammatory activity by inhibiting nitric oxide and pro-inflammatory cytokines at the concentrations of less than 1000 ㎍/ml, which is not cytotoxic (p < 0.05). Additionally, TF-Glucan® increased the expression of involucrin and filaggrin to prevent the disruption of UVB-induced barrier function (p < 0.05). TF-Glucan® was assessed as a safe material by the human primary skin irritation (1, 3, 5%), human repeated insult patch test (no sensitization at 5%), 3T3 NRU phototoxicity assay (no phototoxicity, PIF < 2, MPE < 0.1), eye irritation test test by BCOP (no category, IVIS ≤ 3) and local lymph node assay (negative at 10, 25, 50%) for identifying potential skin sensitizing. These results suggest that TF-Glucan® may be useful as an anti-photoaging ingredient for developing cosmeceuticals.
농약을 포함한 화학물질의 독성을 평가하기 위하여 많은 실험동물이 사용되고 있다. 최근 동물실험에 대한 규제 강화와 실험동물의 윤리적 보호를 위해 동물실험을 대체하려는 동물대체시험법 연구가 활발히 진행되고 있다. 우리나라에서 화학농약 등록 시 급성경구독성시험, 급성경피독성시험, 피부자극성시험 등 여러 시험에서 실험동물을 이용하여 인축독성평가를 하고 있다. 세계적인 추세에 맞춰 농약의 안전성 평가를 위한 동물대체시험법 연구제시와 규제가 시급한 실정이다. 본 연구는 국제적으로 승인된 대체시험법 중 인공피부모델을 이용한 피부자극성평가 적용 가능성을 검토하기 위하여 실시하였다. 시험물질은 기존의 토끼를 이용한 피부자극성시험에서 피부반응을 평점화하여 산출한 피부 1차 자극지수(P. I. I.) 0-7(구분:없음-강도) 값을 가진 농약제품 16종을 선발, 인공피부(KeraSkin$^{TM}$)를 이용하여 피부자극성평가를 수행하였다. 그 결과, 중도이상의 농약인 경우 세포생존율 50% 이하로 자극성 물질로 나타났으며, 경도 이하의 농약인 경우 세포생존율 50% 이상으로 비자극성 물질로 나타났다. 피부의 자극성이 있는 경도에서 강도의 농약의 경우 현재 농촌진흥청 고시 농약표시 기준에 따라 주의사항을 표시하게 되어 있고(RDA, 2012b), 농약의 피부자극성의 경우 민감도가 사람에 따라 많은 차이를 보이기 때문에 피부자극성 대체시험법 적용여부는 추후 추가적인 검토가 필요할 것으로 판단되며, 앞으로 농약안전성평가를 위한 동물실험을 대체할 수 있는 시험법 검증연구를 통해 농약등록 시험기준과 방법을 개선할 필요성이 있다고 사료된다.
The aim of this study was to investigate whether a novel formulation of an herbal extracts has an inhibitory effect on obesity. To determine its anti-obesity effects, we performed anti-obesity-related experiments in vitro and in vivo. Thus, our present study was carried out to evaluate the anti-obesity effect of herbal extracts using a high fat diet (HFD)-induced obese mouse model and 3T3-L1 adipose cells. The effects of each herbal extracts on lipid accumulation in 3T3-L1 cells were examined using Oil Red O staining. Results showed that treatment with each herbal extracts at $10{\sim}100{\mu}g/ml$ had no effect on cell morphology and viability. Without evidence of toxicity, herbal extracts treatment decreased lipid accumulation compared with the untreated adipocytes controls as shown by the lower absorbance of Oil Red O stain. Futhermore, compared with control-differentiated mature adipocytes, each herbal extracts significantly inhibited lipid accumulation in mature 3T3-L1 adipocytes. In the HFD-fed obese mice, body weight, liver weight and white adipose tissue weights were significantly reduced by mixture of herbal extracts administration in mouse skin. Futhermore, we found that mixture of herbal extracts administration suppressed serum triglyceride (TG), and total cholesterol (TCHO) in HFD-induced obese mouse model. The mixture of herbal extracts of permeability was estimated by measuring the transepithelial electrical resistance (TEER) value in pig skin. The optimized formulations of herbal extracts (Test 3 formulation) showed skin permeation. However, test 1 formulation containing essential oil as enhancer showed maximum skin permeation. After confirming the enhanced skin permeability, in vivo studies were performed to assess whether skin irritation potential on the basis of a primary irritation index (PII) in rabbit skin. Reactions were scored for erythema/edema reactions at 24 h, 48 h and 72 h post-application. It was concluded that the test 1 formulation was not irritation (PII = 0). The present study suggests that the test 1 formulation might be of therapeutic interest with respect to the treatment of obesity.
Lee Yang-Suk;Chang Zhiqiang;Park Seung-Chun;Rim Nac-Ryong;Kim Nam-Woo
Toxicological Research
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제21권2호
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pp.115-119
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2005
In the present study, we evaluated the free radical scavenging and xanthine oxidase inhibitory activities exhibited by extracts obtained from the dried stems (and leaves) of Lespedeza bicolor We also assessed its potential irritation activities with regard to cosmetic use. When the DPPH radical scavenging activities of L. bicolor were assessed at six different concentrations (0, 50, 100, 250, 500 and 1000 ${\mu}g/ml$), the concentration of L. bicolor required to inhibit DPPH radical formation by $50\%$ was found to be $164.90{\mu}g/ml$. The effects of L. bicolor on the inhibition of xanthine oxidase were determined at seven different concentrations. The $50\%$ effective concentration was found to be $282.75{\mu}g/ml$. In the skin irritation test, all animals survived for the duration of the study, and all exhibited normal gains in body weight. The control sites exhibited no response to the control procedures. No edema, erythema, or eschar formation was observed in any of the tested rabbits. In the ocular irritation study, all of the rabbit eyes remained normal. In summary, L. bicolor extracts were considered to be non-irritating to the skin and eye.
본 연구는 병해충 관리용 유기농업자재 허용물질로 지정된 식물추출물 중 님 추출물(미얀마산, 인도산)과 고삼추출물(중국산)의 독성 평가를 위해 피부자극성과 안점막자극성시험을 수행하였다. 시험결과, 원산지가 다른 님 추출물 2종은 모두 피부자극성과 안점막자극성이 없는 것으로 평가되었고, 고삼 추출물은 피부자극성은 없었고 안점막자극성이 강도로 나타났으나 시간이 경과함에 따라 자극이 경감하는 것으로 평가됐다. 따라서 안점막자극성이 강한 것으로 평가된 고삼 추출물을 유기농업자재로 사용할 때 농작업자에 대한 안전대책이 필요한 것으로 판단된다.
During a clinical test with Korean herbal cosmetics, significant data and related results are summarized as following: 1. The questionnaire resulted the subjects who used Korean herbal cosmetics showed significant subjective improvement. 2. $11{\%}$ of the subjects who used Korean herbal skin lotion replied "very good" , $60{\%}$ "good" , and $29{\%}$ "so so". 3. In the questionnaire about how often the subjects who used Korean herbal skin lotion experienced skin irritation, $91{\%}$ of the subjects replied they didn't experience any skin irritation 4. The subjects who used oily & combinational cosmetics showed more significant result than the placebo group in the questionnaire about how they feel when using emulsion. 5. In the questionnaire about how they feel when using emulsion. $11{\%}$ of all the subjects replied "very good" , 60{\%}$ "good" , and $29{\%}$ "so so". 6. In the questionnaire about how they feel when using essence $18{\%}$ of all the subjects replied "very good" , $56{\%}$ "good" , and $27{\%}$ "so so". 7. In the questionnaire about how often the subjects who used skin lotion experienced skin irritation, $100{\%}$ of the subjects replied there was no skin irritation. 8. the subjects who used Korean herbal cosmetics showed significant result in the questionnaire about how much moisture they feel when using cream. 9. The subjects who used neutral & dry cosmetics showed more significant result than the placebo group in the questionnaire about if the cosmetics spread well when using emulsion. 10. The subjects who used oily & combinational cosmetics showed more significant result than the placebo group in the questionnaire about how much moisture they feel when using cosmetics. 11. In the questionnaire about how they feel when using cream $13{\%}$ of all the subjects replied "very good", $49{\%}$ "good", and $2{\%}$ "so so". 12. In the questionnaire about how often the subjects who used cream lotion experienced skin irritation, $96{\%}$ of the subjects replied there was no skin irritation. 13. In the measurement of coreometer, the subjects who used oily & combinational cosmetics showed significant result(measurement area : indang). Especially in the area of sungjang there is significant difference between the subjects group and placebo group. 14. In the measurement of skin-ph-meter, there was no significant change in all group. 15. in the measurement of melanin-erythema index meter, the subjects who used cosmetics which doesn't contain Korean herbs showed significant change and made significant difference in comparison to the subjects who used Korean herbal cosmetics.
The present study was carried out to investigate the skin irritation potential of lemon grass essential oil in rabbits. A volume of 0.5 ml of test article was applied to intact and abraded skins, respectively, for 24 h in 6 healthy male New Zealand White rabbits. Parameters measured during 72 h observation period were mortality, clinical signs, body weight changes, and local irritation. All rabbits showed severe edema at both 24 h and 72 h after the application of test article. These animals also showed very slight to severe erythema and/or slight eschar formation at both 24 h and 72 h. The edema and erythema induced by lemon grass essential oil were recovered on day 7 of additional 11-day recovery period, but the eschar formation was not recovered at the end of recovery period. On the other hands, there were no treatment-related adverse effects on clinical sign, body weight and gross finding in rabbits. Based on these results, it was concluded that a single dermal application of the undiluted lemon grass essential oil caused very slight to severe edema, erythema and eschar formation in rabbits and showed a primary irritation index score of 5.63 indicating severe irritation. The results of this study strongly suggest that lemon grass essential oil should be used with care and in highly diluted forms especially when directly applied to the skin.
The SKINTEX Method is based on a two-compartment physico-chemical model which includes a Biomembrane Barrier in compartment one and an organized macromolecular matrix in compartment two. Test samples absorb onto or permeate through the keratin/collagen Biomembrane Barrier and then can interact with the organized macromolecular matrix. Changes in the integrity of the barrier release a dye indicator: Changes in the matrix can alter its transparency. The sum of these two responses is read spectrophotometrically at 470nm. An early investigation of 950 chemicals and formulations in the SKINTEX System produced results which were 89% concordance to in vivo Draize dermal irritation results obtained with 24-hour occluded application of test samples with-out abrasion and standard scoring. Alkaline materials were analyzed in a specialized SKINTEX AMA Protocol. In this early study, the model did not distinguish nonirritant test materials and formulation with PDII(Primary Dermal Irritation Index)in the range from 0 to 1.2, A High Sensitivity Assay Protocol(HSA)was developed to amplify the changes in both compartments of this model and provide more accurate calibration of these changes. A study of 60 low irritation test samples including cosmetics, household products, chemicals and petro-chemicals distinguished nonirritants with PDII $\leq$ 0.7 for 26 of 30 nonirritants. A second protocol was developed to evaluate the SKINTEX model predictability with respect to human irritation. The Human Response Assay (HRA )has been optimized based on differences in penetration and irritation responses in humans and rabbits. An additional 32 test materials with different mechanisms and degrees of dermal toxicity were evaluated by the HRA. These in vitro results were 86% concordant to human patch test results. In order to further evaluate this model, a Standard Chemical Labelling (SCL) Protocol was developed to optimize this system to predict Draize dermal irritation results after a 4-hour application of the test material. In a study of 52 chemicals including acids, bases, solvents, salts, surfactants and preservatives, the SCL results demonstrated 85% concordance to Draize results for a 4-hour application of test samples on non-abraded rabbit skin. The SKINTEX System, including three specialized protocols, provided results which demonstrated good correlation to the endpoint of dermal irritation in man and rabbits at different application times.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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