• Biomolecules & Therapeutics
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• 제3권3호
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• pp.242-244
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• 1995

In vitro cell culture system has been proposed as a promising alternative model to in vivo skin irritation test. These studies were performed to screen the cytotoxicity effects of surfactants using normal human skin fibroblasts. Cell membrane integrity assessed by the leakage of lactate dehydrogenase (LDH) and mitochondrial integrity by MTT [3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromides reduction test were affected in a dose dependent manner. The irritation potential of surfactants to human skin patch test, and the changes of capillary permeability by rabbit intradermal safety test were assessed as in vivo methods. Our results suggest that LDH leakage assay and MTT reduction test using cultured human fibroblasts could be predictive for the irritancy of various surfactants in human, and LDH assay is superior correlated with in vivo test (r=0.886) to MTT test with in vivotest (r=0.757).

• 대한화장품학회지
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• 제26권1호
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• pp.17-40
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• 2000

Cytotoxicity assays using artificial skins have been proposed as in vitro alternatives to minimize animal ocular and dermal irritation testing. Accordingly, the responses of artificial skins to the well-characterized chemical irritants toluene, glutaraldehyde, and sodium lauryl sulfate (SLS), and the nonirritant polyethylene glycol were studied. The evaluation of the irritating and non-irritating test chemicals was also compared with the responses observed in human dermal fibroblasts and human epidermal keratinocytes grown in a monolayer culture. The responses monitored included an MTT mitochondrial functionality assay. In order to better understand the local mechanisms involved in skin damage and repair, the production of several mitogenic proinflammatory mediators, interleukin-l$\alpha$, 12-HETE, and 15-HETE, was also investigated. Dose-dependent increases in the levels of かIn and the HETEs were observed in the underlying medium of the skin systems exposed to the two skin irritants, glutaraldehyde and SLS. The results of the present study show that both human artificial skins can be used as efficient in vitro testing models for the evaluation of skin toxicity and for screening contact skin irritancy.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제4권4호
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• pp.364-372
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• 1996

The primary skin and eye irritation test of 0.3% DA-5018 cream, a capsaicin analogue, were carried out in rabbits. As control materials, Zostrix-HP cream (0.075% capsaicin cream) and the base of 0.3% DA-5018 cream were used in the same manners. In the primary skin irritation test, the Primary Irritation Index (P.I.I.) was 1.6, 1.9 and 0.5 in groups treated with 0.3% DA-5018 cream, Zostrix-HP cream and the base of 0.3% DA-5018 cream, respectively. The irritation ratings of 0.3% DA-5018 cream and Zostrix-HP cream were mildly irritating. The base of 0.3% DA-5018 cream was evaluated as a non-irritating material. In the eye irritation test, 0.3% DA-5018 cream and Zostrix-HP cream could be considered as mildly irritating materials. But, the base of 0.3% DA-5018 cream was a non-irritating material. These results suggest that 0.3% DA-5018 cream has mildly irritating activity and its irritancy is similar to that of Zostrix-HP cream.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제26권4호
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• pp.417-423
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• 2018

Extracellular interleukin 1 alpha (IL-$1{\alpha}$) released from keratinocytes is one of the endpoints for in vitro assessments of skin irritancy. Although cells dying via primary skin irritation undergo apoptosis as well as necrosis, IL-$1{\alpha}$ is not released in apoptotic cells. On the other hand, active secretion has been identified in interleukin-1 receptor antagonist (IL-1ra), which was discovered to be a common, upregulated, differentially-expressed gene in a microarray analysis performed with keratinocytes treated using cytotoxic doses of chemicals. This study examined whether and how IL-1ra, particularly extracellularly released IL-1ra, was involved in chemically-induced keratinocyte cytotoxicity and skin irritation. Primary cultured normal adult skin keratinocytes were treated with cytotoxic doses of chemicals (hydroquinone, retinoic acid, sodium lauryl sulfate, or urshiol) with or without recombinant IL-1ra treatment. Mouse skin was administered irritant concentrations of hydroquinone or retinoic acid. IL-1ra (mRNA and/or intracellular/extracellularly released protein) levels increased in the chemically treated cultured keratinocytes with IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ mRNAs and in the chemically exposed epidermis of the mouse skin. Recombinant IL-1ra treatment significantly reduced the chemically-induced apoptotic death and intracellular/extracellularly released IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ in keratinocytes. Collectively, extracellular IL-1ra released from keratinocytes could be a compensatory mechanism to reduce the chemically-induced keratinocyte apoptosis by antagonism to IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$, suggesting potential applications to predict skin irritation.

• 대한화장품학회지
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• 제40권1호
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• pp.95-108
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• 2014

화장품은 일반인이 장기간 연용하는 제품으로 인체 피부에 대한 안전성이 매우 중요하다. 화장품에 의한 접촉피부염은 자극성 물질이 피부에 접촉 후 침투하여 유발하는 염증반응으로 활성화된 면역세포에서 염증을 매개하는 다양한 인자를 분비함으로써 시작된다. 본 연구에서는 국산 생약 추출물을 이용하여 RAW264.7 대식 세포에서 염증 관련 인자에 대한 영향을 통해 항염증 활성을 스크리닝 하였다. 51종의 국산 생약 추출물 중 측백, 측백엽(초), 향부자, 형개, 동과자, 산약, 산약(초), 상지, 송절, 택사의 에탄올 추출물 10종이 lipopolysaccharide(LPS)에 의해 유도된 세포독성을 감소시킴과 동시에 염증 관련 인자인 Nitric oxide (NO), interleukin (IL)-1${\beta}$, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$의 생성을 억제하는 것을 확인하였다. 또한, 이들 생약 추출물은 인체피부에서도 자극을 유발하지 않음을 인체 첩포시험을 통해 검증하였다. 따라서, 항염증 활성이 확인된 10종 국산 생약 추출물은 피부 자극을 예방할 수 있는 화장품 소재로서의 활용이 가능할 것으로 사료된다.

• 대한화장품학회지
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• 제21권1호
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• pp.67-83
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• 1995

생체내 피부 자극은 일련의 복합적인 생리 화학적 변화를 수반한다. 이러한 생체내 현상을 보다 민감하게 반영하고, 동물 시험 경감 측면 및 정확성, 재현성을 보완하기 위하여 자극 물질 검색을 위한 대체 시험법이 필요하게 되었다. CAMVA는 이러한 필요성에 의해 고안된 방법의 하나로써 약 10일된 유정란의 복합적인 혈관이 융합된 장뇨막내에 자극 물질을 투여하고 일정 시간 후, 막 내 혈관의 충혈, 출혈, 응집현상 등의 변화를 통해 자극 정도를 평가하는 in vitro 시험계이다. 본 연구에서는 화장품 영역에서 중요한 위치를 차지하는 계면활성제의 자극 정도를 검색하여 in vitro 시험법인 CAMVA와 in vivo 시험법간의 상관성을 조사하였으며, 그 결과 매우 높은 상관성을 나타냄을 알 수 있었다. 그러므로 CAMVA는 안 자극 시험의 대체 시험법 뿐만 아니라 피부자극의 예측에도 적용 가능한 유용한 시험법이라 생각된다.

• 대한화장품학회지
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• 제31권3호
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• pp.245-251
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• 2005

화장품은 의약품과 달리 남녀노소를 불문하고 거의 평생에 걸쳐 사용하는 제품이므로 피부 및 인체의 안전성 확보는 중요한 문제라고 할 수 있다. 화장품의 안전성 평가는 화장품법에 식품의약품안전청장이 고시하도록 되어있어 현재 식약청고시 '기능성화장품등의 심사에 관한 규정'에서 정하고 있다. 자외선에 의한 피부독성은 피부노화, 피부홍반, 피부손상, 피부암 유발 면역계장애 등이 있으며, IARC (International agency for research on cancer)에서는 자외선을 사람에게 암을 유발하는 물질로 분류하고 있다. 자외선 노출에 의하여 설치류에 대한 피부암 유발보고는 많이 있고, 현재 전 세계적으로 자외선에 의한 피부 암화 과정에 대하여 활발한 연구가 진행되고 있다. 화장품이 광에 의한 영향을 평가하는 시험은 광독성시험으로, 국내에서 광독성에 대한 규정은 자외선에서 흡수가 없음을 증명하는 흡광도 시험자료를 제출하는 경우는 면제이고 그 외의 경우는 상기 고시에 의한 광독성 시험과 광감작성 시험을 실시하도록 되어 있다. 이 시험은 일반적으로 기니픽 또는 토끼를 포함한 적절한 동물로 실시하도록 규정되어 있다. 화장품 안전성 평가에 있어서 동물대체시험법의 요구는 3R (replacement, refinement, reduction) 운동으로 유럽을 중심으로 시작하여 이제는 전세계로 확대되어 있으며, 화장품 안전성심사에 있어 중요한 이슈로 대두되고 있다 화장품의 광독성 평가에 대한 대체시험법으로 3T3 NRU(neutral red uptake) 광독성시험이 2004년 4월 OECD 독성시험 기준으로 채택되었다. In vitro 광독성 시험법은 마우스 유래의 섬유아세포인 3T3 cell을 이용하여 광조사한 것과 광조사하지 않은 세포와의 세포독성을 NRU 시험을 이용하여 그 정도를 비교하여 그 차이(PIF, photoirritation factor)가 5배 이상이 되면 광독성 물질로 분류하는 평가방법이다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제48권1호
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• pp.87-94
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• 2009

멀구슬나무와 고삼 식물추출물을 활용한 KNI3126의 주요 해충 6종에 대한 살충효과와 천적류에 대한 영향평가를 하였다. 벼멸구에 대한 KNI3126의 살충효과는 약제처리 후 5일째에 95% 이상이었으며, 목화진딧물은 처리 후 3일째에 95% 이상을 나타냈지만, 5일째에는 다소 살충효과가 떨어졌다. 오이총채벌레에서는 68.1%로 일반 살충제처럼 높은 살충효과를 나타내지는 않았다. 배추좀나방의 경우는 95% 이상의 높은 살충율을 나타내어 친환경자재로서 난방제 해충의 밀도 억제가 가능할 것으로 판단되었다. 점박이응애에서는 살포 1일째부터 80% 정도의 살비율을 보여 5일째에는 90% 이상의 높은 살비율을 나타냈다. 포식성 천적인 이리응애류에 대한 영향평가 결과 국제생물방제협회(IOBC)의 생존율 40%이하인 선택독성이 중간정도로 판정되었으며, 기생성 천적의 경우에는 비교적 안전한 것으로 평가되었다. 벼멸구에 대한 기피효과는 약한 것으로 판단되었지만, 점박이응애에 대해서는 높은 것으로 판명되었다. 또한, 안전성을 검토한 결과 급성경구, 급성경피, 어독성에서 저독성으로, 피부자극성과 안점막자극성시험에서는 자극이 없는 것으로 나타났다.