• 제목/요약/키워드: Shaking culture

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감귤농축액 첨가배지에서 배양한 버섯균사체 추출물의 항균활성 및 항산화활성 비교 (Comparison of Antibacterial and Antioxidant Activities of Mushroom Mycelium Culture Extracts Cultivated in the Citrus Extracts)

  • 김만철;김민주;김택;박근태;손홍주;김기영;최우봉;오덕철;허문수
    • KSBB Journal
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    • 제21권1호
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    • pp.72-78
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    • 2006
  • 9종류의 버섯 균사체를 희석 감귤농축액과 일반 합성배지에서 각각 배양한 배양물을 에탄올 추출하고 여과하여 동결건조 후, 얻어진 버섯균사체 배양 추출물에 대한 항균활성과 항산화 활성을 조사하였다. 일반합성배지 균사체 배양 추출물에서의 항균활성은 Sparassic crispa > Coriolus versicolor > Phellinus linteus > Agaricus blazei > Hericicum eninacium 순으로 높은 활성이 관찰되었으며, 반면 감귤농축액 첨가배지에서의 버섯균사체 배양 추출물의 항균활성은 일반 합성배지에서와 거의 유사한 결과를 얻을 수 있었는데, 전체적인 항균활성을 비교해 보았을 때, 항균활성이 조금 증가한 양상의 결과를 얻을 수 있었다. DPPH 전자공여능을 이용한 항산화 활성 실험에서는 전 실험 처리구에서 농도가 높아질수록 항산화력이 증가하였으며, 특히 Sparassic crispa 균사체 배양추출물인 경우에 1 mg/ml의 낮은 농도에서도 80%에 가까운 radical 소거 활성을 보였으며, 모든 실험구에서 5 mg/ml 이상의 농도에서는 40% 이상의 라디컬 소거활성능이 관찰되었다. Superoxide radical 소거능 역시 Sparassic crispa 균사 배양 추출물에서 70% 이상의 높은 효소활성을 보였다. 또한 Hericicum erinacium, Lentinus edodes, lnonotus obliquns, Sparassic crispa, Phellinus linteus 배양 추출물은 합성항산화제인 BHA보다도 높은 효소활성이 관찰되었다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 기존 항생제와 합성항산화제를 대체할 수 있는 천연항산화제의 개발가능성을 확인할 수 있었다. 또한 천연배지로 사용된 감귤농축액을 이용하여 세균의 배양에 충분히 이용될 수 있음을 확인하였으며, 값비싼 일반 합성배지를 대처 할 천연물질로의 가능성을 확인하였다.y, 32 Gy선량에서는 낮은 활성을 보였으면 반면에 8 Gy와 64 Gy의 선량에서는 더 높은 활성을 나타내었다. 이러한 결과는 Y선 조사가 종자의 혈전용해 활성을 향상시킬 가능성이 있을 것으로 생각된다. 이상의 모든 결과로 볼 때 율무의 추출 효소는 chymotrypsin-like serine protease에 속하는 혈전용해효소임을 확인할 수 있었다.smotic control group(A/B 25)에선 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다(P>0.05). 후기당화합물이 첨가된 경우에 SEM상 분리된 세포사이이음(intercellular junction)과 융합된 미세융모를 관찰할 수 있었다. BSA의 투과성은 일 주 배양 후 A30 dish에서만 일 주 배양 후 B5 dish에 비해 19% 증가하는 소견을 보였으나 통계적인 유의성은 없었다(P>0.05). 결론 : 사구체 상피세포의 HSPG 형성의 감소에 고농도의 당과 후기당화합물은 서로 부가적인 역할을 하고 후기당화합물이 더 큰 역할을 함을 알 수 있다. HSPG 감소 소견과 더불어 SEM상 장기간 고혈당을 유지하면 사구체 여과기전에서 size-selective와 charge-selective 장벽에 결함을 유발할 수 있으며 당뇨병에서의 단백뇨의 기전 중 하나로 생각된다. MAR 값은 군간 유의적이지는 않으나 과체중군(0.76)이 정상체중(0.73) 또는 저체중군(0.73)에 비해 높은 값은 보여주었다. 9. 철분은 과체중군(1.67)이 저체중(0.80) 또는 정상 체중군(0.82)에 비해 영양 질적 지수(INQ)가 높았으며(p<0.0335), 비타민 $B_1$은 정상 체중군이 유의적으로 가장 높은 영양 질적 지수를 보여주었다(p<0.0452). 이상의 결과로 볼 때 대학생들은 과체중보다는 저체중의 비율이 높았으므로 적정 체중 유지와 더불어 잘못된 식습관과 식이 섭취를 하고 있었다. 이에 대한 인식과

Micrococcus sp. M1에 의한 Phenol과 p-Creso의 생분해 Kinetics (Biodegradation Kinetics of Phenol and pcresol by Micrococcus sp. M1)

  • 손홍주;장웅석;이건;이상준
    • 한국환경과학회지
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    • 제6권2호
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    • pp.153-163
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    • 1997
  • In order to fad the most fitted biodegradation model, biodegradation kinetics model to the initial phenol and p-cresot concentrations were investigated and had been fitted by the linear regression. Bacteria capable of degrading p-cresol were isolated from soil by enrichment culture technique. Among them, strain Ml capable of degradillg p.rcresol has also degraded phenal and was identified as the genus Micrococcus from the results from of taxonomical studies. The optimal tonditlons for the biodegradation of phenal and p-cresol by Micrococcus sp. Ml were $NH_4NO_3$ 0.05%, pH 7.0, 3$0^{\circ}C$, respectively, and medium volume 100m1/250m1 shaking flask. iwicrococcus sp. Ml was able to grow on phenal concentration up to 14mM and p-cresol concelltration up to 0.8mM. With increasing substrate concentraction, the lag period increased, but the maximum specific growth rates decreased. The yield coefficient decreased with increasing substrate concentation. The biodegradation kinetics of phenol and p-cresol were best described by Monod with growth model for every experimented concentration. In cultivation of mixed substrate, p-cresol was degraded first and phenol was second. This result implies that p-cresol and phenol was not degraded simultaneously.

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수종의 탄성 의치상 이장재에 대한 Candida albicans의 성장에 관한 연구 (IN VITRO GROWTH OF CANDIDA ALBICANS ON SEVERAL RESILIENT DINTURE LINERS)

  • 정재헌;김광원;김동기;이장희
    • 대한치과보철학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.19-27
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    • 1993
  • For the purpose of this study was to determine the growth of Candide albicans on the surface of the resilient denture liners. The discs$(40\times40mm)$ of 2 resilient lining materals (Molloplast B, Mollosil) and one conventional acrylic resin (K-33) and one metal plate were processed and disinfected. Firstly, the test discs were placed into petri dish, and Candide albicans suspensions was overlayed on the test discs. And the test discs were incubated with intermitant shaking for 1 hour, 2 hours, 6 hours, 12 hours, 24 hours. After incubation, imprint culture method was achived and counted the colony on the agar plate. Secondly, the effect of denture cleansing agents on the growth of Candide alibicans on the resilient dentureliners was evaluated. The results were as follows : 1. The growth of Candida albicans on discs of Molloplast B and Mollosil was increased than that on discs of acrylic resin and metal plate (p<0.05). 2. As Candide albicans suspensions were incubated for 2 hours, the growth of Candida albicans on discs of Mollosil was increased than that on discs of Molloplast B (p<0.05), and the growth of Candide albicans on discs of metal plate was increased than that on discs of acrylic resin (p<0.05). 3. As Candide albicans suspensions were incubated for 6 hours, the growth of Candide albicans on discs of Mollosil was increased than that on discs of Molloplast B (p<0.05). 4. The growth of Candide albicans on discs of Mollosil and Molloplast B in treating denture cleansing agent was inhibited than control discs (p<0.05).

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Thiobacillus ferrooxidans에 의한 저품위 우라늄 광석으로부터 우라늄 침출 (Uranium Leaching from Low-Grade Uranium Ore by Thiobacillus ferrooxidans)

  • 이현섭;표관웅유연우김철
    • KSBB Journal
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    • 제11권3호
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    • pp.353-359
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    • 1996
  • Thiobacillus ferrooxidans를 이용한 보다 효율적이고 현장에 직접 응용할 수 있는 우라늄 침출공정을 개발하기 위하여 배양조건의 확립과 교반 반응기 및 이중기포탑 반융기에서의 우라늄 침출에 대한 연구 를 수행하였다. 배지의 초기 $Fe^{2+}$ 농도는 원광석 40g/L에 대하여 16.2g/L를 이용하는 것이 적합하였으며, 원광석의 업자는 작을수록 우라늄 침출율이 증가하였다. 또한 원광석의 첨가량이 많을수록 우라늄의 침출속도는 증가하였으나 침출율은 약간씩 감소하였다. 교반 반 응기 빛 이중기포탑 반응기에서의 우라늄 침출에 대한 실험을 최적조건에서 수행한 결과 교반 반응기에 서는 진탕배양기에서와 통일하게 12일 배양시 39.3%의 침출율로 5.5mgjL의 우라늄을 얻었다. 반면 이중기포탑 반응기에서는 교반 반응기에 비하여 세 균수가 2.4배 증가하였으며, 우라늄의 침출율과 침출된 우라늄 농도도 각각 91.4%와 12.8mgjL으로 교반 반응기 보다 2.3배 증가하였다. 이러한 결과는 이중기포탑 반응기에서는 충분한 양의 산소와 이산 화탄소의 공급과 원광석의 혼합이 잘됨으로써 세균 의 활성이 크게 증가하여 우라늄 침출이 향상된 것으로 추정된다.

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형질전환 벼 현탁세포 배양에서 혼합효율과 조정배지가 hCTLA4Ig 생산에 미치는 영향 (Effects of Mixing Performance and Conditioned Medium on hCTLA4Ig Production in Transgenic Rice Cell Suspension Cultures)

  • 최홍열;박준용;남형진;공미경;유예리;김동일
    • KSBB Journal
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    • 제30권6호
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    • pp.307-312
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    • 2015
  • Transgenic rice cells using RAmy3D promoter can provide high productivity, and the production of recombinant protein is induced by sugar starvation. In this system, productivity was reduced during the scale-up processes. To ensure the influences of shear stress and oxygen transfer rate, working volume and mixing performances were investigated under various agitation speeds and working volumes. In addition, inoculation methods including suspended cells and filtered cells were compared. Working volumes and shaking speeds were 300, 450 mL and 80, 120 rpm, respectively. Hydrodynamic environment of each condition was measured numerically like mixing time and $k_La$. Good mixing performance and high shear stress were measured at high agitation speed and low volume. The highest level of hCTLA4Ig was 30.7 mg/L at 120 rpm, 300 mL. When conditioned medium was used for inoculation, increased cell growth was noticed during the day 0~4 and decreased slower than filtered cells. Compared with filtered cells, the maximum hCTLA4Ig level reached 37.8 mg/L at 120 rpm, 300 mL and lower protease activity level was observed. In conclusion mixing performance is critical factor for productivity and conditioned medium can have a positive effect on damaged cells caused by hydrodynamic shear stress.

Screening and Characterization of Microorganisms with Fibrinolytic Activity from Fermented Foods

  • Yoon, Seon-Joo;Yu, Myeong-Ae;Sim, Gwan-Sub;Kwon, Seung-Taek;Hwang, Jae-Kwan;Shin, Jung-Kue;Yeo, In-Hyun;Pyun, Yu-Rang
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제12권4호
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    • pp.649-656
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    • 2002
  • Fibrinolytic microorganisms were screened from 42 samples of Korean fermented food (7 kinds of Chungook-jang, 14 kinds of commercial Doen-Jang, 5 kinds of home-made Doen-jang, and 16 kinds of Jeot-gal), 15 samples of Japanese fermented food (5 kinds of home-made soybean paste, and 10 kinds of Natto), and 19 samples of Indonesian fermented food (Tempe) as well as starters of Meju (500 microflora from Korea, and 22 from China). Initially, 11 isolates with strong fibrinolytic activity were selected for further characterization. The fibrinolytic activity of the 11 isolates ranged from 89 to 199% of standard plasmin. Four strains, M5l from Korean fermented food (Meju), I 1-1, I 1-4, and I 5-1 from Indonesian fermented food (Tempe), were chosen based on the degree of activity and reproducibility, and identified as Staphylococcus sciuri, Citrobacter or Enterobacter, Enterococcus faecalis, and Bacillus subtilis, respectively. The first two isolates are pathogenic stains while the latter two are considered as GRAS (Generally Recognized As Safe). Fibrinolytic activity of E. faecalis, characterized and designated as BRCA-5, reached a maximum, when the producer was cultivated in Ml7 broth supplemented with 1.0% glucose for 5 h at 37$^{\circ}C$ with shaking at 180 rpm. Compared to commercial fibrinolytic enzymes, the cell-free culture supernatant of 5. faecaiis BRCA-5 showed stronger activity than plasmin and streptokinase, but similar degree of specific activity as nattokinase and urokinase, aud it also demonstrated anticoagulant and antiplatelet activity ex vivo. These features of E. faecalis make it an attractive agent as a biomaterial for health-promoting foods.

방선균이 생산하는 Chitinase의 성질에 관한 연구 (Studies on the Production and Properties of Chitinase Produced by Streptomyces sp.)

  • 김광현;서정훈
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제6권4호
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    • pp.149-153
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    • 1978
  • 1) 토양에서 분리한 Streptomyces 속중에 chitinase를 강하게 분비하는 균 일주를 분리선별하여 그 효소학적 성질 및 생성조건을 조사하였다. 2) 3$0^{\circ}C$에서 진탕배양하면서 경시적으로 본효소 생산을 조사한 바 45시간만에 최대 생산을 보였으며 또한 배지내에 glucose를 0.375% 첨가하였을 때 효소생산이 최대에 달하였으며 그 이상의 농도에서는 효소생산에 오히려 조해현상이 일어났다. 3) 본효소의 최적 pH는 7.0, 최적온도는 5$0^{\circ}C$ 였으며 pH 6.5~8.0에서 비교적 안정하였고 7$0^{\circ}C$에서 20분간 열처리에서도 안정하였다. 4) 금속 이온에 대한 영향은 Co$^{2+}$ 에 의해 활성화 되었고 Hg$^{2+}$, Ni$^{2+}$, Pb$^{2+}$ 등 중금속인 경우 $10^{-2}$ M 정도의 고농도에서 약 50%정도 실활하였다. 또한 본효소는 Aspergillus oryzae에 대해서도 비교적 강하게 작용하였다.

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매실을 이용한 식초산 발효에 관한 연구 (Studies on the Acetic Acid Fermentation Using Maesil Juice)

  • 김용두;강성훈;강성구
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.695-700
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    • 1996
  • 매실즙을 이용한 식초생산을 위하여 초산생성능이 우수한 초산균을 재래초로 부터 분리, 동정하고 매실 초 제조를 위한 최적 발효조건을 검토하였다. 재래초로부터 분리한 16균주 중 매실즙배지에서 가장 초산 생성능이 우수한 균주로 선정된 균주는 Acetobuter sp. VC-2로 동정 되었다. 이 균주의 증식 최적 조건을 살펴본 결과, 최적 온도는 3$0^{\circ}C$였으며 정치배양 보다는 진탕배양이 효과적으로 나타났다. 초산생성에 적합한 배지의 조성은 매실즙 30%, 초기 산도 2%, 에탄을 농도 6%, 포도당 0.2%, yeast extract 0.3%가 함유된 배지였다. 이와 같은 배양조건에서 매실식초는 8일째에 발효가 거의 완료되었으며, 이때 얻은 매실초의 총 산도는 6.5%였다. 주요 유기산으로는 acetic acid, citric acid, malic acid 및 tartaric acid였는데, 이들 함량은 4.28, 1.38, 0.48 및 0.30%로 각각 나타났다.

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Purification and Characterization of Chitinase from a New Species Strain, Pseudomonas sp. TKU008

  • Wang, San-Lang;Lin, Bo-Shyun;Liang, Tzu-Wen;Wang, Chuan-Lu;Wu, Pei-Chen;Liu, Je-Ruei
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제20권6호
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    • pp.1001-1005
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    • 2010
  • The chitinase-producing strain TKU008 was isolated from soil in Taiwan, and it was identified as a new species of Pseudomonas. The culture condition suitable for production of chitinase was found to be shaking at $30^{\circ}C$ for 4 days in 100 ml of medium containing 1% shrimp and crab shell powder, 0.1% $K_2HPO_4$, and 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ (pH 7). The TKU008 chitinase was suppressed by the simultaneously existing protease, which also showed the maximum activity at the fourth day of incubation. The molecular mass of the chitinase was estimated to be 40 kDa by SDS-PAGE. The optimum pH, optimum temperature, pH stability, and thermal stability of the chitinase were pH 7, $50^{\circ}C$, pH 6-7, and <$50^{\circ}C$, respectively. The chitinase was completely inhibited by $Mn^{2+}$ and $Cu^{2+}$. The results of peptide mass mapping showed that 11 tryptic peptides of the chitinase were identical to the chitinase CW from Bacillus cereus (GenBank Accession No. gi 45827175) with a 32% sequence coverage.

Aeromonas caviae No. S-76이 생산하는 Pullulanase의 정제, 특성 및 Maltosyl-$\beta$-Cyclodextrin의 합성 (Purification, Characterization of Pullulanase Produced by Aerornonas caviae No. S-76 and Synthesis of Maltosyl-$\beta$-Cyclodextrin)

  • 손천배;김명희;이명자
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권4호
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    • pp.362-367
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    • 1991
  • Pullulanase 생산균으로서 토양으로부터 분리한 Aeromonas caviae No.S-76을 진탕배양하여 얻은 조효소액을 ammonium sulfate 침전, DAEA Sephadex A-50 column chromatoraphy, Sephadex G-150 column chromatography에 의하여 정제하였다. 이때 수율은 21이었고 50배의 정제도를 가진 효소단백질을 얻었다. 정제효소는 SDS-polyacrylamide slab gel 정기영동에 의하여 분자량 118,000의 단일단백질이었고, 등전점은 4.3, 작용 최적온도는 $50^{\circ}C$, 작용 최적 pH는 8.0이었다. 또한 이효소는 $45^{\circ}C$ 이하, pH 6.0-90. 범위에서 안정성을 나타내었다. 이 효소를 $\beta$-cyclodextrin과 maltose의 고농도 혼합액에서 작용시켜 maltosyl-$\beta$-cyclodextrin을 합성하였다.

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