Split-flow thin (SPLITT) cell Fractionation(SF) is a technique that allows separation of particulates and macromolecules into two fractions. A gravitational SF(GSF) system is constructed and tested for its applicability for separation of dust and ground water particulates. When tested with polystyrene latex particles, experimental data were in good agreements with theory. The 9.8 and 21.4㎛ polystyrene particles were successuflly separated in a continuous mode, where the mixture is continuously fed into the GSF channel allowing separation in a large sacle. The GSF system is successfully applied to continuous separation of dust and ground water particels based on the sedimentation coefficient, which is closely related to the particle size. The separations were confirmed by microscopy and energy-dispersive X-ray (EDX) analysos.
음영 지역 해소 및 셀 커버리지 확대를 위하여 중계기를 활용하는 이동 통신 시스템이 널리 연구되고 있다. 본 논문에서는 중계기를 통해 다중 경로가 확보된 음영 지역에서 주파수 공간 블록 부호를 적용한 SC-FDMA(Single Carrier-Frequency Division Multiple Access) 전송 시스템을 제안하고, 중계기와 수신국 간의 신호 대 잡음 비를 기준으로 음영 지역을 위한 SC-FDMA 시스템의 성능을 비교한다. 중계기에서 복원된 전송 신호에 대하여 주파수 공간 블록 부호를 적용하여 재전송함으로서 중계기 기반 SC-FDMA 시스템의 수신 성능을 크게 향상시킬 수 있다. 본 논문에서 제안된 주파수 공간 블록 부호화 중계기 기반 SC-FDMA 시스템의 신호 대 잡음 비 성능이 단일 중계기 기반 SC-FDMA 시스템보다 $10^{-2}$ 심볼 오류율 수준에서 약 5 dB 개선됨을 실험을 통해 확인할 수 있다.
We have expressed GFP in Sf9 and Bm5 cells or Bombyx mori larvae by using Ac-Bm hybrid virus capable of replicating in both Bm5 and Sf9 cells. Genomic DNA of Ac-Bm hybrid virus expressing ${\beta}$-galactosidase was cotransfected with baculovirus transfer vector containing GFP gene, pBacPAK-GFP in Sf9 cells. The Ac-Bm hybrid virus harboring GFP was named as Ac-Bm hybrid virus-GFP. The Ac-Bm hybrid virus-GFP-infected insect cells were easily selected by detecting the emission of GFP from each well of cell culture dish on the UV illuminator. GFP produced by Ac-Bm hybrid virus-GFP in Sf9 and Bm5 cells or B. mori larvae was confirmed by SDS-PAGE and Western blot analysis using GFP antibody. In addition, B. mori larvae infected with Ac-Bm hybrid virus-GFP was apparently appeared fluorescence from the whole body at S days postinoculation. The fluorescence of GFP from the hemolymph and fat body of B. mori larvae infected with Ac-Bm hybrid virus-GFP was also observed by fluorescence microscope. In conclusion, our results demonstrated that in baculovirus expression vector system, use of Ac-Bm hybrid virus have an additional advantage of expanded host range for producing recombinant proteins.
나노결정질 다이아몬드 박막 증착을 위한 전처리 공정으로 $SF_6/O_2$ 유도결합 플라즈마를 이용하여 Si 기판 표면을 texturing하였다. $SF_6/O_2$ 플라즈마 texturing은 2~16 범위의 매우 넓은 정규화된 표면 조도 선택성을 제공할 수 있음을 확인하였다. Texturing된 Si 기판 표면의 나노 다이아몬드 입자 seeding 이후 기존 기계적 연마 전처리에 비해 현저히 향상된 ${\sim}6.5{\times}10^{10}cm^{-2}$의 높은 핵형성 밀도를 확보하였다.
Background: Keratinocytes form a physical barrier and act as an innate immune cell in skin. Keratinocytes secrete pro-inflammatory cytokines, such as interleukin (IL)-1β, resulting from inflammasome activation when exposed to ultraviolet (UV) irradiation. Korean Red Ginseng extracts (RGE) have been well-studied as modulators of inflammasome activation in immune cells, such as macrophages. In the study, we elucidated the role of RGE on the UV-mediated inflammasome activation in keratinocytes compared with that in macrophages. Methods: Human skin keratinocyte cells (HaCaT), human epidermal keratinocytes (HEK), human monocyte-like cells (THP-1), and mouse macrophages were treated with RGE or a saponin fraction (SF) or non-saponin fraction (NS) of RGE before and after UV irradiation. The secretion levels of IL-1β, as an indicator of inflammasome activation, were analyzed. Results: The treatment of RGE or SF in macrophages after UV irradiation inhibited IL-1β secretion, but similar treatment in HaCaT cells did not. However, the treatment of RGE or SF in HaCaT cells in the presence of poly I:C, a toll-like receptor (TLR) 3 ligand, before UV exposure elicited the inhibition of the IL-1β secretion. The inhibition was caused by the disruption by RGE or SF of the TLR mediating up-regulation of the pro-IL-1β and NLRP3 genes during the priming step. Conclusion: RGE and its saponins inhibit IL-1β secretion in response to UV exposure in both keratinocytes and macrophages. In particular, RGE treatment interrupted only the priming step in keratinocytes, although it did attenuate both the priming and activation steps in macrophages.
Objective: We increased the nuclear maturation rate of antral follicle derived oocytes by using a pre-in vitro maturation (IVM) culture system and improved the developmental potential of these porcine pathenotes by supplementing with melatonin. Furthermore, we investigated the expression patterns of genes involved in cumulus expansion (HAS2, PTGS2, TNFAIP6, and PTX3) derived from small and medium antral follicles before and after oocyte maturation. Methods: Only the cumulus oocyte-complexes (COCs) derived from small antral follicles were induced with [Pre-SF(+)hCG] or without [Pre-SF(-)hCG] the addition of human chorionic gonadotropin (hCG) during the last 7 h of the pre-IVM period before undergoing the regular culture system. The mature oocytes were investigated on embryonic development after parthenogenetic activation (PA). Melatonin (10-7 M) was supplemented during in vitro culture (IVC) to improve the developmental potential of these porcine pathenotes. Results: A pre-IVM culture system with hCG added during the last 7 h of the pre-IVM period [Pre-SF(+)hCG] effectively supported small antral follicle-derived oocytes and increased their nuclear maturation rate. The oocytes derived from medium antral follicles exhibited the highest nuclear maturation rate in a regular culture system. Compared with oocytes cultured in a regular culture system, those cultured in the pre-IVM culture system exhibited considerable overexpression of HAS2, PTGS2, and TNFAIP6. Porcine embryos treated with melatonin during IVC exhibited markedly improved quality and developmental competence after PA. Notably, melatonin supplementation during the IVM period can reduce and increase the levels of intracellular reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH), respectively. Conclusion: Our findings indicate that the Pre-SF(+)hCG culture system increases the nuclear maturation rate of small antral follicle-derived oocytes and the expression of genes involved in cumulus expansion. Melatonin supplementation during IVC may improve the quality and increase the blastocyst formation rate of porcine embryos. In addition, it can reduce and increase the levels of ROS and GSH, respectively, in mature oocytes, thus affecting subsequent embryos.
Objective: To explore the radiosensitization effect of overexpression of silent information regulator 6 (SIRT6) on A549 non-small cell lung cancer (NSCLC) cells. Methods: Adenovirus vector Ad-SIRT6 causing overexpression of SIRT6 was established. Western blotting and MTT assay were adopted to detect the level of SIRT6 protein and the inhibitory rate of A549 cell proliferation after different concentrations of adenovirus transduction (0, 25, 100, 200, and 400 pfu/cell) for 24 h. Control group, Ad-null group and Ad-SIRT6 group were designed in this experiment and virus concentration of the latter two groups was 200 pfu/cell. Colony formation assays were employed to test survival fraction (SF) of the 3 groups after 0, 2, 4, 6, 8, 10 X-ray irradiation. Flow cytometry was used to detect the status of cell cycle of 3 groups after 48 h of 4Gy X-ray irradiation and Western blotting was used to determine the expression of apoptosis-related genes of 3 groups after 48 h of 4GyX-ray irradiation. Results: In the range of 25~400 pfu/cell, the inhibitory rate of A549 cell proliferation increased as adenovirus concentration raised. The inhibitory rates under the concentrations of 0, 25, 100, 200, and 400 pfu/cell were 0%, $4.23{\pm}0.34%$, $12.7{\pm}2.57%$, $22.6{\pm}3.38%$, $32.2{\pm}3.22%$, $38.7{\pm}4.09%$ and $47.8{\pm}5.58%$ and there were significantly differences among groups (P<0.05). SF in Ad-SIRT6 group was lower than Ad-null and control groups after 4~10Gy X-ray irradiation (P<0.05) and the sensitization enhancement ratio (SER) was 1.35 when compared with control group. Moreover, after 48 h of 4Gy X-ray irradiation, there appeared a significant increase in G1-phase cell proportion, upregulated expression of the level of apoptosis-promoting genes (Bax and Cleaved caspase-3), but a obvious decline in S-phase and G2-phase cell proportion and a significant decrease of the level of apoptosis-inhibiting gene (Bal-2) in the Ad-SIRT6 group (P<0.05). Conclusion: The over-expression of adenovirus-mediated SIRT6, which has radiosensitization effect on A549 cells of NSCLC, can inhibit the proliferation of A549 cells and cause G0/G1 phase retardation as well as induce apoptosis of cells.
목 적: 원자력의학원에 설치되어 있는 MC50 사이클로트론에서 생성되는 중성자선의 의학적 이용을 위하여 생물학적 특성을 평가하고자 하였다. 대상 및 방법: 35 MeV 양성자를 15 mm 베릴륨 표적에 부딪혀서 생성된 중성자선에 대하여 물리적 방사선선량을 측정한 후 체외실험(in-vitro)을 하였다. EMT-6 세포주(cell line)를 이용하여 $0{\sim}5\;Gy$의 중성자선을 조사 후 생존분획(surviving fraction)을 구하였다. 또한 감마선의 효과를 피하기 위하여 납차폐를 한 후에 동일 조건에서 생존분획을 구하였다. 엑스선 실험에서는 0, 2, 5, 10, 15 Gy를 조사 후 생존분획을 측정하였다. 결 과: MC50의 중성자선은 조사야 $26{\times}26\;cm^2$, 전류 $10{\mu}A$, 깊이 2 cm에서 84%의 중성자와 16%의 감마선으로 구성되어 있었고, 총선량률은 9.25 cGy/min이었다. 엑스선을 이용하여 측정한 생존분획곡선은 선형이차함수모델 (linear quadratic model)을 적용하였을 때 ${\alpha}/{\beta}$비는 0.611 (${\alpha}=0.0204,\;{\beta}=0.0334,\;R^2=0.999$)이었다. 중성자선에 있어서 생존분획곡선은 저선량 영역에서 어깨영역(shoulder area)을 가지고 있었고, 모든 실험에서 선형이차함수모델에 잘 맞았다. ${\alpha}$의 평균값은 -0.315 (범위, $-0.254{\sim}-0.360$)였고, ${\beta}$값은 0.247 (범위, $0.220{\sim}0.262$)이었다. 납차폐를 하였을 때에도 생존분획곡선에서 어깨영역은 없어지지 않았다. 중성자선의 RBE (relative biological effectiveness) 값은 생존분획이 0.1일 때 $2.07{\sim}2.19$ 범위였고, 0.01일 때 $2.21{\sim}2.35$였다. 결 론: MC50에서 생성된 중성자선은 상당량의 감마선을 내포하고 있으며 이것이 생존분획곡선에서 어깨영역이 나타나는 데에 기여하였을 것이다. MC50의 중성자선의 RBE 값은 약 2.2였다.
근위축은 근육 단백질 합성의 저하와 근육 단백질의 분해 증가에 따른 근섬유의 감소에 의한 근육량이 감소되는 현상이다. 오미자(Schisandrae Fructus, fruits of Schisandra chinensis (Turcz.) Baillon)는 오랫동안 전통의학에서 강장제로서 널리 사용되어 왔다. 비록 다양한 질병 연관 오미자의 생리활성 효능이 폭넓게 연구되어져 왔으나 근육 질환 관련 연구는 매우 제한적으로 이루어져 왔다. 본 연구에서는 오미자 에탄올 추출물(SF)이 AMPK 활성인자 AICAR 처리에 의한 C2C12 근관세포의 근위축 모델계를 이용하여 근위축 억제 효능을 가지는지의 여부와 관련 기전의 해석을 시도하였다. AICAR 처리는 근단백질 분해 연관 ubiquitin ligase muscle RING finger-1 (MuRF-1)의 발현을 전사 수준에서 증가시켰고, MuRF-1 조절 전사인자의 하나인 forkhead box O3a (FoxO3a) 단백질의 인산화를 증가시켰으며, 이러한 변화는 근위축과 연관된 C2C12 근관세포의 형태적 변형과 동반된 현상이었다. 그러나 SF의 전처리에 의하여, AICAR에 의하여 유도된 근위축성 형태변화를 억제하였으며, MuRF-1의 발현과 FoxO3a의 활성화를 억제시켰다. 본 연구의 결과는 SF가 AICAR 처리에 의한 C2C12 근관세포의 근위축을 AMPK 및 FoxO3a 신호전달계 조절을 통하여 억제하였음을 보여주는 것으로 오미자는 근기능 향상을 위한 식의 약 소재로서의 개발 가능성이 매우 높음을 시사하여 준다.
목 적: 암환자의 방사선 치료 전 방사선에 대한 감수성을 미리 측정할 수 있다면 임상적으로 많은 도움이 될 것이다. 본 연구는 전 임상 실험을 통하여 MTT assay가 세포집락 측정기법과 비교해서 방사선 감수성을 예측할 수 있고, 직장암 환자의 조직에 사용할 수 있는지 가능성을 확인하고자 하였다. 대상 및 방법: 대장암 세포 주인 HCT-8, LoVo, CT-26, WiDr을 이용하여 세포집락 측정기법을 통해 세포생존곡선 및 2 Gy에서의 세포생존확률(SF2)을 구하였다. 세포 주 자체를 대상으로 MTT assay를 시행하는 실험(in vitro) 및 환자의 암 조직과 같은 상태를 만들기 위하여, 누드 마우스에 세포 주를 주입하여 암 조직을 형성한 후 in vitro와 같은 방식으로 MTT assay를 시행(ex vivo)하였다. 이 두 실험에 대한 흡광도 값에 따른 저해율(inhibition rate, %)을 구하였다. 결 과: $SF_2$ 및 세포생존곡선에 따르면 CT-26 및 LoVo가 HCT-8, WiDr에 비해 방사선에 민감하였다(p<0.05). In vitro MTT assay 결과 WiDr, HCT-8, LoVo와 CT-26의 방사선 저해율이 각각 17.3%, 21%, 30%, 56.5%를 나타내었다. 또한 ex vivo MTT assay의 저해율은 HCT-8, WiDr, LoVo와 CT-26에서 각각 23.5%, 26%, 38%, 53%를 나타내었다. 통계적인 차이를 감안하였을 때 세포생존곡선을 통해 얻은 방사선 감수성의 결과와 동일한 순서를 가졌다. 결 론: 4개의 세포 주의 방사선의 감수성의 순서가 세포집락 측정기법 및 in vitro와 ex vivo MTT assay 결과에서 거의 일치함을 보였다. 이는 직장암 환자에서 MTT assay를 통해 방사선 감수성을 예측할 수 있는 가능성을 제시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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