The sperm collection time, sex steroid hormones, and gonadal development of protandrous black porgy, Acanthopagrus schlegeli, acclimated in freshwater for more than 2 years were investigated to evaluate its reproductive capability. The gonadal development of black porgy reared in seawater and freshwater could each be classified into four successive stages. For black porgy reared in seawater (BSW) as the control, these were the growing (December to February), mature (February to March), spent (March to June), and degeneration and resting (July to December) stages; for black porgy reared in freshwater (BFW), these were the growing (November to January), mature (January to February), spent (February to May), degeneration and resting (June to November) stages. In both BSW and BFW, the plasma cortisol levels were the highest in March. The plasma testosterone (T) levels of BSW and BFW were the highest in March and February, respectively. The plasma estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$) levels did not differ significantly between BSW and BFW. The 11-ketotestosterone (11-KT) levels in the plasma of BSW and BFW were the highest in April. Sperm was collectible from March to June in BSW and from February to May in BFW. The results indicated that the gonadal maturation of BFW was about 1 month faster than that of BSW.
This study correlated changes in estradiol-l7$\beta$ ($E_2$), testosterone (T), 17$\alpha$,20-dihydroxy-4-pregnen-3-one (DHP), and vitellogenin (VTG) levels with changes in the gonadosomatic index (GSI) and ovarian histology during the annual reproductive cycle of the wild marbled sole, Limanda yokohamae. Synchronous oocyte development occurs in this fish. Ovary maturity was classified into four periods, based on histological observations: the spawning (December to February), post-spawning (February to April), recovery (May to August), and vitellogenic (September to November) periods. Seasonal changes in the GSI were inversely correlated with water temperatures and reflected the degree of ovarian maturity. Plasma VTG levels were correlated with changes in the GSI, which increased from September to a peak in January, and levels remained comparatively high until February. Estradiol-17$\beta$ was at baseline levels (<0.11 ng/mL) during the spring and summer, and peaked rapidly (1.55$\pm$0.445 ng/mL) from October to January. Plasma T and DHP levels had a similar profile; they rose markedly during the spawning period and remained low (or were not detectable) from spring through autumn. These data indicate that changes in plsama steroid hormones and VTG levels are correlated with the annual ovarian activity of the marbled sole. Based on these results and published reports, it appears that in this species DHP is the most important maturation-inducing steroid and that T is also related to final maturation.
Our previous research has identified granulin (grn) and p130 genes as sex steroid-inducible genes in the rat hypothalamus, which might be involved in sexual differentiation of the brain. Phthalate esters that are used as plasticizers and also found at low levels in foods such as dairy products are often mentioned as suspected endocrine disrupters. The purpose of the present study is to elucidate whether perinatal exposure to di-n-butyl phthalate (DBP), diisononyl phthalate (DINP) and di-2-ethylhexyl adipate (DEHA) affects hypothalamic sex steroid-inducible genes. The present study assessed the effects of perinatal exposure to DBP, DINP and DEHA on sex steroid hormones levels and hypothalamic gm and p130 mRNA expressions at postnatal day (PND) 3 and 7. Pregnant rats were fed a soy-free diet containing 20, 200, 2,000 and 10,000 ppm of DBP, 40, 400, 4,000 and 20,000 ppm of DINP, or 480, 2,400 and 12,000 ppm of DEHA from gestational day (GD) 15 to GD 3 or 7. At PND 3 and 7, perinatal exposure to these chemicals did not substantially affect serum concentrations of testosterone and estradiol. At PND 3, the expression of grn mRNA levels in males was decreased by DEHA, and that of p130 was decreased by DBP, DINP and DEHA, though the effects were not dose-dependent. At PND 7, the expression of gm gene in female pups was increased by higher doses of DBP and all the doses, except for 4,000 ppm, of DINP, while that in male pups decreased by 480 and 12,000 ppm of DEHA. Hypothalamic expression of p130 mRNA in males was increased by lower doses of DBP and all the doses of DINP, whereas that of females was decreased by 480 and 2,400 ppm of DEHA. These results suggest that these chemicals may affect the expression of gm and p130 genes by directly acting on the hypothalamus, thus leading to inappropriate expression of these genes.
Adipose tissue is one of the major endocrine gland. More recently, local production of steroids in adipocytes differentiated from mouse 3T3-L1 cell-line was reported. We hypothesized that rat adipocytes have steroidogenic machinery and the expression patterns of the components might be differentially regulated, depending on the distribution and sex. To verify this hypothesis, we collected the adipose tissues depot-and sex-specifically at postnatal day (PND) 30, and performed quantitative RT-PCRs. In overall aspects, the abundances of the transcripts were lower in the brown adipose of both sexes. $3{\beta}-HSD$ transcript levels in female abdominal and reproductive adipose, CYP17 transcript levels in female reproductive adipose, $17{\beta}-HSD$ transcript levels in female abdominal and reproductive adipose, and CYP19 transcript levels in female abdominal adipose were significantly lower than those of male counterparts. Similar to steroidogenic factors, the abundance of the $ER-{\alpha}$ transcripts were generally lower in the brown adipose of both sexes. $ER-{\beta}$ transcripts were more abundant in male white adipose depots than their female counterparts. The levels of LHR transcripts in female reproductive adipose were significantly higher than those of male counterpart. In conclusion, our study demonstrated that the expressions of steroidogenesis-related genes were depot- and sex-specifically occurred in the immature male and female rat adipose tissues. Our study suggested that the adipose tissues are not only targets but de novo synthesizing sites of sex steroid(s), though the synthesizing activities could be much less than in gonads. Further researches in this field will be helpful for understanding the adipose physiology and for medical application such as sex-specific steroid supplement therapies for older populations.
어류의 체내에서 성분화를 유도하는 물질이 성스테로이드호르몬(sex steroid hormone)이라는 사실이 잘 밝혀져 있으며, 성스테로이드 생합성 효소의 하나인 aromatase도 성분화에 직접적인 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 유전적으로 암컷인 틸라피아 자어(larvae) 집단을 aromatase 저해제(aromatase inhibitor, AI)인 Fadrozole로 침지 처리하여 초기 발생단계 중 어느 시기에 aromatase가 성분화 유도 작용을 하는 지를 조사하였다. Fadrozole 처리 유무 및 처리 농도의 차이는 부화 자어의 생존율에 유의한 차이를 유발하지 않았다. 하지만, 부화후 11일과 13일째에 고농도의 Fadrozole로 처리한 실험군의 자어는 유전적인 성이 암컷임에도 불구하고 유의하게 높은 비율의 자어가 수컷으로 분화하였다. 이 결과는 틸라피아 부화 자어가 스테로이드 생합성 효소의 저해에 아주 민감하게 반응하며, 이 종에서 aromatase의 주된 작용시기가 예상보다 훨씬 빠른 부화 후 11일 전후라는 사실을 보여준다. 또한 이상의 결과는 단 3시간의 AI 침지 처리가 유전적으로 설정되어 있는 성과 반대방향으로의 성분화를 유도하기에 충분할 정도로 강력함을 의미한다.
We studied steroid metabolites produced from red-spotted grouper ovarian follicles during maturation. Oocytes with 350-500 ㎛ diameter were in vitro incubated in the presence of [3H] 17α-hydroxyprogesterone as a precursor. Steroid metabolites were extracted from incubated media and oocytes. The extracts were separated and identified using thin layer chromatography, high performance liquid chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. The identified metabolites were androstenedione (A4), testosterone (T) and estrone (E1). The metabolites of A4 was dominant in all size of oocytes and it was the highest in 480 ㎛ diameter oocytes. The metabolites of two progestins, 17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one and 17α,20α-dihydroxy-4-pregnen-3-one were detected in the oocytes less than 480 ㎛ diameter although they were not identified definitely. In the oocytes of 480 ㎛ diameter, metabolite of progestin was the highest, and germinal vesicle (GV) was still in the middle of cytoplasm. In the oocytes of 500 ㎛ diameter, GV was began to migrate and the major metabolites were A4 and E1. The metabolite of E1 was detected in all size of oocytes and it was higher than that of E2. These results suggest that oocytes of 480 ㎛ diameter are the transitional stage involving steroidogenic shift to final oocyte maturation and potential function of E1 during maturation process.
In order to determine the role of dehydroepiandrosterone (DHEA), the important sex-steroid hormone precursor, in vascular reactivity in rats, animals were treated for two weeks with DHEA or sex hormones, and the vascorelaxant and contractile responses of isolated aorta were examined. DHEA diminished the acetylcholine (ACh)-induced relaxation in female rats, while the drug was without effect in males. Testoterone lowered the vasorelaxant activity to ACh in either sex. 17$\beta$-Estradiol enhanced ACh-induced vasorelaxation in male rats, but this female sex hormone did not influence in females. In male rats, the androgen receptor antagonist flutamide also enhanced vasorelaxant action of ACh. When the male rat aorta was incubated in vitro with a nitric oxide (NO) synthase inhibitor L-NAME, phenylephrine-induced contraction was greatly potentiated in DHEA-pretreated rats compared to control ones. The present results suggest that DHEA stimulates mainly androgen in female, but both androgen and estrogen in male rats. The participation of NO In the modulation of vascular reactivity with pretreated DHEA was also considered.
넙치의 전 암컷 집단의 생산을 위한 연구의 일환으로 실제 양식 어민이 손쉽게 이용할 수 있는 성전환 처리방법을 개발하고자, 부화 후 30일째부터 90일까지 60일간 $17{\beta}-methyltestoste-rone$ (MT)과 $estradiol-17{\beta}\;(E_2)$을 $1\~100$ ppb로 매일 2시간 동안 침지하여 성전환을 유도하였다. 부화 후 200일째의 실험군의 성비는 대조군에서 수컷이 $46.7\%$로 나타나 암수비가 거의 1 : 1이었으나, MT에 의한 수컷 유도율은 1 ppb 처리군이 $72.5\%$, 그리고 10 ppb 처리군이 $87.2\%$로 나타났고, 특히 100 ppb 처리군의 경우 $100\%$로 나타났다. $E_2$에 의한 암컷 유도율은 1 ppb 처리군에서 $75.5\%$ ,10 ppb 처리군에서 $91.9\%$였고, 가장 높은 농도인 100 ppb에서는 $97.2\%$로 나타났다. 호르몬 농도에 따른 각 처리군별 생존율 및 성장은 유의한 차이가 없었다(P>0.05).
Sex steroid hormones are key molecules to prepare the decidual response and their levels are important in this process. Imbalances of the levels of steroid hormones are cause of implantation failure and other diseases including physical weakness. Androgen replacement therapy or selective androgen receptor modulator are used to overcome various diseases but long-term use may cause of side effects. In previous report, it is suggested that the steroid hormonal complexes derived from pig enhance the proliferation of satellite cell. Therefore, to evaluate the possible usage of steroid hormonal complex derived from pig testis (tS-C), the effects of tS-C on uterine response were studied using the model of artificial decidua. tS-C did not disturb the rhythmical estrus cycle. Artificial-induced decidual response was normally induced in tS-C administered mice. The histological characters of the decidua of tS-C administered mice were not different from the vehicle. The expression patterns of molecular markers of decidua were not different between vehicle and tS-C group. Collectively these results suggested that tS-C does not disturb the uterine responsibility to the embryo. In addition, our results suggested that tS-C can be applied to overcome the various problems such as loss of muscle mass and anemia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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