Hormonal induction of sex reversal was examined by using sex steroid hormones in serranid fish, Epinephelus septemfasciatus. Young fish were collected from the coastal area of Cheju Island, and reared for 2 years before fish were used for the experiments. Without any hormonal treatment, gonads of fish ($1,000\~2,800$ g in body weight) were occupied by oocytes of the perinucleolus stage and bundles of protogonial cells in the area of germinal epithelium. When the induction of sex reversal was attempted by daily oral administration of $17\alpha$-methyltestosterone (0.5 mg/kg fish) for 90 days, active spermatogenesis was induced, and spermatogonia and spermatocytes and spermatids were appeared in all gonads we examined. However, after daily, oral treatment of $17\beta$-estradiol (0.5 mg/kg fish) to. 50 days with the following injection of human chorionic gonadotrophin ($1,000\~1,500$ IU/kg fish) mature oocytes were not induced in fish gonad.
Methoxychlor (MXC) was developed to be a replacement for the banned pesticide DDT. HPTE [2,2-bis (p-hydroxyphenyl)-1,1,1-trichloroethane], which is an in vivo metabolite of MXC, has strong oestrogenic and anti-androgenic effects. MXC and HPTE are thought to produce potentially adverse effects by acting through oestrogen and androgen receptors. Of the two, HPTE binds to sex-steroid receptors with greater affinity, and it inhibits testosterone biosynthesis in Leydig cells by inhibiting cholesterol side-chain cleavage enzyme activity and cholesterol utilisation. In a previous study, MXC was shown to induce Leydig cell apoptosis by decreasing testosterone concentrations. I focused on the effects of MXC on male mice that resulted from interactions with sex-steroid hormone receptors. Sex-steroid hormones affect other organs including the kidney and liver. Accordingly, I hypothesised that MXC can act through sex-steroid receptors to produce adverse effects on the testis, kidney and liver, and I designed our experiments to confirm the different effects of MXC exposure on the male reproductive system, kidney and liver. In these experiments, I used pre-pubescent ICR mice; the puberty period in ICR mice is from postnatal day (PND) 45 to PND60. I treated the experimental group with 0, 100, 200, 400 mg MXC/kg b.w. delivered by an intra-peritoneal injection with sesame oil used as vehicle for 4 weeks. At the end of the experiment, the mice were sacrificed under anaesthesia. The testes and accessory reproductive organs were collected, weighed and prepared for histological investigation. I performed a chemiluminescence immune assay to observe the serum levels of testosterone, LH and FSH. Blood biochemical determination was also performed to check for other effects. There were no significant differences in our histological observations or relative organ weights. Serum testosterone levels were decreased in a dose-dependent manner; a greater dose resulted in the production of less testosterone. Compared to the control group, testosterone concentrations differed in the 200 and 400 mg/kg dosage groups. In conclusion, I observed markedly negative effects of MXC exposure on testosterone concentrations in pre-pubescent male mice. From our biochemical determinations, I observed some changes that indicate renal and hepatic failure. Together, these data suggest that MXC produces adverse effects on the reproductive system, kidney and liver.
Sex hormones are important metabolites in vertebrates' development and reproduction. For rapid screening sex hormones, matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry (MS) is one of the promising analytical platforms, but MALDI MS faces many challenges in detecting steroids such as low ionization efficiency and matrix background interference. One potential strategy to overcome matrix interference in the low m/z region is using a cyclodextrin (CD)-supported matrix for steroid analysis since CD-supported matrixes are known to effectively suppress matrix-related ion signals. In this study, we aimed to find the optimal CD-supported matrix for the analysis of the nonderivatized sex steroids. Our results showed that the ${\alpha}CD$-supported 2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB) matrix efficiently ionized all three major classes of sex hormones, estrogens, androgens, and progestagens, with low or no matrix background and also with high sensitivity. In addition, the ${\alpha}CD$-supported DHB matrix mainly generated molecular ions or protonated ions of sex hormones, and this enabled us to obtain information-rich tandem mass spectra which potentially lead to unambiguous identification of steroid species from complex metabolite mixtures.
Hwang, In Joon;Kim, Sung Yeon;Kim, Hyung Bae;Baek, Hea Ja
한국발생생물학회지:발생과생식
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제16권4호
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pp.279-287
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2012
We investigated the changes in plasma sex steroid hormones, testosterone (T), estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$), 17,$20{\beta}$-dihydroxy-4-pregnen-3-one ($17{\alpha}20{\beta}P$), 11-ketotestosterone (11KT) and cortisol levels from ribbed gunnel, Dictyosoma burgeri in associated with annual reproductive cycle. The gonadosomatic index (GSI) of females increased from November, peaked in February and decreased rapidly from March. The GSI of males also increased from November, peaked in January and then decreased gradually. In females, $E_2$ levels increased and remained high from December to February. The levels of T showed a similar tendency and correlated ($r_s$=0.898, p<0.01) with $E_2$ levels. The levels of $17{\alpha}20{\beta}P$ increased rapidly in February ($4.78{\pm}1.01ng/ml$) and peaked in July ($5.08{\pm}0.65ng/ml$). Cortisol level was peaked in March and correlated with $17{\alpha}20{\beta}P$ levels ($r_s$=0.696, p<0.01). In males, the levels of T was peaked in January and then decreased rapidly. The levels of 11KT were remained high from October to January. On the other hand, the levels of $17{\alpha}20{\beta}P$ fluctuated during reproductive cycle. These results suggest that plasma sex steroids in ribbed gunnels have annual periodicity, and that cortisol may involve in maturation of females.
Park, Woo-Dong;Ko, Hye-Yeon;Kim, Dae-Jung;Lee, Cheul-Ho;Sohn, Young-Chang
한국양식학회지
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제20권3호
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pp.154-159
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2007
Manchurian trout (Brachymystax lenok) is an endangered fish species in East Asia including the Korean peninsula. To establish a method for artificial propagation and to improve our understanding of the reproduction in the species, we have produced recombinant gonadotropins, follicle-stimulating hormone (r-mtFSH) and luteinizing hormone (r-mtLH), which may play central roles in reproductive activities. In the present study, the biological activities of the recombinant hormones were analyzed by gonadosomatic index (GSI), ovarian follicle diameter, and sex steroid levels in mature rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). In the 6th day post-injection, FSH-injected fish were slightly decreased in the GSI value, although there were no significant differences among those of control, r-mtFSH, and r-mtLH treatments. Injection of the r-mtFSH increased follicle diameters significantly as compared with those of control- and r-mtLH-injected fish. The plasma steroid levels showed wide differences in the groups at 1, 3, or 6th day post-injection. Despite the variable steroid levels, three individuals receiving either r-mtFSH or r-mtLH showed a great increase in a maturation-inducing steroid, $17{\alpha},20{beta}$-dihydroxy-4-pregnen-3-one, at 3 and 6 days. Taken together, these results suggest that biological efficacies of the recombinant FSH and LH should be further studied in the Manchurian trout.
Lee, E.J.;Bajracharya, P.;Jang, E.J.;Chang, J.S.;Lee, H.J.;Hong, S.K.;Choi, I.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제23권5호
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pp.649-658
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2010
Myogenic satellite cells (MSCs) are adult stem cells that activate and differentiate into myotubes. These stem cells are multipotent as they transdifferentiate into adipocyte-like cells, nerve cells and osteocytes. The effects of steroid hormones ($E_2$ and testosterone) were studied as a further step toward understanding the mechanism of MSCs proliferation and differentiation. In this study, MSCs were grown continuously for 87 days, implying that there may be a group of MSCs that continue to proliferate rather than undergoing differentiation. Isolated MSCs were cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Medium supplemented with adult male, female or castrated bovine serum to observe the effect of steroid hormones on MSC proliferation. Cell proliferation was the highest in cultures supplemented with male serum followed by female and castrated serum. The positive effect of male hormone on MSC proliferation was confirmed by the observation of testosterone-mediated increased proliferation of cells cultured in medium supplemented with castrated serum. Furthermore, steroid hormone treatment of MSCs increased lipid accumulation in myotubes. Oil-Red-O staining showed that 17${\beta}$-estradiol ($E_2$) treatment avidly increased lipid accumulation, followed by $E_2$+testosterone and testosterone alone. To our knowledge, this is the first report of lipid accumulation in myotubes due to steroids in the absence of an adipogenic environment, and the effect of steroid hormones on cell proliferation using different types of adult bovine serum, a natural hormonal system. In conclusion, we found that sex steroids affect MSCs proliferation and differentiation, and lipid accumulation in myotubes.
We investigated the changes in body weight (BW), plasma sex steroid hormone profiles, and testicular development of cultured male eel Anguilla japonica during an artificial maturation process. Eels that received weekly intraperitoneal injections of eel's ringer solution containing human chronic gonadotropin (HCG) were examined. In the ringer-treated control, BW changes decreased slowly during the experimental period. Plasma testosterone (T), 11-ketotestosterone (11-KT) and $17{\alpha},\;20{\beta}$-dihydroxy-4-pregnen-3-one (DHP) levels In the control remained low and did not show significant changes. Moreover, all germ cells in the testes of the control were spermatogonia. In the HCG-treated male eels, however, BW changes increased gradually from the fifth week and then decreased slowly. The plasma T level increased rapidly (p<0.05) in the second week and then decreased slowly. The plasma 11-KT level increased dramatically (p<0.05) in the second week and was maintained until the end of the experiment. The plasma DHP level increased progressively from the second week and peaked in the eighth week (p<0.05). The testes of HCG-treated male eels were more developed than those of the control; most were at the spermatozoa and spermatid stages and showed active spermiation. Thus, spermatogenesis and spermiation in the cultured eel can be induced by repeated injections of HCG.
The objective of this study is to investigate the changes in concentrations of blood urea nitrogen (BUN) and sex steroid hormones, such as estrogen, progesterone, and testosterone in Korean cattle (Hanwoo) with reproductive disorders and to examine the relationship between BUN and body condition score (BCS) in Hanwoo. The concentration of BUN was 16.2 mg/dl, 17.8 mg/dl, 15.1 mg/dl, 17.9 mg/dl, and 28.3mg/dl in pregnancy, repeat breeding, follicular cyst, luteal cyst, and ovarian atrophy, respectively. In Hanwoo with BCS $2.0{\sim}2.9$, $3.0{\sim}3.5$ and $3.6{\sim}4.0$, the concentration of BUN was 15.8 mg/dl, 17.0 mg/dl, and 17.6 mg/dl, respectively. Fluoroimmunoassay showed that serum estrogen and progesterone levels were decreased in reproductive disorders Hanwoo, such as ovarian atrophy, endometritis, and weak estrus. The testosterone level was significantly decreased in Hanwoo with reproductive disorders compared to that in pregnant Hanwoo ($0.02{\sim}0.03\;ng/ml$ vs 0.13 ng/ml, p<0.05). The progesterone and estrogen concentrations in follicular fluid obtained from ovary with follicular cyst were significantly higher (p<0.05) than those in normal follicle fluid. These results show that there is no relationship between BUN and BCS in Hanwoo, and the concentration of sex steroid hormone in serum and follicular fluid are changed in reproductive disorders Hanwoo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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