Many literatures focus on the biological relevance and the identification of biomarkers for disease activity assessment while less attention has been paid to the development of standard procedures for sample preparation and storage based on liquid chromatography technique. The influencing factors including protein precipitation, storage temperature, storage time, and reconstitution by ultra pure water were analyzed employing HPLC-DAD. The effects were investigated from five participants over three months by principal components analysis (PCA) and the values of percent changes (PC). The samples with protein precipitation might slow the rate of bacterial enzymatic conversion. After protein precipitation, the average PC of urine samples ($0.136{\pm}0.013$, n = 5) is relatively less than that of the serum samples ($0.173{\pm}0.026$, n = 5) for three months. Minimal effects on metabolic profiles of serum and urine (PC < 0.15) are reasonable for metabolomic studies after protein precipitation and storage at $-20^{\circ}C$ for two months.
Casein or soybean protein was subjected to the reaction with caffeic acid-tyrosinase system at $30{\sim}35^{\circ}C$ pH 6.8 with aeration for 5 hr. The effects of the modified proteins on male Wistar rats were studied by pair-feeding of a cholesterol-free diet for 2 weeks. Significant decrease in protein digestibility for the rats fed with the modified proteins was observed. The feeding of modified protein from casein caused an enlargement of caecum. The concentration of serum cholesterol and triglyceride in the rats fed with modified proteins were mostly unchanged against the rats fed with untreated proteins. These results suggest that the decrease in protein digestibility induced by enzymic browning-reaction did not cause the decrease in concentration of serum cholesterol.
Rats were administered zearalenone (ZEA) via gavage at dosages of 0, 1, 5, and 30 mg/kg for 36 days. On treatment day 8, inactivated porcine parvovirus vaccine (Vac) was injected intraperitoneally. Antibody production against porcine parvovirus was then measured as a function of ZEA treatment. Compared to the vaccine alone, ZEA treatment, with or without Vac, decreased the serum level of IgG. The level of IgM decreased in all ZEA groups at day 22, but the decrease was sustained only in the medium-dose ZEA group at day 36. The level of IgA was unchanged in the Vac only and ZEA groups at day 22, but was decreased in the 5 mg/kg ZEA plus Vac group compared to the Vac only group at day 36. The level of IgE was decreased by all doses of ZEA at day 22, but was unaffected in ZEA plus Vac groups compared to the Vac only group. The levels of IL-1 in the thymus and spleen; INF-${\gamma}$ in serum; IL-2, IL-6, and IL-10 in the thymus; and IL-10 and IFN-${\gamma}$ in the spleen decreased after ZEA administration. Furthermore, the levels of IL-$1{\beta}$ in the spleen and mesenteric lymph node, IL-$1{\beta}$ in the thymus, IL-2 in the thymus and spleen, IL-6 in the thymus, IL-10 and IFN-${\gamma}$ in the spleen, and GM-CSF and TNF-${\alpha}$ in the thymus decreased after vaccination in rats exposed to ZEA. In conclusion, these results suggest that ZEA exposure via drinking water can cause an immunosuppressive effect by decreasing immunoglobulins in serum and cytokines in lymphoid organs.
Fajri, Aidil;Goh, Eunseo;Lee, Sanghyuk;Lee, Hye Jin
Applied Chemistry for Engineering
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v.30
no.4
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pp.429-434
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2019
A lateral flow immunoassay platform utilizing antibody functionalized water soluble CdSe/ZnS semiconductor quantum dots (QDs) was developed for the analysis of human serum amyloid A-1 (hSAA1) in a buffer solution. hSAA1 was chosen as a target protein because it is regarded as a potential biomarker associated with early diagnosis and prognosis in patients of lung cancer. The immunoassay strip on a nitrocellulose membrane was fabricated by spraying two lines composed of a test line with a monoclonal antibody against hSAA1 (10G1) (anti hSAA1) and a control line of anti-chicken IgY. While the CdSe/ZnS QDs synthesized in an organic phase were transferred to a water phase by ligand exchange using carboxylic acid modified alkane thiol. The QDs was then conjugated to monoclonal antibody against hSAA1 (14F8) [anti hSAA1 (14F8)] and used as a fluorescent detection probe. The sequential lateral flow of hSAA1 in different concentration and QDs-anti hSAA1 (14F8) complex allowed to form the surface sandwich complex of anti hSAA1 (10G1)/hSAA1/QD-anti hSAA1 (14F8), which was then analyzed using fluorescence microscope. A 100 nM concentration of hSAA1 protein can be detected by naked eyes under an optimized lateral flow buffer condition with a sensing time of 5 mins.
The Hexane Extract (HE) and Ethyl Acetate Soluble Fraction of the Methanolic Extract (EASFME) of the fruit pulp of Momordica dioica Roxb. (Cucurbitaceae) was evaluated for its anti-hepatotoxic activity in rats. Acute hepatotoxicity was induced by administering paracetamol (2 g/kg, p.o.) for 3 days. The extracts, at a dose of 400 mg/kg (p.o.) administered for 7 days exhibited a significant therapeutic effect by lowering Serum Glutamate Oxaloacetate Transaminase (SGOT), Serum Glutamate Pyruvate Transaminase (SGPT), Serum Alkaline Phosphatase (ALP) and Serum bilirubin and increasing the serum protein levels. These biochemical observations were supplemented by histopathological examination of the liver sections. The activity of extract was also comparable to the standard drug Silymarin, which is a well-known natural anti-hepatotoxic drug.
A sensitive competitive heterogeneous bioluminescence immunoassay for serotonin was developed using photoprotein, aequorin as a label for the first time with the optimal assay conditions; especially, serotoninavidin conjugate was prepared by Mannich reaction and the synthetic process of serotonin-avidin conjugate was optimized by controlling the initial molar ratios of serotonin, formaldehyde and avidin (1:12,000:25). The developed bioluminescence immunoassay for serotonin showed good sensitivity (LOD of 0.68 ng/mL) with wide area of dynamic range ($5.0{\times}10^{-10}\;M\sim5.0{\times}10^{-7}\;M$). (cf. the range for serotonin in human blood serum is $151{\pm}45\;ng$/mL). In addition, cross-reactivity studies demonstrated that 5-methoxytryptamine showed some cross-reactivity (28.0%), whereas 3-methylindole, melatonin and 5-hydroxylindole-3-acetic acid showed no crossreactivity, and good recoveries were obtained in serum. Thus, this developed method provides a good tool to monitor serotonin in serum.
Reference interval is critical for interpreting laboratory results, monitoring response to therapy and predicting the prognosis of the patients in clinical settings. The aim of the present study was to update established reference intervals for routine hematologic and serum chemistry values for a population of clinically healthy dogs (range, 1-8 years) seen in an animal hospital. Blood was obtained by venipuncture while animals were physically restrained, and samples were analyzed for 9 chemistries on MS9-5H (Melot Schloesing Lab, France) and 6 hematology on Vet Test 8008 (IDEXX, USA). Data from 105 dogs (52 males and 53 females) for hematology and 113 dogs (37 males and 76 females) for chemistry were used to determine reference intervals using the parametric, nonparametric and bootstrap methods. Prior to analysis, all parameters were tested for normal distribution using Anderson-Darling criterion. Of the 9 biochemical analytes, alkaline phosphatase, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, creatinine, total protein, and glucose concentrations did not fit normal distribution for both original and transformed data. All but eosinophil count satisfied normal distribution for either original or transformed data. Parametric method can be used for original cholesterol concentrations, RBC, WBC, and neutrophil counts. This technique can also be used for power-transformed values of blood urea nitrogen concentrations and for logarithm of lymphocyte and monocyte counts. Non-parametric or bootstrap method was the preferred choice for the remaining 7 biochemical parameters and eosinophil count as they did not follow normal distributions. All three statistical techniques performed in similar reference intervals. When establishing reference intervals for clinical laboratory data, it is essential to assess the distribution of the original data to increase the accuracy of the interval, and non-parametric or bootstrap methods are of alternative for the data that do not fit normal distribution.
The interaction of a polyoxometal (POM), K6SiW11Co(H2O)O39.10H2O (K6) as a Keggin, with human serum albumin (HSA) was studied by different methods and techniques. Binding studies show two sets of binding sites for interaction of POM to HSA. Binding analysis and isothermal calorimetery revealed that, the first set of binding site has lower number of bound ligand per mole of protein (ν), lower Hill constant (n), higher binding constant (K), more negative entropy (ΔS) and more electrostatic interaction in comparison to the second set of binding site. In addition, differential scanning calorimetery (DSC) and spectrophotometery data showed that, there are two energetic domains. The first domain is less stable (lower Tm and Cp) which corresponds to the tail segment of HSA and another with more stability is related to the head segment of HSA. Polyoxometal also decreases the stability of protein as Tm, secondary and tertiary structure as well as quenching of the fluorescence decrease. On other hand, perturbations in tertiary structure are more than secondary structure.
Holstein cows being raised in the Kangweon district were examined on the values of blood chemistry in infertile cows. The results obtained were as follows; 1. Total serum protein was 7.52$\pm$0.45g/100ml 2. Serum albumin was 3.06$\pm$0.28g/100ml 3. In values of serum globulin, $\alpha$1-globulin, $\alpha$2- globulin, $\beta$-globulin and ${\gamma}$-globulin were 0.79$\pm$0.14, 0.60$\pm$0.10, 0.86$\pm$0.13 and 2.21$\pm$0.35ng/100ml, respectively. 4. A/G ration was 0.69$\pm$0.09 5. Total cholesterol in serum was 119.73$\pm$34.52mg/100ml 6. Blood glucose was 55.24$\pm$6.46mg/100ml 7. Serum calcium was 9.27$\pm$0.87mg/100ml 8. Serum inorganic phosphorus was 5.74$\pm$0.86mg/100ml 9. Serum glutamic oxalacetic transaminase was 47.90$\pm$11.02I$\mu$/l 10. Serum glutamic pyruvic transaminase was 14.20$\pm$3.02I$\mu$/l
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2001.05a
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pp.148-149
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2001
Protein inhibitors are proteins or peptides capable of inhibiting catalytic activities of proteolytic enzymes. They are grouped primarily as either serine, cysteine, aspartic or metallto-proteinase inhibitors. Pretense inhibitors have been hewn since the end of the last century in nematodes and human blood serum, and their ubiquitous distribution in microorganisms, animals and plants has been widely documented. (omitted)
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