In fermentation of dairy products, bifidobacteria is used in conjunction with other lactic acid bacteria, such as L. acidophilus, L. bulgaricus and S. thermophilus, rendering the enumeration of bifidobacteria difficult. In order to develop optimum conditions for selective enumeration of bifidobacteria, we examined MIC of several antibiotics against various bifidobacteria and other lactic acid bacteria. The growth of L. acidophilus, L. bulgaricus and S. thermophilus were inhibited by lithium chloride at the concentration of less than 4 mg/ml, whereas growth inhibition of bifidobacteria occurred at concentrations over 6-10 mg/ml. Tetracycline and chloramphenicol were also found to selectively inhibit growth of other lactic acid bacteria at the concentration of 1-3 $\mu$g/ml. Addition of 6 mg/ml lithium chloride, 1 $\mu$g/ml, tetracycline or 3 $\mu$g/ml chloramphenicol to medium was found to be optimal for selective enumeration of bifidobacteria. By using these three inhibitory chemicals in the TPY medium, higher number of bifidobacteria were selectively isolated than with NPNL agar and LP agar.
Eubacterium is one of the predominant bacteria in the human large intestine. currently ES (Eubacterium Selective) medium developed by T. Mitsuoka is commonly used as a selective medium. neomycin sulfate which is one of the selective agents of ES medium inhibited about 50% of the growth of Eubacterium isolated, whereas malidixic acid inhibited only 5% while inhibiting other intestinal bacteria. NES medium which replaced neomycin with nalidixic acid in the ES medium was designed and shown to be better for the isolation and enumeration of Eubacterium sp. than ES medium.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.25
no.5
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pp.754-760
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1996
Selective media for isolation and enumeration of lactic acid bacteria from kimchi were compared using 36 strains of lactic acid bacteria from kimchi and dairy products. Among the selective media, KF Streptococcus agar showed the best result for the selection of Enterococcus group and Pediococus group, and M-17 agar with pH indicator for Lactococcus group, the m-LBS agar for Lactobacillus group, and PES-3 agar for Leuconostoc group.
Kim, Eung-Ryool;Cho, Young-Hee;Kim, Yong-Hee;Park, Soon-Ok;Woo, Gun-Jo;Chun, Ho-Nam
Food Science of Animal Resources
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v.30
no.1
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pp.154-162
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2010
This study was carried out to compare the efficacy and selectivity of TOS and BS media for enumeration of bifidobacteria in commercial fermented milk products. First, bifidobacteria was isolated from 20 fermented milk products, and all isolated bifidobacteria were identified by genomic technology as Bifidobacterium lactis. The two media significantly differed from each other with regard to the recovery of B. lactis, that is, the recovery of this organism was as much as 6 logs lower on BS medium than on TOS. When the concentration of BS solution (mixture of paromomycin sulfate, neomycin, sodium propionate, and lithium chloride) used in BS medium was reduced to 50% (BS50), a relatively high percentage recovery of bifidobacteria from pure cultures was achieved. Susceptibility tests to antibiotics and tests for selective agents for the isolated bifidobacteria and lactic acid bacteria were conducted. The BS solution inhibited some lactic acid bacteria and Bifidobacterium species, while mupirocin (MU) suppressed the growth of all tested lactic acid bacteria but not Bifidobacterium. As compared with BS50 medium, TOS with or without MU showed good bifidobacteria recovery and readily distinguishable colonies; in particular, TOS supplemented with MU had a high selectivity for bifidobacteria. In conclusion, all results suggested that TOS medium with or without MU was found to be suitable for selective enumeration of bifidobacteria from mixed cultures in fermented milk, and better in that capacity than BS medium.
The maintenance of physiological activity during dilution is very critical for the accurate enumeration of Vibrio spp. in marine samples. We investigated the effect of various diluents on the recovery of Vibrio parahaemolyticus using the direct plate counting and most probable number (MPN) methods. The effects of NaCl (0.85 and 3%) and pH (from 6.6 to 7.4) in diluents based on distilled water or phosphate buffered saline (PBS) were evaluated with three V. parahaemolyticus strains. PBS-3% NaCl (pH 6.6), as opposed to PBS, was the most effective diluent at maintaining viable cell numbers up to 2 log CFU/g during dilution for direct plate counting using on thiosulfate citrate bile salts sucrose (TCBS) selective agar, as well as minimizing the difference in cell numbers between TCBS and non-selective nutrient agar. It also increased counts of V parahaemolyticus inoculated into oysters relative to PBS (p<0.01), suggesting that PBS-3% NaCl (PH 6.6) can reduce the problem of underestimating V. parhaemolyticus counts using PBS alone.
Colony blot hybridization using a VVHP DNA probe derived from the sequence of the hemolysin gene, vvhA, was specific in identifying all V. vulnificus strains, thereby, eliminating the need for any additional phenotypic identification. The colony blot hybridization procedure revealed a sensitivity and broad applicability sufficient for the direct enumeration of V. vulnificus in various natural samples, without the use of enrichment or culturing on selective medis. V. vulnificus was detected in all natural samples collected during August and May at concentrations ranging from $2.1{\times}10^1\;to\;4.0{\times}10^3$ organisms per ml. However, during November and February, when the mean temperatures of the seawater were $12^{\circ}C$ and $5^{\circ}C$, respectively, V. vulnificus was not detected in any natural samples.
Vancomycin inhibited the growth of the most large intestinal bacteria other than Bacteroides sp. and E. coli. Since Bacteroides are predominant compared with E. coli in the large intestinal tract of the adult, vancomycin-added medium(VA) was shown to be an effective selective medium for Bacteroides. VA showed comparable or better selectivity for Bacteroides sp. to NBGT which is being used currently as a most frequently used selective medium for Bacteroides in Japan.
In order to develop a new improved selective medium for the Bifidobacterium sp. from the human fecal samples, one hundred eight Bifidobacterium strains were isolated and identified. Sensitivity test for the antibiotics and antimetabolites and test for the specific substrate were performed to obtain basic data for the development of the Bifidobacterium selective medium. TOS(transgalactosylated oligosaccharide) was shown to be preferentially used by Bifidobacterium sp.. Sodium propionate promoted the growth of Bifidobacterium while inhibiting other intestinal bacteria. Upon these results, TP medium was designed and shown to be very effective for the selection of Bifidobacterium and better than Mitsuoka BS medium.
To avoid ambiguity in counting the number of colony, about 1,500 of colonies grown on B. cereus selective agar plates were grouped into 12 types by morphological difference and then identified by biochemical and 16S rDNA nucleotide sequence. Among them, seven colony types with 11 to 15 mm diameters of halo were identified as B. cereus or B. cereus subsp. cytotoxis. Five mm sized colonies with no halo, which have not been considered as B. cereus according to the manufacturer's manual, were identified as B. cereus. A colony type with double halos of only 6 mm in diameter was also B. cereus. Other three types were proven to be Enterococcus sp., Brevibacillus sp., and B. subtilis, respectively. PCR results showed that only 9 types that are identified as B. cereus strains harbor at least one of B. cereus toxin genes.
Baird-Parker agar with egg yolk/tellurite emulsion (BPA) is widely accepted as a medium for the enu-meration of Staphylococcus aureus in foods. Howerver, it is not vompletely selective and colonies of other genera of species could be similar to those of Staphylococcus aureus. Moreover, the strains of Staphylococcus aureus that are lecithinase negatrive could go unnoticed. Both facts could affect the counts. The aim of this study was to dtermine whether the enumeration of the colonies with the typical morphol-ogy of Staphylococcus aureus on BPA is sufficien to quantity this species in poultry meat. Forty chiken carcasses were tested for Staphylococcus aureus by surface plating using BPA, Results indicate that the predictiv value of the morphoogy of the colonies of BPA is 85.71% and 68.42% for typical and atypical colonies of Staphylococcus aureus, respectively. However, Staphylococcus aureus counts (after identification) and counts of typical colonies did not show any significant differences(P>0.05) and are significantly(P<0.001) correlated (r=0.996).These results suggest that , for screening purposes. enumeration of Staphylococcus aureus from poultry meat does not require any identification of stains. resulting in a saving of time and money.
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