대하 아가미의 형태와 미세구조를 광학현미경과 전자현미경으로 조사하였다. 대하는 수지형 아가미를 가진 다. 아가미는 출새관과 입새관을 구분하는 세로 격벽을 가진다. 각각의 새판은 전자밀도가 다른 다층구조의 큐터클로 싸여 있다. 새판 기저세포들은 편평형이며, 전자밀도가 높은 세포질을 가진다. 상피세포층은 단층으로 큰 핵을 가진 편평상피로 구성된다. 새판의 기둥구조는 세로방향의 미세소관들과 측면 membrane interdigitation을 가진다. AB-PAS음성 분비세포들은 다세포선의 형태이다. 활성화된 선에서 각 세포의 경계부는 뚜렷하지 않으며, 세포질에는 활면소포체, 미토콘드리아, 전자밀도가 낮으며 막을 가진 분비소포들과 granular rosettes를 가진다. 비 활성화된 선에서는 세포 경계가 뚜렷하며, 세포질에서는 전자밀도가 높은 다수의 작은 과립들이 산재한다. 그리고 alcian blue에 양성인 단세포 분비세포들은 세포질에 발달된 다수의 골지체와 조면소포체들을 함유한다.
In order to diagnose canine heartworm infection by antigen capture ELISA, the crude somatic(S), partial somatic(below 45kDa) and excretory/secretory(E/S) antigen of adult heartworm were identified and the antigenicity was examined by silver stain, immunoblot and ELISA. Then, production of monoclonal antibody to specific antigen carried out in this experiment. The bands to S antigen and E/S antigen were recognized between 10 and 200kDa and common bands were recognized strongly 14, 18, 28, 43kDa by silver stain. By western blot analysis, fractions to S antigen were recognized 14, 16, 18, 20, 24, 28, 32, 43, 50, 55kDa, etc. and only a 14kDa to E/S antigen in positive sera which were positive in modified Knott's test and necropsy. In ELISA, the positive sera reacted to antigens(SA, $SA_{45}$, E/S) were significantly different from negative sera by Student's t-test(p<0.05). Four hybridoma cell lines(14, 16, 17, 32kDa) than produce specific monoclonal antibodies for these antigens were obtained by immunizing BALB/c mice with a partially purified somatic antigen (below 45kDa) preparation, by fusing spleen cells with SP2/O cell myeloma cells, and by screening cell culture supernatants for antibody. In these results, it was confirmed that partial somatic antigen(below 45kDa) or E/S antigen can be used for serologic diagnosis of heartworm infection and monoclonal antibody reacting with specific antigen(14kDa) can be used for antigen capture ELISA in prepatent period of canine heartworm infection.
Objective: To determine the localization, expression, and function of Toll-like receptors (TLRs) in fallopian tube epithelial cells. Methods: The localization of TLRs in fallopian tube epithelial cells was investigated by immunostaining. Surprisingly, the intensity of staining was not equal in the secretory and ciliated cells. After primary cell culture of fallopian tube epithelial cells, ring cloning was used to isolate colonies of ciliated epithelial cells, distinct from non-ciliated epithelial cells. The expression of TLRs 1-10 was examined by quantitative real-time polymerase chain reaction, and protein localization was confirmed by immunostaining. The function of the TLRs was determined by interleukin (IL)-6 and IL-8 production in response to TLR2, TLR3, TLR5, TLR7, and TLR9 ligands. Results: Fallopian tube epithelial cells expressed TLRs 1-10 in a cell-type-specific manner. Exposing fallopian tube epithelial cells to TLR2, TLR3, TLR5, TLR7, and TLR9 agonists induced the secretion of proinflammatory cytokines such as IL-6 and IL-8. Conclusion: Our findings suggest that TLR expression in the fallopian tubes is cell-type-specific. According to our results, ciliated cells may play more effective role than non-ciliated cells in the innate immune defense of the fallopian tubes, and in interactions with gametes and embryos.
Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) plays an important role in promoting the invasion and metastasis of a range of cancer cells. However, there are no reports of the expression and function of SLPI in oral carcinoma cells. In this study, the oral carcinoma cell line KB was used to determine whether SLPI affects the proliferation, migration and invasion of oral carcinoma cells. RT-PCR and Western blotting revealed high levels of endogenous SLPI expression in KB cells as well as a strong increase in SLPI secretion after wounding compared to immortalized normal oral keratinocytes (INOK). The wound healing assay revealed more migration of KB cells than INOK cells, and the SLPI treatment increased the migration of KB cells. KB cell proliferation was increased significantly by the SLPI protein but decreased by SLPI-siRNA. SLPI strongly increased the migration and invasion of KB cells. On the other hand, SLPI-siRNA decreased the migration and invasion of KB cells. This suggests that SLPI plays an important role in the metastasis of oral carcinoma cells.
Congenital diarrheal disorders (CDDs) with genetic etiology are uncommon hereditary intestinal diseases characterized by chronic, life-threatening, intractable watery diarrhea that starts in infancy. CDDs can be mechanistically divided into osmotic and secretory diarrhea. Congenital tufting enteropathy (CTE), also known as intestinal epithelial dysplasia, is a type of secretory CDD. CTE is a rare autosomal recessive enteropathy that presents with intractable neonatal-onset diarrhea, intestinal failure, severe malnutrition, and parenteral nutrition dependence. Villous atrophy of the intestinal epithelium, crypt hyperplasia, and irregularity of surface enterocytes are the specific pathological findings of CTE. The small intestine and occasionally the colonic mucosa include focal epithelial tufts. In 2008, Sivagnanam et al. discovered that mutations in the epithelial cell adhesion molecule (EpCAM, MIM# 185535) were the genetic cause of CTE (MIM# 613217). More than a hundred mutations have been reported to date. Furthermore, mutations in the serine peptidase inhibitor Kunitz type 2 (SPINT2, MIM# 605124) have been linked to syndromic CTE. In this study, we report the case of a 17-month-old male infant with congenital diarrhea. Despite extensive etiological workup, no etiology could be established before admission to our center. The patient died 15 hours after being admitted to our center in a metabolically decompensated state, probably due to a delay in admission and diagnosis. Molecular autopsy with exome sequencing revealed a previously reported homozygous missense variant, c.757G>A, in EpCAM, which was confirmed by histopathological examination.
Background: The Hypothalamo-Pituitary-Adrenal (HPA) axis is an important regulator for the body's stress response. As a primary stress responsive system, HPA-axis secretes various neurotransmitters, hormones, and cytokines, which regulates the immune system. Natural killer (NK) cell which is plays an important role in the innate immune response, is specially decreased their numbers and loose cytolytic activity in response to stress. However, the effect of HPA-axis secreted proteins on NK cell activity has not been defined. Herein, we studied the effect of adrenal secreted adiponectin on NK cell cytotoxicity. Adiponectin which is well-known metabolic control protein, plays important roles in various diseases, including hypertension, cardiovascular diseases, inflammatory disorders, and cancer. Methods: Signal sequence trap was used to find stress novel secretory protein from HP A-axis. Selected adiponectin was treated mouse mature primary NK cells and then examined the effect of adiponectin to NK cell cytotoxicity and cytokine expression level. Results: We found that adiponectin which is secreted from adrenal gland, suppress IL-2 induced NK cell cytotoxicity. And also investigated cytolytic cytokines are suppressed by adiponectin. Conclusion: These data suggest that adiponectin inhibites NK cell cytotoxicity via suppression of cytotoxicity related target gene.
Objectives : This study purposed to research the inhibitory effect of Berberidis Ramulus on the liver cancer. Methods : A total extract of Berberidis Ramulus decoction were prepared. Through the measurement of the cell proliferation, apoptosis, morphology and cytokine level from the extracts, the influence on HepG2 cell were compared. Results : Berberidis Ramulus extract significantly inhibited the proliferation, increased the apoptosis, decreased the TGF-${\beta}$ gene expression and the K-RAS gene expression, significantly increased the level of TNF-${\alpha}$ secretion and increased the rates of IFN-${\gamma}$ secretory cells. Conclusion : It is suggested that Berberidis Ramulus extract turned out to have anti-cancer effects on HepG2 cell.
Immunositmulation effects of the mice fed with the cell lysate of Lactobacillus plantarum isolated from Kimchi were studied. The mice group fed with cell lysate was different from the control group on the degree of immune responses, e.g. 1) proliferation of splenocytes and Peyer's patch cells, 2) production of nitric oxide (NO) by peritoneal macrophages, 3) production of intestinal secretory lgA (slgA), 4) variation of TNF-${\alpha}$ and IL-2 concentration in blood, 5) production of specific lgG against sheep red blood cells. A general enhancement in enteric and systemic immune responses was observed with a simple oral administration of immunostimulators. With the oral feeding of L. plantarum, not only the total amount of gut secretion antibody, but also the binding capacity of antibodies to the enteric microorganisms including L. plantarum was increased. These experimental results clearly showed that the oral feeding of immunostimulators gave multifunctional effects on the mucosal and systemic immune systems of mice.
This study was conducted to investigate the combined effects of VFA composition of rumen fluid and heat exposure (30${\pm}$2$^{\circ}C$) on the general clinical view and insulin secretory response to glucose in sheep. The total infusion of nutrients was examined in sheep via the technique of continuous alimentation. Four adult Suffolk sheep fitted with a permanent ruminal cannula and a simple T-shaped duodenal cannula were used. A peristaltic pump was used to infuse the solutions of volatile fatty acid triglycerides (VFA-TG) consisting of 70 triacetin : 20 tripropionin : 10 tributyrin (low propionin division: LP) and 50 triacetin : 40 tripropionin : 10 tributyrin (high propionin division: HP) on the basis of energy and minerals into the rumen, and casein solution into the duodenum. The effects of heat exposure and type of the levels of VFA-TG solutions on the insulin secretory response to glucose in sheep were investigated by using hyperglycemic clamp (HGC) technique. The results obtained are summarized as follows: 1. During the heat exposure (latter half of the infusion period), respiration rate, heart rate and rectal temperature increased (P<0.01, P<0.01, P<0.05), but the levels of VFA-TG solutions (LP and HP division) did not affect the general clinical view except for the heart rate. 2. In the HGC technique, glucose infusion rate (GIR) and mean plasma insulin increments (MPII) tended to be ower in the heat exposure than in the thermoneutral environment, but no significant difference was found among the treatments. GIR and MPII remained unchanged between the levels of VFA-TG solutions. 3. In the HGC technique, ratio of MPII to GIR (MPII/GIR) which represents pancreatic ${\beta}$-cell response to glucose stimulation remained unchanged among the treatments.
Jeong, Ji Young;Son, Younghae;Kim, Bo-Young;Eo, Seong-Kug;Rhim, Byung-Yong;Kim, Koanhoi
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제19권6호
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pp.549-555
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2015
We attempted to investigate molecular mechanisms underlying phenotypic change of vascular smooth muscle cells (VSMCs) by determining signaling molecules involved in chemokine production. Treatment of human aortic smooth muscle cells (HAoSMCs) with thrombin resulted not only in elevated transcription of the (C-C motif) ligand 11 (CCL11) gene but also in enhanced secretion of CCL11 protein. Co-treatment of HAoSMCs with GF109230X, an inhibitor of protein kinase C, or GW5074, an inhibitor of Raf-1 kinase, caused inhibition of ERK1/2 phosphorylation and significantly attenuated expression of CCL11 at transcriptional and protein levels induced by thrombin. Both Akt phosphorylation and CCL11 expression induced by thrombin were attenuated in the presence of pertussis toxin (PTX), an inhibitor of Gi protein-coupled receptor, or LY294002, a PI3K inhibitor. In addition, thrombin-induced production of CCL11 was significantly attenuated by pharmacological inhibition of Akt or MEK which phosphorylates ERK1/2. These results indicate that thrombin is likely to promote expression of CCL11 via PKC/Raf-1/ERK1/2 and PTX-sensitive protease-activated receptors /PI3K/Akt pathways in HAoSMCs. We propose that multiple signaling pathways are involved in change of VSMCs to a secretory phenotype.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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