This study was carried out to isolate antagonistic bacterium against Sclerotium cepivorum causing Allium fistulosum white rot. Total of 146 strains were isolated from A. fistulosum roots. The isolates were screened for antagonism to S. cepivorum and the isolated strain No. AL-1 was selected among these bacteria. It was identified as Serratia plymuthica based on morphological and physiological characteristics according to the Bergey's mannual of systematic bacteriology and 16S rDNA sequences methods. Serratia plymuthica AL-1 showed broad spectrum of antifungal activities against plant pathogenic fungi Alternaria altrata, Colletotrichum gleosporioids, Phoma sp., Rhizoctonia solani, Sclerotinia sclerotiorum, Stemphylium solani, Fusarium oxysporium niveum but not inhibited Didymella bryoniae. When S. plymuthica AL-1 cultivated in the TSB medium containing 1% colloidal chitin, the high molecular fraction (>10 kDa) have chitinase activity (3.2 units/ml) and the low molecular fraction (<10 kDa) have not chitinase activity. Oppositely, after heat treatment (80℃ for 30 min) of the cultivation supernatant, the high molecular fractions have not antifungal activity but the low molecular fractions have antifungal activity.
Kim, Byung-Ryun;Hahm, Soo-Sang;Han, Kwang-Seop;Kim, Jong-Tae;Park, In-Hee
한국균학회소식:학술대회논문집
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2016.05a
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pp.25-25
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2016
Biological control has many advantages as a disease control method, particularly when compared with pesticides. One of the most important benefits is that biological control is an environmental friendly method and does not introduce pollutants into the environment. Another great advantage of this method is its selectivity. Selectivity is the important factor regarding the balance of agricultural ecosystems because a great damage to non target species can lead to the restriction of natural enemies' populations. The objective of this research was to evaluate the effects of several different bacterial isolates on the efficacy of biological control of soil borne diseases. White rot caused by Sclerotium cepivorum was reported to be severe disease of garlic and chive. The antifungal bacteria Burkholderia pyrrocinia CAB08106-4 was tested in field bioassays for its ability to suppress white rot disease. In field tests, B. pyrrocinia CAB08106-4 isolates suppressed white rot in garlic and chive, with the average control efficacies of 69.6% and 58.9%, respectively. In addition, when a culture filtrate of B. pyrrocinia CAB08106-4 was sprayed onto wounded garlic bulbs after inoculation with a Penicillium hirstum spore suspension in a cold storage room ($-2^{\circ}C$), blue mold disease on garlic bulbs was suppressed, with a control efficacy of 79.2%. These results suggested that B. pyrrocinia CAB08106-4 isolates could be used as effective biological control agents against both soil-borne and post-harvest diseases of Liliaceae. Chinese cabbage clubroot caused by Plasmodiophora brassicae was found to be highly virulent in Chinese cabbage, turnips, and cabbage. In this study, the endophytic bacterium Flavobacterium hercynium EPB-C313, which was isolated from Chinese cabbage tissues, was investigated for its antimicrobial activity by inactivating resting spores and its control effects on clubroot disease using bioassays. The bacterial cells, culture solutions, and culture filtrates of F. hercynium EPB-C313 inactivated the resting spores of P. brassicae, with the control efficacies of 90.4%, 36.8%, and 26.0%, respectively. Complex treatments greatly enhanced the control efficacy by 63.7% in a field of 50% diseased plants by incorporating pellets containing organic matter and F. hercynium EPB-C313 in soil, drenching seedlings with a culture solution of F. hercynium EPB-C313, and drenching soil for 10 days after planting. Soft rot caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum was reported to be severe disease to Chinese cabbage in spring seasons. The antifungal bacterium, Bacillus sp. CAB12243-2 suppresses the soft rot disease on Chinese cabbage with 73.0% control efficacy in greenhouse assay. This isolate will increase the utilization of rhizobacteria species as biocontrol agents against soft rot disease of vegetable crops. Sclerotinia rot caused by Sclerotinia sclerotiorum has been reported on lettuce during winter. An antifungal isolate of Pseudomonas corrugata CAB07024-3 was tested in field bioassays for its ability to suppress scleritinia rot. This antagonistic microorganism showed four-year average effects of 63.1% of the control in the same field. Furthermore, P. corrugata CAB07024-3 has a wide antifungal spectrum against plant pathogens, including Sclerotinia sclerotiorum, Sclerotium cepivorum, Botrytis cinerea, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophotra capsici, and Pythium myriotylum.
This study was conducted to evaluate the effect of crop rotation cultivation on the suppression of garlic white rot caused by Sclerotium cepivorum in the mini plot ($2^*1^*$ 0.5 m). Six crops, soybean, sesame, mung bean, squash, crotalaria and spring onion, were previously transplanted in the mini-plots infested with S. cepivorum before garlics were planted. After cultivation of the previous crops, garlic was sown in the mini-plot. Non-cultivation plots and non-infested plots with white rot pathogen were used as control. The effect of crop rotation cultivation on the suppression of garlic white rot was evaluated by investigating comparatively the disease incidence (the percentage of infected plants) and yields. As a results, infection rate of garlic white rot was recorded lower in the non-infested plot, crotalaria and soybean cultivation than in the plot of the other crop cultivation. Especially when squash was previously cultivated and garlics were planted in 2013, infection rate of garlic white was recorded the highest score. In 2014, the infection rate of garlic white were low in the garlic on soybean, crotalaria and spring onion treatment whereas it was high in squash treatment, as well. In 2013, garlic yield was the highest in no inoculation plot, followed by crotalaria, soybean, no crop cultivation, sesami, mungbean, squash cultivation plot. In 2014, the yield in the plot of crotalaria and soybean was much higher than that in no inoculation plot. Based on above-described results, it is considered that soybean-garlic and crotalaria-garlic cultivation system can be good crop rotation systems to control garlic white rot.
Sclerotium rolfsii causing southern blight on numerous vegetable and fruit crops was isolated from stems of chili peppers showing wilting symptoms. The pathogen was identified by morphological observation and DNA sequencing analysis of ITS region. To select an effective fungicide for control of southern blight, we investigated the inhibition efficacy of thirty fungicides included in nine groups of fungicides with different mechanisms of action. A fungal growth inhibition assay was conducted through an agar dilution method by using mycelial discs and sclerotia of the pathogen as inoculum, respectively. When mycelial discs were used as an inoculum, several fungicides showed good inhibitory activity against the mycelial growth of S. rolfsii 12-6. All DMI fungicides tested had a good inhibition except for prochloraz which had low inhibitory effect. All strobilurin fungicides tested except for kresoxim-methyl and all SDHI fungicides tested except for boscalid and fluopyram, had a good inhibition. Also, fludioxonil, a protective fungicide and fluazinam had a good inhibitory effect. Interestingly, when sclerotia were used as an inoculum, inhibition efficacy was increased for fluopyram, a SDHI fungicide, and for some protective fungicides such as propineb, chlorothalonil, dithianon, and folpet. All the fungicides selected in this study should be tested in the field for their control activities against stem rot for practical use in chili pepper cultivation.
Kim, Yong-Ki;Kwon, Mi-Kyung;Shim, Hong-Sik;Yeh, Wan-Hae
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.120.1-120
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2003
White rot on Allium species recently had a high incidence as increased cultivating areas of tropical garlic types in Korea. Two types of Sclerotium have been known as causal agents producing different size and shapes of sclerotia in infested fields. We developed a new method for isolation of two types of sclerotia from infested field soils that can be used for ecological study of sclerotium spp. and establishment of control strategy. Soil samples collected from heavily infested fields were evenly mixed and placed on a automatic sieve shaker connected with tap water. After 10 min. of shaking, residues on 0.5mm and 0.25mm sieve were separately collected and suspended with 70% sugar solution, which method floats sclerotia in aqueous layer. Then, floated fraction was carefully separated and mixed with a same volume of 1% sodium hypochlorite solution to differentiate with organic materials. This method provides direct count of sclerotia under dissecting microscopy.
Disease incidence of Codonopsis lanceolata was surveyed at the major cultivating fields in Chonbuk province in 1996 to 1997. The main diseases of Codonopsis lanceolata were ovserved as leaf spot caused by Septoria codonopsis, anthracnose by Glomerella cingulata, brown leaf spot by Cercospora sp., rust by Coleosporium koreanum, powdery mildew by Erysiphe sp., Fusarium wilt caused by Fusarium oxyporum, and white root rot by Sclerotium rolfsii. Anthracnose, leaf spot and brown leaf spot occurred severely on leaves from early July to late August. They were caused early fallen leaves. Fusarium wilt and white root rot occurred severely on stem and below the soil line in late August. They resulted in withering to death or chlorosis and fallen of leaves. Disease incidence of Codonopsis lanceolata was also substantially different in occurrence with a method of cultivation in late growth stage. Fusarium wilt and white root rot were more severe with a method of no support cultivation than those with a method of support cultivation with a stick. Fusarium wilt occurred 48.8% in a method of no support cultivation but 3.1% in a method of support cultivation with a stick. And white root rot occurred 18.9% in a method of no support cultivation but 0.3% in a method of no support cultivation with a stick. Thus, it proved that soil-borne diseases could be controlled support cultivation with a stick.
In order to control garlic white rot (Sclerotium cepivorum), which threatens garlic production in farmers fields, soil solarization (solar sterilization), sclerotia germination inducers and effective microorganisms as biological control agents, and chemical fungicides have been used. Among them, fungicide has been largely used to reduce garlic white rot. In this study, the antifungal activities of five fungicides, prochloraz(a.i. 25%, EC), tebuconazole (a.i. 25%, WP), flutolanil (a.i. 15%, EC), iminoctadine tris-albesilate (a.i. 40%, WP) and isoprothiolane (a.i. 40%, EC) with different mode of action, in mycelial growth, sclerotia germination and sclerotia production, were tested. The inhibitory effects of the 5 fungicides on the mycelial growth, and sclerotia germination and production of garlic white rot pathogen (S. cepivorum T11-2) were investigated on potato dextrose agar (PDA) and their control efficacies were evaluated on garlic flakes. There was no mycelial growth of S. cepivorum T11-2 on PDA amended with $0.8{\mu}g\;mL^{-1}$ of prochloraz or $100{\mu}g\;mL^{-1}$ of tebuconazole. Also prochloraz and tebuconazole inhibited perfectively the sclerotia germination of the pathogen at 10 and $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$, respectively. In spite of a very low activity of isoprothiolane in mycelial growth and sclerotia germination of S. cepivorum T11-2, it showed a good inhibitory activity against sclerotia production of S. cepivorum T11-2 on PDA amended with $1.67{\mu}g\;mL^{-1}$. Prochloraz, tebuconazole and flutolanil showed above 70% of control value when they were treated at $100{\mu}g\;mL^{-1}$ using the garlic flake cutting-method.
Two lactic acid bacteria (LAB) designated J02 and J13 were recovered from fermented vegetables based on their ability to suppress soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) on radish. J02 and J13 were identified as Lactobacillus pentosus and Leuconostoc fallax, respectively. The ability of J02 and J13 to suppress plant diseases is highly dependent on chitosan. LAB alone has no effect and chitosan alone has only a moderate effect on disease reduction. However, J02 or J13 broth cultures plus chitosan display a strong inhibitory effect against plant pathogens and significantly reduces disease severity. LAB strains after being cultured in fish surimi (agricultural waste) and glycerol or sucrose-containing medium and mixed with chitosan, reduce three cruciferous vegetable diseases, including cabbage black spot caused by Alternaria brassicicola, black rot caused by Xanthomonas campestris pv. campestris, and soft rot caused by Pcc. Experimental trials reveal that multiple applications are more effective than a single application. In-vitro assays also reveal the J02/chitosan mixture is antagonistic against Colletotrichum higginsianum, Sclerotium rolfsii, and Fusarium oxysporum f. sp. rapae, indicating a broad-spectrum activity of LAB/chitosan. Overall, our results indicate that a synergistic combination of LAB and chitosan offers a promising approach to biocontrol.
In an attempt to develop effective biocontrol system for management of stem rot disease in groundnut, 57 bacterial isolates and 13 isolates of Trichoderma spp. were evaluated for their antagonistic activity against Sclerotium rolfsii. The antagonists were selected based on their ability to inhibit the external growth of S. rolfsii from infected groundnut seeds. Four isolates of Pseudomonas fluorescens, GB 4, GB 8, GB 10 and GB 27, and T. viride pq 1 were identified as potent antagonists of S. rolfsii. T. viride pq 1 produced extracellular chitinase and parasitized the mycelium of S. rolfsii. Under controlled environment conditions, P. fluorescens GB 10, GB 27, T. viride pq 1 and the systemic fungicide Thiram(equation omitted) reduced the mortality of S. rolfsii inoculated to groundnut seedlings by 58.0%, 55.9%, 70.0% and 25.9%, respectively compared to control. In vitro growth of P. fluorescens GB 10 and GB 27 was compatible with T. viride pq 1 and Thiram(equation omitted). Integrated use of these two bacterial isolates with T. viride pq 1 or Thiram(equation omitted) improved their biocontrol efficacy. Combined application of either GB 10 or GB 27 with T. viride pq 1 was significantly effective than that with Thiram(equation omitted) in protecting groundnut seedlings from stem rot infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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