An allium rhizobacterium Serratia plymuthica AL-1 was previously selected as a biocontrol agent of allium white rot. The chitinase from S. plymuthica AL-1 produced in medium containing colloidal chitin was purified by ammonium sulfate precipitation (40~70%), affinity adsorption, column chromatography on DEAE-sephadex A-50 and sephadex C-200 gel filtration. The enzyme was purified 10.8-fold with a yield of 7.3% from the starting culture broth. The purified chtinase gave a single band on sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, it's molecular weight was estimated to be 55 kDa. The optimum pH and temperature of the purified enzyme were pH 5.5 and $55^{\circ}C$, respectively and it is stable up to $50^{\circ}C$ and maintains around 90% of its activity for 60min. The enzyme were activated by $Ca^{2+}$, $Mn^{2+}$ and $Mg^{2+}$ and inhibited by $Cu^{2+}$, SDS, $\rho$-CMB, MIA, respectively. The purified chitinase showed broad spectrum of antifungal activities against plant pathogenic fungi Sclerotium cepivoruin, Alternana alternnta, Colletotrichum glceosporioidrs, Phoma sp., Sclerotinia sclerotiorum, Stemphylium solani, Fusarium oxysporium f. sp. niveum but rarely inhibited Phytophthora capsici and Pythium ultimum.. The purified chitinase from S. plymuthica AL-1 caused swelling, lysis, deceleration and degradation of the hyphal tips of S. sczerotiorum causing allium white rot. It suggest that S. prymuthica AL-1 chitinase play an important part in the bifunctional chitinase / lysozyme activity.
Lee, Sang Yeob;Hong, Sung Kee;Choi, In Hu;Chon, Yong Dal;Kim, Jeong Jun;Han, Ji Hee;Kim, Wan Gyu
The Korean Journal of Mycology
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v.40
no.4
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pp.282-287
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2012
Sclerotium cepivorum is a causal agent of white rot disease on different plants including Allium species such as garlic. A mycoparasite, Paraconiothyrium minitans S134 was selected for biological control of sclerotinia rot of garlic caused by S. cepivorum. The experiment was carried out in a garlic field in Taean from October in 2011 to June in 2012. Spore suspension of the mycoparasite was treated twice onto soil surface around garlic plants in sowing in 2011 and late Feb. in 2012, and disease rating was made June in 2012. Incidence of white rot in the twice-application plot of the mycoparasite ($5{\times}10^6$ spores/mL) and in the fluquinconazole (WP)-treated plot was 6.8% and 0.4%, respectively, whereas that of control was 19.5%. As the results, P. minitans S134 could be a prospective biofungicide for biological control of white rot of garlic.
In order to control garlic white rot (Sclerotium cepivorum), which threatens garlic production in farmers fields, soil solarization (solar sterilization), sclerotia germination inducers and effective microorganisms as biological control agents, and chemical fungicides have been used. Among them, fungicide has been largely used to reduce garlic white rot. In this study, the antifungal activities of five fungicides, prochloraz(a.i. 25%, EC), tebuconazole (a.i. 25%, WP), flutolanil (a.i. 15%, EC), iminoctadine tris-albesilate (a.i. 40%, WP) and isoprothiolane (a.i. 40%, EC) with different mode of action, in mycelial growth, sclerotia germination and sclerotia production, were tested. The inhibitory effects of the 5 fungicides on the mycelial growth, and sclerotia germination and production of garlic white rot pathogen (S. cepivorum T11-2) were investigated on potato dextrose agar (PDA) and their control efficacies were evaluated on garlic flakes. There was no mycelial growth of S. cepivorum T11-2 on PDA amended with $0.8{\mu}g\;mL^{-1}$ of prochloraz or $100{\mu}g\;mL^{-1}$ of tebuconazole. Also prochloraz and tebuconazole inhibited perfectively the sclerotia germination of the pathogen at 10 and $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$, respectively. In spite of a very low activity of isoprothiolane in mycelial growth and sclerotia germination of S. cepivorum T11-2, it showed a good inhibitory activity against sclerotia production of S. cepivorum T11-2 on PDA amended with $1.67{\mu}g\;mL^{-1}$. Prochloraz, tebuconazole and flutolanil showed above 70% of control value when they were treated at $100{\mu}g\;mL^{-1}$ using the garlic flake cutting-method.
This study was conducted to investigate the control possibility of garlic white rot causing severe yield losses of Allium species and cultivars using cultural practices such as optimal sowing date and burial depth, and lime application. Inoculum density in infested field soil was investigated at different soil depth, and that on the diseased plant debris was done. Inoculum density and recovery ratio of white rot pathogen of garlic was highly different between two species of Sclerotium cepivorum forming comparatively small sclerotia and Sclerotium sp. forming comparatively large ones. It was confirmed that S. cepivorum formed more sclerotia on bulbs of garlic than S. sp., and sclerotial recovery of S. cepivorum was higher than that of S. sp. Inoculum density of white rot pathogen in the infested field at garlic seeding period ranged from one to thirteen sclerotia per 30 g soil. Inoculum density of white rot pathogen decreased remarkably with increasing soil depth and above 95% of sclerotia were distributed within 5 cm of soil depth. Disease severity of white rot was higher on slightly planted garlics than deeply-planted ones. Garlic seed bulbs infected by white rot pathogens were confirmed to be one of main inoculum sources of white rot in the field and the disease incidences caused by garlic seed transmission showed big differences among garlic varieties. When nine garlic varieties harvested from infested plots were sown in the field, highly susceptible varieties, ‘Wando’, ‘Daeseo’, ‘Namdo’ and ‘Kodang’ showed high disease incidences, whereas other five varieties were not infected at all. It was confirmed that white rot occurred higher on early-sown garlics, before middle October, than on late-sown ones, after late October. Meanwhile, increasing application rate of lime ranged from 100 to 300 g reduced disease severity of white rot.
Han, Kwang Seop;Kim, Buyng Ryun;Kim, Jong Tae;Hahm, Soo Sang;Hong, Ki Heung;Chung, Chang Kook;Nam, Yun Gyu;Yu, Seung Hun;Choi, Jae Eul
Research in Plant Disease
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v.19
no.1
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pp.21-24
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2013
White rot caused by Sclerotium cepivorum was reported to be severe soil-born disease on garlic. Disease progress of white rot of garlic (Allium sativum L.) was investigated during the growing season of 2009 to 2011 at Taean and Seosan areas. The white rot disease on bulb began to occur from late April and peaked in late May. The antifungal bacteria, Burkholderia pyrrocinia CAB08106-4 was tested in field bioassay for suppression of white rot disease. As a result of the nucleotide sequence of the gene 16S rRNA, CAB008106-4 strain used in this study has been identified as B. pyrrocinia. B. pyrrocinia CAB080106-4 isolate suppressed the white rot with 69.6% control efficacy in field test. These results suggested that B. pyrrocinia CAB08106-4 isolate could be an effective biological control agent against white rot of garlic.
To control the pepper anthracnose caused by Colletotrichum acutatum, antifungal bacterium strains which was selected among bacterium from natural soil, was tested the antimicrobial activity against various pathogens and its control efficacy on anthracnose disease in the fields. We confirmed that antagonistic activity of CAB13001 strain to pathogens such as Sclerotinia cepivorum, Sclerotinia sclerotium and Botrytis cinerea including Colletotrichum acutatum was remarkable superior with the dual culture method in the artificial medium. In vitro bioassay using the green pepper fruit, CAB13001 strain suppressed the lesion development of Anthracnose disease, and its control value compared to the untreated one was 82.4% on pepper fruit in field test. These results suggested that CAB13001 strain could be a very useful biological control agents to anthracnose disease caused by air born plant pathogens of pepper. By the way, analysis of nucleotide sequence of the gene 16S rDNA, antagonistic bacterium CAB13001 strain used in this study was identified as Burkholderia lata.
This study was conducted to evaluate the effect of crop rotation cultivation on the suppression of garlic white rot caused by Sclerotium cepivorum in the mini plot ($2^*1^*$ 0.5 m). Six crops, soybean, sesame, mung bean, squash, crotalaria and spring onion, were previously transplanted in the mini-plots infested with S. cepivorum before garlics were planted. After cultivation of the previous crops, garlic was sown in the mini-plot. Non-cultivation plots and non-infested plots with white rot pathogen were used as control. The effect of crop rotation cultivation on the suppression of garlic white rot was evaluated by investigating comparatively the disease incidence (the percentage of infected plants) and yields. As a results, infection rate of garlic white rot was recorded lower in the non-infested plot, crotalaria and soybean cultivation than in the plot of the other crop cultivation. Especially when squash was previously cultivated and garlics were planted in 2013, infection rate of garlic white was recorded the highest score. In 2014, the infection rate of garlic white were low in the garlic on soybean, crotalaria and spring onion treatment whereas it was high in squash treatment, as well. In 2013, garlic yield was the highest in no inoculation plot, followed by crotalaria, soybean, no crop cultivation, sesami, mungbean, squash cultivation plot. In 2014, the yield in the plot of crotalaria and soybean was much higher than that in no inoculation plot. Based on above-described results, it is considered that soybean-garlic and crotalaria-garlic cultivation system can be good crop rotation systems to control garlic white rot.
New 3-phenyl-1-(2-furyl)propenones, 1 and 3-phenyl-1-(2-furyl)-3-thiophenyl-propanone, 2 derivatives were synthesized, and their fungicidal activities in vitro against Botrytis cineria (BC), Valsa ceratosperma (VC), Scelerotium cepivorum (SC) and Phytophthora capsici (PC) were investigated using a generalized structure-activity relationship (SAR). The activity of 1 was superior to those of 2, and nonsubstituent, 1a and chloro group substituent, 1d of E (Syn) conformer were the most effective $(EC_{50}=10{\sim}12\;ppm)$ compound to BC. Antifungal activities were able to predict to depend essentially on the ${\beta}$ carbon and their positive charge from the results that the good correlation $(r^2=0.90)$ was observed between hydrolysis rate constant (logk) of 1 and the electronic parameter $({\sigma})$ of X-substituent on the ${\beta}-phenyl$ ring.
Kim, Byung-Ryun;Hahm, Soo-Sang;Han, Kwang-Seop;Kim, Jong-Tae;Park, In-Hee
한국균학회소식:학술대회논문집
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2016.05a
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pp.25-25
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2016
Biological control has many advantages as a disease control method, particularly when compared with pesticides. One of the most important benefits is that biological control is an environmental friendly method and does not introduce pollutants into the environment. Another great advantage of this method is its selectivity. Selectivity is the important factor regarding the balance of agricultural ecosystems because a great damage to non target species can lead to the restriction of natural enemies' populations. The objective of this research was to evaluate the effects of several different bacterial isolates on the efficacy of biological control of soil borne diseases. White rot caused by Sclerotium cepivorum was reported to be severe disease of garlic and chive. The antifungal bacteria Burkholderia pyrrocinia CAB08106-4 was tested in field bioassays for its ability to suppress white rot disease. In field tests, B. pyrrocinia CAB08106-4 isolates suppressed white rot in garlic and chive, with the average control efficacies of 69.6% and 58.9%, respectively. In addition, when a culture filtrate of B. pyrrocinia CAB08106-4 was sprayed onto wounded garlic bulbs after inoculation with a Penicillium hirstum spore suspension in a cold storage room ($-2^{\circ}C$), blue mold disease on garlic bulbs was suppressed, with a control efficacy of 79.2%. These results suggested that B. pyrrocinia CAB08106-4 isolates could be used as effective biological control agents against both soil-borne and post-harvest diseases of Liliaceae. Chinese cabbage clubroot caused by Plasmodiophora brassicae was found to be highly virulent in Chinese cabbage, turnips, and cabbage. In this study, the endophytic bacterium Flavobacterium hercynium EPB-C313, which was isolated from Chinese cabbage tissues, was investigated for its antimicrobial activity by inactivating resting spores and its control effects on clubroot disease using bioassays. The bacterial cells, culture solutions, and culture filtrates of F. hercynium EPB-C313 inactivated the resting spores of P. brassicae, with the control efficacies of 90.4%, 36.8%, and 26.0%, respectively. Complex treatments greatly enhanced the control efficacy by 63.7% in a field of 50% diseased plants by incorporating pellets containing organic matter and F. hercynium EPB-C313 in soil, drenching seedlings with a culture solution of F. hercynium EPB-C313, and drenching soil for 10 days after planting. Soft rot caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum was reported to be severe disease to Chinese cabbage in spring seasons. The antifungal bacterium, Bacillus sp. CAB12243-2 suppresses the soft rot disease on Chinese cabbage with 73.0% control efficacy in greenhouse assay. This isolate will increase the utilization of rhizobacteria species as biocontrol agents against soft rot disease of vegetable crops. Sclerotinia rot caused by Sclerotinia sclerotiorum has been reported on lettuce during winter. An antifungal isolate of Pseudomonas corrugata CAB07024-3 was tested in field bioassays for its ability to suppress scleritinia rot. This antagonistic microorganism showed four-year average effects of 63.1% of the control in the same field. Furthermore, P. corrugata CAB07024-3 has a wide antifungal spectrum against plant pathogens, including Sclerotinia sclerotiorum, Sclerotium cepivorum, Botrytis cinerea, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophotra capsici, and Pythium myriotylum.
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