In this study, we characterized sporadically occurring sclerotium rot caused by Sclerotium rolfsii in Chinese chive (Allium tuberosum Roth.) in farm fields in Sacheon, Korea. The initial symptom of the disease was water-soaked, which progressed to rotting, wilting, blighting, and eventually death. Further, mycelial mats spread over the lesions near the soil line, and sclerotia formed on the scaly stem and leaves. The sclerotia were globoid, 1~3 mm, and white to brown. The optimum temperature for growth and sclerotia formation on potato dextrose agar (PDA) was $30^{\circ}C$. The diameter of the hypae ranged from 4 to 8 ${\mu}m$. Clamp connection was observed on PDA medium after 5 days of incubation. Based on the mycological characteristics, internal transcribed spacer sequence analysis, and pathogenicity test, the causal agent was identified as Sclerotium rolfsii Saccardo. This is the first report of sclerotium rot in Chinese chive caused by S. rolfsii in Korea.
Singh, U.P.;Singh, S.K.;Sugawara, Koya;Srivastava, J.S.;Sarma, B.K.;Prithiviraj, B.
Mycobiology
/
v.29
no.3
/
pp.154-159
/
2001
Natural sclerotium formation in two species of Curvularia was observed. The sclerotia were spherical to elongated. The scanning electron microscopical observations of sclerotia revealed that the sclerotia were of two distinct layers of cells, outer loosely woven hyphae and inner contact layer of cells. Different lights, viz. red, blue, green, fluorescent or addition of culture filtrate of Sclerotium rolfsii in the medium did not affect sclerotium formation.
Stem rot disease was found in garlic (Allium sativum L.) cultivated from 2008 to 2010 in the vegetable gardens of some farmers in Geumsan-myon, Jinju City, Gyeongnam province in Korea. The initial symptoms of the disease were typical water-soaked spots, which progressed to rotting, wilting, blighting, and eventually death. White mycelial mats had spread over the lesions near the soil line, and sclerotia had formed over the mycelial mats on the stem. The sclerotia were globoid in shape, 1~3 mm in size, and tan to brown in color. The optimum temperature for growth and sclerotia formation on potato dextrose agar (PDA) medium was $30^{\circ}C$. The diameter of the hyphae ranged from approximately 4 to $8\;{\mu}m$. Typical clamp connection structures were observed in the hyphae of the fungus, which was grown on PDA medium for 4 days. On the basis of the mycological characteristics and pathogenicity of the fungus on the host plants, the causal agent was identified as Sclerotium rolfsii Saccardo. This is the first report of stem rot disease in garlic caused by S. rolfsii in Korea.
In 2007 to 2008, a fruit rot of Melon (Cucumis melo L.) caused by Sclerotium rolfsii occurred sporadically in a farmer's vinyl house in Jinju City. The symptoms started with watersoaking lesion and progressed into the rotting of the surface of fruit. White mycelial mats appeared on the lesion at the surface of the fruit and a number of sclerotia formed on the fruit near the soil line. The sclerotia were globoid in shape, 1${\sim}$3 mm in size, and white to brown in color. The hyphal width was measured 3 to 8 ${\mn}$. The optimum temperature for mycelial growth and sclerotia formation was 30 on PDA. Typical clamp connections were observed in hyphae of grown for 4 days on PDA. On the basis of symptoms, mycological characteristics and pathogenicity to the host plant, this fungus was identified as Sclerotium rolfsii Saccardo. This is the first report of the fruit rot of Melon caused by S. rolfsii in Korea.
This study was conducted to elucidate effect of environmental factors on the development of white rot. In order to identify the causal agents causing white rot of Allium crops, we compared DNA profiles of a representative isolate, Sclerotium cepivorum, introduced from foreign country with Korean isolates using UP-PCR. As a result, Sclerotium isolates forming round-shaped sclerotia were identified as Sclerotium cepivorum pertaining in UP-PCR b group and Sclerotium isolates farming anamorphic-shaped sclerotia presumed to be a novel species of Sclerotium based on DNA profiles of UP-PCR. There was a big difference in DNA band pattern between two species of Sclerotium isolated in Korea. Electron micrographs of scanning electron microscope and transmission electron microscope showed morphological differences in sclerotial surface structure and rind layers between two species of Sclerotium. There were more wrinkles and pore spaces on sclerotial surface of Sclerotium sp. forming anamorphic-shaped sclerotia than that of Sclerotium cepivorum forming round-shaped sclerotia. Both of two white rot pathogens grew well at the temperature range of $10-25^{\circ}C$ with optimal temperature of $20^{\circ}C$. Sclerotia of the two pathogens were well formed at $20^{\circ}C$ and well germinated at the temperature range of $20-24^{\circ}C$, Effect of pre-incubation of sclerotia on destruction of sclerotial dormancy of two pathogens was evaluated through storing sclerotia under different temperature condition. The sclerotia of the two pathogens showed an increased capacity to germinate on potato dextroise agar when the sclerotia were incubated for 7 days at $10^{\circ}C$ after pre-treatment at $35^{\circ}C$ for 7 days. At that time, germination rate of Sclerotium sp. and 5. cepivorum was $100\%\;and\;70\%$, respectively. Flooding period and treatment temperature had an effect on sclerotial survival rate of the two pathogens. As flooding period and treatment temperature increased, sclerotial germination rate of the two pathogens decreased. It was confirmed that soil humidity played an important role on development of white rot. It was the highest disease incidence of garlic white rot when garlic were sown at potted soils infested with the two pathogens and adjusted soil humidity to $15\%$ (field moisture capacity, about -300 mb). As soil humidity increase or decrease based on $15\%$ of soil humidity, disease incidence decreased move and more.
In order to control garlic white rot (Sclerotium cepivorum), which threatens garlic production in farmers fields, soil solarization (solar sterilization), sclerotia germination inducers and effective microorganisms as biological control agents, and chemical fungicides have been used. Among them, fungicide has been largely used to reduce garlic white rot. In this study, the antifungal activities of five fungicides, prochloraz(a.i. 25%, EC), tebuconazole (a.i. 25%, WP), flutolanil (a.i. 15%, EC), iminoctadine tris-albesilate (a.i. 40%, WP) and isoprothiolane (a.i. 40%, EC) with different mode of action, in mycelial growth, sclerotia germination and sclerotia production, were tested. The inhibitory effects of the 5 fungicides on the mycelial growth, and sclerotia germination and production of garlic white rot pathogen (S. cepivorum T11-2) were investigated on potato dextrose agar (PDA) and their control efficacies were evaluated on garlic flakes. There was no mycelial growth of S. cepivorum T11-2 on PDA amended with $0.8{\mu}g\;mL^{-1}$ of prochloraz or $100{\mu}g\;mL^{-1}$ of tebuconazole. Also prochloraz and tebuconazole inhibited perfectively the sclerotia germination of the pathogen at 10 and $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$, respectively. In spite of a very low activity of isoprothiolane in mycelial growth and sclerotia germination of S. cepivorum T11-2, it showed a good inhibitory activity against sclerotia production of S. cepivorum T11-2 on PDA amended with $1.67{\mu}g\;mL^{-1}$. Prochloraz, tebuconazole and flutolanil showed above 70% of control value when they were treated at $100{\mu}g\;mL^{-1}$ using the garlic flake cutting-method.
Sclerotia of Grifola umbellata were cultivated by two methods such as burying and root inoculation methods. The sclerotia of G. umbellata produced by the burying method were $6.0{\sim}6.8{\times}3.4{\sim}4.6{\times}1.8{\sim}1.9cm$(Width$\times$Length$\times$Thickness) in size and $17.3{\sim}19.6g$ in weight, respectively. Their increase rate was $1.10{\times}1.12$ times. On the other hand, the sclerotia cultivated by the root inoculation method were $18.3{\sim}31.5{\times}12.5{\sim}26.4{\times}3.1{\sim}3.7cm(W{\times}L{\times}T)$ in size and $219.1{\sim}576.6g$ in weight, respectively. Their growth increment was $11.18{\sim}39.77$ times. The rhizomorphs of Armillaria mellea were developed with a high density under fallen leaves layer covering cultivation site, and distributed mainly between soil surface and soil depth of about 10 cm as well as colonized prominently on the inoculated wood logs. Fungal interaction between G. umbellata and A. mellea were observed mainly in the stage of white sclerotium of G. umbellata. The sclerotia of G. umbellata which were developed newly and harvested in the root inoculation method were twined with root hairs of host tree and rhizomorphs of A. mellea. The sclerotia of G. umbellata decomposing root hairs of host tree were confirmed through SEM examination. Physiochemical characteristics of soil in all cultivation sites had no significant differences. Soil pH were in the range of pH $3.98{\sim}4.40$. Organic matters were the range of $17.97{\sim}23.86%$ and moisture contents of soil were $12.00{\sim}18.20%$. Soil temperatures showed $12.9{\sim}13.8^{\circ}C$ in November and $22.0{\sim}23.9^{\circ}C$ in August, respectively. In conclusion, the root inoculation method seems to be a practical method for cultivating sclerotia of G. umbellata due to its many advantages such as simplicity of inoculation process, shortening of cultivation periods and facility of harvest.
The present study was carried out to investigate morphological characteristics of pseudosclerotia of Grifola umbellata formed by artificial cultures. Isolate G. umbellata DUM GUS-01 was obtained from sclerotium cultivated in field. The fungal isolate was cultured on PDYM broth, PDYMA(potato dextrose yeast malt agar) and oak sawdust media at $20^{\circ}C$ under the dark condition. G. umbellata DUM GUS-01 showed a volumetric increment of fungal lumps rather than mycelial growth. Particularly, G. umbellata DUM GUS-01 produced a large amount of melanin pigments in all culture treatments. The color of the fungal mass has been changed into grey gradually, and then formed melanized rind-like structure on its superficial part. The fungal structures which were covered with melanized rind-like layer were named as pseudosclerotia of G. umbellata. The pseudosclerotia of G. umbellata DUM GUS-01 formed a new white mycelial mass, which was swollen out of the melanized rind structure for its volumetric increment. When the pseudosclerotia were sectioned, their structure was discriminated from two structures such as a melanized rind-like structure layer formed by aggregation of aged mycelia and a white mycelial mass with high density. As results of scanning electron microscopic examination, the pseudosclerotia of G. umbellata DUM GUS-01 which were formed in in vitro conditions were similar to the sclerotia of G. umbellata cultivated in natural conditions except for the crystals formed in medula layer of natural sclerotia. Although size, solidity of rind structure and mycelial compactness of pseudosclerotia were more poor than those of natural sclerotia, the morphological structure and growth pattern of pseudosclerotia were very similar to those of natural sclerotia. Therefore, it is probable to induce pseudosclerotia to sclerotia of G. umbellata in in vitro conditions. Consequently, it seems that the induced pseudosclerotia can be used as inoculum sources to substitute natural sclerotia in field cultivation.
The process of fertilization and changes in anatomical structure of sclerotia during the apothecial formation in Sclerotinia trifoliorum, the causal fungus of sclerotial rot of forage legumes, were investigated. The time of fertilization could be estimated with fair accuracy by the sequencial spermatization of the sclerotia which kept at 15C in saturated moisture. In the case of one strain used in this experiment, fertilization between the sclerotia and spermatia were estimated to take place at around 18days after the sclerotia were placed under the conditions for apothecial induction (15C, saturated moisture). The fertilizable state was maintained for about 45 days and the spermatization thereafter did not induce the apothecial formation. When the sclerotia reached fertilizable state, a number of interwoven hyphal nests were developed within the medulla of sclerotia, regardless of the sexuality of the cultures. Comparing the process of multiplication and growth of the hyphal nests in homothallic and heterothallic culture, they were identified as ascogonium. These ascogonia were persisted for about 45 days. This observation was well coincided with the duration of fertilizable state elucidated by the sequencial spermatization experiment.
White rot on Allium crops recently had a high incidence with incrensed cultivating areas of tropical garlic types in Korea. Two types of Sclerotium have known as causal agents that produce different size and shapes of sclerotia in infested fields. Therefore, we developed a new method for isolation of sclerotia from infested field soils that can be used for ecological study of Sclerotium spp. and establishment of control strategy. Soil samples collected from heavily infested fields were evenly mixed and placed on a automatic sieve shaker connected with tap water, After 10 min of shaking, residues on 0.5 mm and 0.25 mm sieves were separately collected and suspended with 70% sugar solution, which method floats sclerotia in aqueous layer, Then, floated fraction was carefully separated and mixed with a same volume of 1% sodium hypochlorite solution to differentiate with organic materials. This method provides a direct count of sclerotia under a dissecting microscopy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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