Park, Jeong-Sook;Hwang, Seock-Yeon;Lee, Won-Suk;Yu, Kee-Won;Paek, Kee-Yoeup;Hwang, Bang-Yeon;Han, Kun
Archives of Pharmacal Research
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제29권9호
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pp.800-807
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2006
This study examined the possibility of using a tissue cultured root of wild Panax ginseng (tcwPG) as a fertility agent. The effect of tcwPG on spermatogenesis was studied using male rats. The tcwPG crude powder was administered orally to 7-week-old rats over a 6-week period. The number of sperm in the testes and epididymides was significantly higher than the control. A histological examination did not reveal any morphological changes in the testes from the tcwPG powder treated rats. Moreover, there were no significant differences in the weights of the heart, spleen, liver, kidney, brain, testes and epididymides. Oligospermia was also induced by administering 2,3,7,8-tetrachlorodaibenzo-p-dioxin (TCDD) to the rats in order to estimate the feasibility of using tcwPG as treatment for infertility caused by spermatogenic disorders. After exposing the rats to TCDD, the tcwPG saponin fraction treated rats showed some improvement in the body weight, sperm number and testis morphology. It was estimated that tcwPG had feasibility as a therapeutic agent on spermatogenic disorder.
고려인삼학회 1987년도 Proceedings of Korea-Japan Panax Ginseng Symposium 1987 Seoul Korea
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pp.29-37
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1987
This study was devised to observe the cytotoxlc activities of petroleum-ether extract of Panax ginseng root(crude Gx) and its partially purified fraction from silicon acid column chromatography(7:3 CX) against sarcoma-180(5-180) and Walker carcinosarcoma 256(Walker 256) in vivo, and murine leukemic lymphocytes(L1210) and human rectal cancer cell(HRT-18) and human colon cancer cells(HT-29 and HCT-48) in vitro . Each cell-line was cultured in medium containing serial concentrations of the crude Gx or 7:3 Gx in vitro. A highly lipid soluble compound in the extract of Panax ginseng root was cytocidal to murine leukemic cells and human colon and rectal cancer cells in vitro In the meantime, ginseng saponin derivatives did not cytotoxic effects at its corresponding concentration. The growth rates of the cancer cells in medium containing ginseng extracts were inhibited gradually to a significant degree roughly in proportion to the increase of the extract concentration. The cytotoxic activity of 7:3 Gx was about 3 times more potent than that of crude Gx, one unit of cytotoxic activity against L121f cells being equivalent to 2.54$\mu\textrm{g}$ and 0.88 $\mu\textrm{g}$ for the crude Gx and 7:3 Gx, respectively. The Rf value of the active compound on silica -gel thin layer chromatography with petroleum-ether/ethyl ether/acetic acid mixture (90:10:1, v/v/v) as a developing solvent was 0.23. The survival times of mice inoculated with S-180 cells were extended about 1.5 to 2 times by the 7:3 Gx treatment compared with their control group. The significantly decreased hemoglobin values of rats after inoculation with Walker 256 were recovered to normal range by oral administration of the crude Gx. The synthetic levels of protein, DNA and RNA in human colon and rectal cancer cells were significantly diminished by treatment with the crude Gx, which can explain a part of the origin of its anticancer activity.
본 연구에서는 홍삼의 면역력 증진에 기여하는 성분을 체계적으로 구명하기 위하여 홍삼분말을 에탄올, 물로 분획하면서 각 분획의 AFCs 형성능 및 Flow cytometery를 이용하여 비장 T 세포수, B 세포수, macrophage 수, $CD4^+$ 및 $CD8^+$ T 세포수를 측정하였다. 6년근 홍삼분말을 100% 에탄올로 추출하여 에탄올 분획과 1차 잔사(R1)를 얻었고, 면역활성이 우수한 1차 잔사(R1)를 물로 추출하여 물분획(W)과 2차 잔사(R2)를 얻었다. 6년근 홍삼분말의 산성 다당체, 진세노사이드 함량은 각각 4.94%, 1.56%이며, 에탄올 분획의 산성 다당체, 진세노사이드 함량은 각각 0.11%, 6.99%, 1차 잔사의 산성 다당체, 진세노사이드 함량은 각각 4.93%, 0.40%였다. 6년근 홍삼분말과 1차 분획에 대한 AFCs 형성능 측정 결과 산성 다당체 함량이 높은 1차 잔사가 가장 우수하였다. 면역활성이 우수한 1차 잔사를 물 추출하여 2차 분획을 얻었으며, 2차 분획의 AFCs 형성능을 측정한 결과 물분획이 가장 우수하였다. 물분획의 산성 다당체, 총 사포닌 함량은 각각 7.46%, 0.61%이며, 다른 분획에 비해 산성 다당체 함량이 가장 높았다. 면역활성이 가장 우수한 물분획을 용량에 따른 비장 세포아형을 분석한 결과 cyclophosphamide 투여에 의해 감소된 비장 총 세포수, T 세포수, B 세포수, macrophage 세포수, $CD4^+$ 및 $CD8^+$ T 세포수가 용량 의존적으로 유의성 있게 증가하였다. 이상의 결과로부터 홍삼의 면역 증진을 나타내는 성분은 사포닌보다는 다당체 함량이 높은 비사포닌계가 활성을 나타낼 것으로 제시되었다. 앞으로 단계별로 분획을 제조하여 면역활성 기능 성분으로서 다당체에 대한 구조를 구명하고 구조에 따른 면역활성 연구가 필요할 것으로 생각된다.
홍삼사포닌분획의 항불안작용의 양상을 검색하고자 사포닌분획을 사용하여 실험 동물에서 항불안작용을 검색하고 이들의 작용을 benzodiazepine의 대표적 약물인 diazepam의 효과와 비교하여 보았다. 실험동물에서 항불안효과의 검정을 위하여 생쥐에게 각각 상이 한 단일성분 함량을 지닌 여러분획들을 투여 후 elevated plus maze법을 사용하여 항불안효과를 비교, 관찰하였다. 실험결과 홍삼 ginsenoside Rg1, Rf 및 Re 등의 함량이 보다 높은 TSI 분획에서 항불안 효과를 관찰하였다. 중추신경계에 작용하여 진정효과를 나타내는 약물 중 특히 항불안제의 작용에 관여하는 신경전달물질 수용체로 현재까지 가장 주목을 받고 있는 것은 GABA A-benzodiazepine 수용체-chloride통로 복합체에 있는 benzodiazepine 수용체이다. 본 실험결과 관찰한 홍삼 사포닌의 항불안작용의 기전 규명을 위한 접근방법으로 홍삼 사포닌의 benzodiazepine 수용체에 대한 수용체 결합력을 관찰하고자, 흰쥐의 대뇌 피질을 검체로 하여 benzodiazepine 수용체에 대한 [$^3H$] Ro15-1788 결합 실험을 실시하였다. 홍삼 사포닌 분획들은 benzodiazpine 수용체에 결합하는 반응성을 보였으며, ginsenoside Rb, Re 및 Rd등의 함량이 높은 TSIV 분획이 가장 높은 결합력을 나타내었는데, 이 분획에서는 항불안 작용을 관찰할 수 없었다. 이상의 결과에서 볼 때 홍삼사포닌은 항불안작용을 나타내었으며, 이 항불안작용과 benzodiazepine 수용체에 대한 결합력과의 연관성은 관찰되지 않았다.
Background: Ginseng is believed to have antitumor activity. Autophagy is largely a prosurvival cellular process that is activated in response to cellular stressors, including cytotoxic chemotherapy; therefore, agents that inhibit autophagy can be used as chemosensitizers in cancer treatment. We examined the ability of Korean Red Ginseng extract (RGE) to prevent autophagic flux and to make hepatocellular carcinoma (HCC) cells become more sensitive to doxorubicin. Methods: The cytotoxic effects of total RGE or its saponin fraction (RGS) on HCC cells were examined by the lactate dehydrogenase assay in a dose- or time-dependent manner. The effect of RGE or RGS on autophagy was measured by analyzing microtubule-associated protein 1A/1B-light chain (LC)3-II expression and LC3 puncta formation in HCC cells. Late-stage autophagy suppression was tested using tandem-labeled green fluorescent protein (GFP)-monomeric red fluorescent protein (mRFP)-LC3. Results: RGE markedly increased the amount of LC3-II, but green and red puncta in tandem-labeled GFP-mRFP-LC3 remained colocalized over time, indicating that RGE inhibited autophagy at a late stage. Suppression of autophagy through knockdown of key ATG genes increased doxorubicin-induced cell death, suggesting that autophagy induced by doxorubicin has a protective function in HCC. Finally, RGE and RGS markedly sensitized HCC cells, (but not normal liver cells), to doxorubicin-induced cell death. Conclusion: Our data suggest that inhibition of late-stage autophagic flux by RGE is important for its potentiation of doxorubicin-induced cancer cell death. Therapy combining RGE with doxorubicin could serve as an effective strategy in the treatment of HCC.
노화과정에 산소라디칼이 관여할 가능성을 노화유도된 쥐를 동물모델로 하여 알아보았다. 난소를 절제한 rat와 난소를 절제하지 않은 정상의 rat에서의 생리활성에 미치는 인삼 추출물의 효과를 연구하였다. 난소를 절제한 rat에 각각 GTS (Ovx+GTS 군)와 GW (Ovx+GW 군)를 투여하고, 이것과 비교하기 위해 난소를 절제한 대조군(Ovx군)과 마지막으로 난소를 절제하지 않은 정상군(Sham군)으로 하여 항산화효과에 관한 실험방법으로 진행하였다. 노화유도된 쥐의 각 조직에서 lipid peroxidation이 증가되었고 free radical반응이 더 심하게 일어난 간 조직에서 노화진행이 그만큼 촉진되었음을 알 수 있었다. 간소라디칼반응이 항진된 원인을 규명코자 간 조직에서 미토콘드리아와 세포질분획에서 항산화효소의 활성을 조사한 결과, SOD와 glutathion reductase활성이 감소되었으며 노화나 지질과산화가 심하게 진행되었던 간 조직에서 이들 항산화효소의 활성감소가 심한 경향을 나타내었다. 생체는 free radical을 조절할 수 있는 다양한 항산화계가 존재하여 free radical을 효율적으로 제거함으로써 생체의 항상성을 유지할 수 있다. 이러한 항산화계에는 superoxide dismutase (SOD), glutathion (GSH) peroxidase, GSH reductase, GSH S-transferase, catalase등의 항산화효소가 있다. SOD는 반응성을 가진 산소species인 superoxide anion을 macrophage와 polymorphonuclear leucocyte의 항균작용같은 세포방어기구에서 중요한 역할을 한다. 원칙상 눈, 피부등의 byaus이 공기중의 산소에 노출되면 oxidative stress가 커짐으로서 조직이 훼손되나 SOD같은 효소에 의해 보호되고 손상이 방지되는 것으로 알려지고 있다. 실제로 신체부위에 적용해 보면 쉽게 활성상실이 일어나므로 fatty arid와 공유결합시켜 효과적으로 superoxide radical을 제거할 수 있다. AST의 활성은 Ovx군이 Sham군에 비해 2.11배 높게 나타났으며, ALT 활성은 변화가 나타나지 않았다. AST 활성에서는 각각의 물질을 투여한 군에서는 유의적인 감소 경향을 보였다. 과산화지질함량은 Ovx군이 Sham군에 비해 높게 나타났으며, 각각의 인삼추출물을 투여한 군에서는 62%∼72%의 저해률을 보였다. 항산화 효소들은 Sham군에 비해 Ovx군에서 낮게 나타났는데, 각 물질의 투여 군에서는 유의성있는 증가를 보였다. 이러한 결과에서 보듯이, 난소 절제로 생성된 많은 free radical은 항산화효소에 의해서 감소되었으며, 그리고 인삼 추출물이 항산화 효소 대신에 노화를 저해하는 작용을 하는 것으로 사료되었다.
생체에 투입되는 이물질(xenobiotics)들이 돌연변이를 일으키고 나아가서는 암을 유발시키게 되는 것은 이물질들이 생체내에서 어떤 양상으로 대사되느냐, 즉 이물질이 독성화되는 과정과 해독되는 과정에 있어서의 활성도의 차이에 따라 좌우되는 것으로 알려져 있다. 따라서 인삼이 이물질 대사 및 해독작용에 어떤영향을 미치는가를 밝혀보기 위하여 동물 실험을 통하여 발암물질로 알려진 Benzopyrene과 그 외 다른 유독한 화학약물들의 대사과정에 미치는 영향을 조사하여 보았다. 인삼투여군에 있어서 cyt. P-450와 관련된 Monooxy-genase system이 선택적으로 유도되었고 또 해독작용에 필수적인 Conjugation도 현저히 상승되었다. 이와 같은 이물질 해독작용의 선택적 유도는 인삼이 이물질 대사과정에 영향을 미쳐 독성물질 해독 항진효능이 있음을 제시해 주는 것으로 해석되어진다.
인삼은 전통적으로 항당뇨 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. Insulin-like growth factor (IGF)-I 역시 당뇨병성 신증의 발병 초기에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이에 본 연구에서는 신장 근위세뇨관 세포에서 고포도당에 의한 IGF-I 분비에 대한 ginsenoside의 차단 효과 및 이와 관련된 신호전달계를 알아보았다. 결과는 다음과 같다. 고포도당에 의해 증가되었던 IGF-I분비 촉진 작용은 GTS, PD 및 PT 처리 시 차단되었으며, 세포 성장 작용 (세포 비대)에서도 같은 효과를 볼 수 있었다. 아울러 고포도당에 의한 cAMP 및 PKC 활성은 GTS 처리시 현저하게 차단되었으며 PD 및 PT 처리 시 역시 부분적으로 억제되는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 볼 때 신장 근위세뇨관 세포에서 ginsenoside는 cAMP 및 PKC 활성 경로를 억제하여 고포도당에 의한 IGFs 분비 작용을 차단하는 것으로 나타났다.
The Preventive effect of the saponin fraction of Panax ginseng C.A. Meyer against hyperchole- sterolemia was demonstrated by assaying the cholesterol and triacylglyceride level of the blood serum and liver of rats fed high-cholesterol diet with and/or without ginsenoside. To understand the mechanism of the preventive action of ginsenoside, ginsenoside effect on LDL receptor binding ability, cholesterol level, and cAMP level of Chinese hamster ovary (CHO) cells cultured under various conditions were examined. When LDL (20 $\mu$g/ml) was added to the culture medium for CHO cell culture, LDL receptor binding activity of the cell was suppressed down to 58% of that of normal group. Ginsenosides at 10--2% and 10-3% level (w/v) were shown to exert an appreciable stimulatory effect on CHO cell LDL receptor activity, which partially overcame the suppression due to the presence of LDL (20 $\mu\textrm{g}$/ml) in the medium. Ginsenosides also reduced the increased cholesterol level of test group almost to that of normal group, and it increased cAMP level, which was usually reduced to 55% of that of the normal group due to the presence of LDL in the medium. Comparison of Kd and Bmax value of CHO cells cultured under different conditions revealed that this stimulation was due not to the receptor's binding affinity but to its number. Addition of ginsenoside (10-2%) decreased the uptake of taurocholic acid as much as 20% at the actively transporting everted ileal sacs, but it failed to form a large mixed micelles with taurocholic acid, which was one of the proposed mechanisms by which ginsenoside inhibits bile acid reabsorption. From the above results, it seemed likely that ginsenoside prevented hypercholestrolemia by decreasing cholesterol level in cells thereby relieving the inhibition of LDL receptor synthesis by cholesterol and also by inhibiting bile acid reabsorption from the small intestine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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