살모넬라균은 가장 대표적인 수인성·식품매개질환 중 하나이며 전 세계적으로 인간 위장염, 설사 질환의 가장 흔한 원인이 되는 병원체이다. 식품 및 환경 검체, 식중독 또는 설사 환자로부터 분리한 살모넬라균의 혈청형, vitek2를 이용한 항생제 내성검사, PFGE를 이용한 유전적 상관관계를 조사하였다. 2020년부터 2023년까지 제주도의 식품 또는 환경 검체에서 26주와 인체검체에서 313주로 총 339주가 분리되었다. 월별로 분리된 살모넬라균은 3월부터 서서히 증가하여 8월에 가장 많이 살모넬라균을 분리되었다. 환자로부터 분리된 살모넬라균은 성별에 따른 유의미한 차이가 없었다. 그러나 살모넬라균은 70세 이상의 사람들에게서 가장 많이 분리되었고, 10-19세 사이의 사람들에게서 가장 적게 분리되었다. 식품 및 환경 검체에서 분리된 살모넬라균은 8개 혈청형이 있었으며, 주요 혈청형은 S. Bareilly (26.9%), S. Rissen (23.1%), S. Thompson (19.3%) 순으로 확인되었다. 또한, 인체검체로부터 분리된 살모넬라균은 27개 혈청형이 있었으며, 주요 혈청형은 S. Bareilly (31.0%), S. Typhimurium (24.6%), S. Enteritidis (11.5%) 순으로 확인되었다. 집단식중독의 원인이 되었던 살모넬라균 혈청형은 S. Bareilly, S. Enteritidis, S. Thompson이 있었다. 항생제 내성 검사 결과에서는 다양한 항생제에 대한 내성이 나타났으며, 일부 살모넬라균에서는 다제내성이 나타났다. 살모넬라균은 17개의 혈청형에 따라 다양한 유전적 상관관계를 보여주었다. 이러한 결과는 살모넬라균의 유행을 예측하고, 과학적 근거를 제공함으로써 역학조사의 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Salmonella spp. are the important pathogens both economically and clinically in animals as well as human. Some of them have highly zoonotic potentials even though they are asymptomatic in animals. Therefore, the prevalence of Salmonella spp. in animals is highly concerned for human health. The present study was carried out to investigate the prevalence, antimicrobial resistance and PFGE patterns of Salmonella spp. isolated from chickens at slaughterhouse in Incheon area. The overall isolation rate of Salmonella spp. from cloaca and cecum specimens was 7.3 % (37/510). Thirty seven isolates of Salmonella spp. were identified to 5 serotypes; S. Enteritidis, S. Newport, S. Typhimurium, S. Gallinarum, and S. Derby with prevalence of 46.0%, 40.5%, 8.1%, 2.7%, and 2.7%, respectively. Resistance to nalidixic acid was found in 97.3% of Salmonella spp. isolated, followed by streptomycin (16.2%), tetracycline (16.2%), ampicillin (5.4%). Only 6 isolates (16.2%) showed resistance to more than two antimicrobials. In PFGE analysis of chicken and human isolates with Xba I, S. Enteritidis isolates from chicken showed very high similarity over 82.8% and also the similarity was very high in the comparison with human isolates. However, the higher similarity (100%) was observed among chicken isolates of S. Typhimurium. These results suggest the close genetic relatedness of Salmonella spp. isolated from chickens with human.
Epidemiological characteristics of a total of 48 swine herd with diarrhea or a history of diarrhea in Gyeongsang-do between 1999 and 2000 were performed to evaluate the prevalence of Salmonella spp., their serotypes and antibiotic resistance patterns with respect to the different stages of swine production system. A total of 139 Salmonella spp. (21%) were isolated from 662 fecal samples and the overall herd prevalence of Salmonella spp. ranged from 12.5% to 88%. The average prevalence of Salmonella spp. from swine stages of suckling/nursery, grow/finisher and sow stage were 25.7%, 19.2% and 18.4%, respectively. Ten serotypes of Salmonella spp. were identified with a predominance of S. Typhimurium, S. Derby and S. Agona. Twenty-five isolates (18%) were found to be untypable. One hundred and two Salmonella isolates (73.4%) resistant to more than 1 antibiotic were characterized by 24 diverse resistance patterns, and their frequency of antibiotic resistance was highest in grow/finisher stage (83.3%). Resistance to tetracycline (TE; 67.6%), sulfamethoxazole (SU; 46.8%) and streptomycin (ST; 28%) was most common and the most common resistance patterns were TE SU (31.4%), TE (21.6%) and TE SU ST (20.6%) in order.
Salmonella spp.의 신속한 검출을 위하여 발진모듈, 수정결정 진동측정기, 박막형태의 수정결정으로 이루어진 압전류적(piezoelectric, PZ) 항체센서 시스템을 구성하였다. 수정결정의 금전극 표면에 Salmonella 구조 항원(common structural antigen)에 대한 항체를 protein A를 사용하여 고정화하고, 항체가 고정화된 수정결정과 미생물간의 결합반응에 의한 질량증가로 나타나는 진동수의 감소량을 측정하였다. PZ 항체센서는 $35^{\circ}C$, pH 7.2의 0.1M 인산 완충용액에서 Salmonella균에 대하여 가장 높은 감응도를 나타내었다. PZ 항체센서의 반응은 Salmonella균에 대하여 매우 선택적이었고 polystyrene bead 첨가시 센서의 감응도가 크게 증가하였다. Salmonella균의 농도가 $10^5{\sim}10^6\;CFU/mL$의 범위 내에 있을 때 쌍대수좌표에서 직선구간의 검량선을 얻을 수 있었고, Salmonella 검출에 소요되는 시간은 50분이내 이었다.
The aim of this study was to applicate and evaluate a SYBR Green real-time PCR for the specific detection of Salmonella spp. Specificity of the PCR method was confirmed with 48 Salmonella spp. and 5 non-Salmonella strains using invA gene primer. The average threshold cycle ($C_T$) of Salmonella spp. was $11.83{\pm}0.78$ while non-Salmonella spp. was $30.86{\pm}1.19$. Correlation coefficients of standard curves constructed using $C_T$ versus copy number of Salmonella Enteritidis ATCC 13076 showed good linearity ($R^2=0.993$; slope = 3.563). Minimum level of detection with the method was > $10^2$ colony forming units (CFU)/mL. These results suggested that the SYBR Green real-time PCR might be applicable for the specific detection of Salmonella spp. isolates.
The ability to detect Salmonella spp. is essential in the prevention of foodborne illness. This study examined a Salmonella spp. detection method involving the application of immunomagnetic separation and immunoliposomes (IMS/IL) encapsulating sulforhodamine B (SRB), a fluorescent dye. A quantitative assay was conducted by measuring the fluorescence intensity of SRB that was produced from an immunomagnetic bead-Salmonella spp.-immunoliposome complex. The results indicated detection limits of $2.7{\times}10^{5}$ and $5.2{\times}10^{3}$ CFU/ml for Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) and Salmonella enterka subsp. enterka serovar Typhimurium (S. Typhimurium), respectivley. The signal/noise ratio was improved by using 4% skim milk as a wash solution rather than 2% BSA. In addition, higher fluorescence intensity was obtained by increasing the liposome size. Compared with the conventional plating method, which takes 3-4 days for the isolation and identification of Salmonella spp., the total assay time of to h only including 6 h of culture enrichment was necessary for the Salmonella detection by IMS/IL. These results indicate that the IMS/ IL has great potential as an alternative rapid method for Salmonella detection.
Salmonella spp.의 신속한 검출을 위하여 엷은 박막형태의 수정결정을 사용하는 압전류적(piesoelectric) 항체센서 시스템을 개발하고 증류수, 완충용액, 식염용액 등의 여러 매질 중에서 보여주는 진동 특성을 검토하였다. Salmonella spp. 균 구조항원(Common structural antigen)에 대한 항체를 수정결정에 PEI pre-coating, BSA 가교화, 3-APTES silanizaition, protein A와 DTBP thiolation의 5가지 방법에 의해 고정화한 후 항체 센서의 안정성을 살펴보았다. Salmonella 균을 주입하였을 때 Salmonella 균과 수정 결정에 고정화한 항체와의 결함반응에 의해 수정결정의 질량증가와 이에 따른 진동수 감소가 나타났다. 고정화방법 중 protein A와 DTBP를 이용하여 고정화하는 방법이 센서반응을 가장 안정적이고 재현성 있게 나타내줌을 알 수 있었다. $7.45{\times}10^{7}\;CFU/ml$의 Salmonella 균을 반응 cell 내에 주입하였을 때 protein A를 이용한 고정화의 경우 80Hz, DTBP를 이용한 고정화의 경우 283 Hz의 진동수 감소가 나타났으며, 압전류적 항체센서를 이용할 경우 40분 이내에 Salmonella spp.의 검출이 가능하였다.
This study was carried out in order to compare the methods for Salmonella spp. isolation from sewage and to settle the most appropriate conditions for that isolation. The direct enrichment method was more effective than the pre- enrichment method for Salmonella spp. isolation. The rate of detection was much higher when the specimens were enriched at $41.5^{\circ}C$ than when at $35^{\circ}C$. Usage of XLBG agar medium showed better results for Salmonella isolation than that of SS medium. It can be suggested that the most effective combination for Salmonella spp. isolation was the direct centrifugation(3,000 rpm 100m1)- direct enrichment($41.5^{\circ}$C)-usage of XLBG medium.
최근 산업동물에서도 동물복지의 관심이 높아짐에 따라 복지 사육방식을 채택한 농가의 수가 점점 늘어나고 있다. 본 연구는 복지농장과 일반농장 간의 살모넬라 검출율을 확인하였다. 각 농가에서 얻어진 샘플들을 이용하여 비교한 결과, 산란계와 육계농장 모두 복지농장이 일반농장에 비해 높은 검출율을 나타냈다. 산란계 농장의 경우 통계학적 유의차는 없었으나(P value, 1.00), 일반 농장 5개 농가에서는 살모넬라가 검출되지 않았으며 복지 농장 5개 농가에서 채취된 130개 샘플 중에서 1개 샘플에서 Salmonella enterica subsp. Enteritidis(SE)가 검출되었다. 육계 농장의 경우, 일반농장 10개 농가의 200개 샘플 중에 5개 농가의 7개 샘플에서 살모넬라가 검출되었으며, 복지농장 5개 농가의 200개 샘플 중 4개 농가의 21개 샘플에서 검출되었으며, 일반농장과 복지농장의 살모넬라 검출율간 통계학적 유의차를 보였다(P value, 0.0057). 일반농장의 2개 분리주는 Salmonella enterica subsp. Senftenberg, SE로 혈청형이 확인되었고 복지농장의 2개 분리주는 Salmonella enterica subsp. Grampian, Salmonella enterica subsp. Virchow로 혈청형이 확인되었다. 앞으로 국내에서 사육방식의 차이에 따른 지속적인 연구와 복지농장에서의 미생물 모니터링이 필요하며, 계사내 적절한 방역대책도 필요하다고 사료된다.
Salmonella infections cause the diseases in poultry and some zoonotic Salmonella can be transmitted to human through poultry products, resulting in food-borne disease. This study was conducted to obtain some useful information for the control of salmonellosis in human. Twenty four Salmonella spp were isolated from poultry carcasses, and they were examined with several methods such as serotyping, antimicrobial resistance test and random amplified polymorphic DNA(RAPD) to identify their characteristics. In serotyping test of 24 strains S enteritidis was 17 (70.8%), followed by S schwarzengrund 3 (12.5%), untyped strain 4 (16.7%). In the results of antimicrobial resistance test, 23 (95.8%) isolates were resistant to at least one antimicrobial agent, generating eight different resistance patterns. In RAPD analysis using URP-6 primer to differentiate Salmonella isolates within a serotype, 4 serogroups were divided into 10 RAPD types: 5 types in S enteritidis, 2 types in S schwarzengrund and 3 types in the remainder.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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