• 제목/요약/키워드: Salmonella assay system

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시호 추출물이 세포성 면역반응에 미치는 영향 (Effect of Bupleurum falcatum extract on cellular immune responses)

  • 정영미;김종면;송희종;조정곤
    • 대한수의학회지
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    • 제33권3호
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    • pp.407-417
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    • 1993
  • Bupleurum falcatum has been used for treatment of inflammation, jaundice, influenza and hepatitis as a traditional orient folk medicine. This experiment was carried out to evaluate the effect of B falcatum extract on cellular immune responses in vivo and in vitro. Antigen binding cell(ABC) assay, antibody production, Arthus and delayed-type hypersensitivity(DTH) reaction against sheep erythrocytes(SRBC) were very depressed in B falcatum extract treated group in vivo. The growth of Staphylococcus aureus in brain heart infusion(BHI) broth containing B falcatum extract was remarkably inhibited. Otherwise, that of Salmonella typhyimurium was not significantly increased in vitro. When B falcatum extract pretreated mice were intraperitoneally(IP) injected S typhimurium and S aureus, respectively, the number of bacteria in peritoneal exudates were time dependent declination compared with those of control, and the weight of spleen and the number of macrophage migration into peritoneal cavity have no difference from those of untreated control. B falcatum extract gradually increased phagocytic activities of peritoneal macrophage against Candida albicans time and dose dependently, and was not significant production of migration inhibiotory factor(MIF). But migration abilities of normal leucocytes in B falcatum extract pretreated group were decreased dose dependently. When B falcatum extract was IP administered, these data indicate that B falcatum extract increases level of serum coticosterone. Therefore, B falcatum extract was indirectly mediated in immune system by serum coticosterone having relation to immunosuppression. These results lead to the conclusion that B falcatum extract acts as a trigger or regulator of cellular immune responses in immune system.

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Reduction in Salmonella mutagenicity of mainstream cigarette smoke condensate by cation exchange chromatography

  • Shin, Han-Jae;Lee, Byeong-Chan;Sohn, Hyung-Ok;Park, Chul-Hoon;Lee, Hyeong-Seok;Yoo, Ji-Hye;Lee, Dong-Wook;Hyun, Hak-Chul
    • 한국연초학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.109-116
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    • 2008
  • Mutagenicity of cigarette smoke is one of the major health concerns related to smoking. Reduction of the components comprising mutagenic activity in cigarette mainstream smoke can be expected to bring about reduced risk of smoking. The purpose of this study is to isolate mutagenic compounds and to investigate the relative contribution to allover mutagenicity of smoke to find clues for the effective elimination of the components. Cigarette smoke condensate (CSC) was obtained from total particulate matter (TPM) of mainstream smoke, and several fractions fractionated from CSC were made by combination of cation exchange chromatograph and reverse-phase chromatography. The mutagenic activity of these fractions was assessed using Salmonella mutagenicity assay with S. typimurium TA98 strain in the presence of metabolic activation system (S-9). The fractions isolated by cation exchange and reverse-phase column showed relatively high mutagenic activity. The basic and hydrophilic fraction 9 showed approximately 33% of mutagenic activity of CSC and its specific activity was 2,459 revertants/mg TPM. These results suggest that hydrophilic cation exchanger and/or other adsorbents possessing similar properties may be used to remove the mutagenic compounds from mainstream smoke.

감마선 조사된 멸치액젓의 유전독성학적 안전성 평가 (Genotoxicological Safety of Gamma-Irradiated Salted and Fermented Anchovy Sauce)

  • 육홍선;차보숙;김동호;이주운;변명우
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권7호
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    • pp.1192-1200
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    • 2004
  • 감마선 조사(10 kGy)된 멸치 액젓의 유전독성 학적 안전성 시험을 수행하기 위해 Salmonella Typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537과 E. coli WP2 uvrA 균주를 사용한 복귀돌연변이시험과 Escherichia coli PQ37을 이용한 SOS chromotest 및 CHL 세포를 이용한 염색체 이상시험을 활성대사효소계 미적용 및 적용하에 실시하였고, ICR마우스의 골수세포를 이용한 in vivo 소핵세포실험을 수행하였다. 감마선 조사(10kGy)된 멸치액젓은 위의 3가지 in vitro실험에서 비조사 된 멸치액젓과 마찬가지로 음성으로 나타났다. 또, 감마선 조사 및 비조사된 멸치 액젓의 in vivo소핵세포실험에서도 소핵이 발견되지 않았다. 따라서 10kGy까지 감마선 조사된 멸치 액젓은 위 수행된 in vitro 및 in vivo 유전독성 시험을 실시한 결과, 음성을 나타낸 것으로 보아 유전독성학적으로 돌연변이원성이 없는 것으로 확인되었다.

Bifidobacteria에 의한 항돌연변이 효과 (Antimutagenic Effects of Bifidobacteria)

  • 이세경;지근억
    • 한국식품과학회지
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    • 제28권4호
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    • pp.796-799
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    • 1996
  • 분리된 균주와 표준균주의 Bifidobacterium 21종류에 대하여 Salmonella typhimurium TA 98균주를 이용한 in vitro 항돌연변이능을 조사하였다. 실험에 이용된 돌연변이원으로는 Trp-P-1 (3-amino-1,4-dimethyl-$^{5}H-pyrido$ (4, 3-b) indole), benzopyrene, IQ (2-amino-3-methylimidazo [4,5-f] quinoline)와 NQO (4-nitroquinoline oxide) 등이었다. 동결건조된 균체들은 평균적으로 각각 Trp-P-1, benzopyrene, NQO, IQ에 대하여 64, 38, 29, 20%의 항돌연변이능을 나타냈다. Trp-P-1, benzopyrene, IQ에 대하여는 균주의 종류와 성장시기에 따른 항돌연변이능에 큰 차이는 없는 것으로 나타났다. NQO에 대하여는 12시간 배양세포가 5일 배양세포보다 항돌연변이능이 우수한 것으로 나타났다. 본 연구결과는 Bifidobacterium 균주들이 일반적으로 몇 종류의 잘 알려진 돌연변이원에 대한 항돌연변이능을 보유하고 있음을 보여주었다.

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유산균 발효 쌍화탕에 대한 단회 투여 경구 독성 및 유전 독성 연구 (Single Dose Oral Toxicity and Genotoxicological Safety Study of Ssanghwa-tang Fermented with Lactobacillus acidophyllus)

  • 정태호;심기석;김동선;이재훈;마진열
    • 대한한의학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.67-83
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    • 2011
  • Objectives: The purpose of this study was to examine the single dose toxicity with oral administration and genotoxicities of Ssanghwa-tang fermented with Lactobacillus acidophyllus. Materials and Methods: Clinical signs, weight changes, lethal doses$(LD_{50})$, and postmortem evaluation were determined by Globally Harmonized Classification System(GHCS) in a single-dose oral toxicity study. In vitro mammalian chromosomal aberration test was conducted with Ames test by cell proliferation suppression assessment using the cultivated CHO-K1(Chinese hamster ovary fibroblast) origins. Bacterial reversion assay was performed using Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and Escherichia coli (WP2uvrA). In vivo micronucleus test was performed using ICR mouse bone marrow. Results: No clinical sign was observed and none of the groups with doses up to 2000 mg/kg showed significant acute oral toxicity in the single dose oral administration. None of the sample doses taken during the 6 to 18 hour groups showed significant aberrant metaphases comparing to the negative control group in the in vitro mammalian chromosomal aberration test. No evidence of mutagenicity was seen for Escherichia coli (WP2uvrA) or Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537). No significant increase in the frequency of micronuclei was seen in the micronucleus test. Conclusion: These results indicate that the $LD_{50}$ value of Ssanghwa-Tang fermented with Lactobacillus acidophyllus may be over 2000 mg/kg and it have no acute oral toxicity and genotoxicity.

Antimutagenic and Anticarcinogenic Effects of alginic Acid Extracted from Sporophyll of Sea Mustard

  • Cho, Eun-Ju;Rhee, Sook-Hee;Park, Kun-Young
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제3권2호
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    • pp.169-174
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    • 1998
  • Antimutagenic and anticarcinogenic effects of alginic acids extracted from sea mustard(SM) and sporophyII of sea mustard(SSM) were studied by Salmonella typhimurium assay system and cytotoxicity and transformation tests using C3H/10T1/2 cells, respectively. alginic acid-SM andalginic acid-SSM showed antimutagenic effects on aflatoxin B1(AFB1)and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Salmonella typhimurium TA100 strain. The antimutagenic effect showed concentration dependent manner. At the 2.5mg/plate concentration , alginic acid-SSM exhibited 92% antimutagenicity against AFB1 ,while alginic acid-SM revealed 54% antimutagenictity ,s howing effectiveness of the alginic acid-SSM for the antimutagenicity. Alginic acidSSm also significantly decreased the cytotoxicity induced by 3-methylcholanthrene(MCA) and MNNG in C3H/10T1/2 cells (p<0.05). The type II and type IIItransformation foci formation by MCA and MNNG were also decreased when the alginic acid-SSM was treated, indicating that the alginic acid -SSM reduces the carcinogenesis induced by these carcinogens. The MCA-treated culture produced 10.5foci of type II +III in C3H/10T1/2 cells, however, MCA + 0.2mg/ml alginic acid-SSM treated culture formed only 1.8 foci of the types II + III in C3H/10T1/2 cells, however , MCA+0.2mg/ml alginic acid -SSM treated culture formed only 1.8 foci of the types II+ III(p<0.05). While MNNG-treated culture formed 13.0 foci, MNNG + 0.2mg/ml alginic acid -SSM treated one produced 3.0 foci of type II+III(p<0.05). These results suggest that alginic acid-SSM can effectively prevent the mutagenicities and also decrease cytotoxicity and transformation induced by some carcinogens.

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투명 양이온 계면활성제 ASCO EAQ80에 대한 급성 경구 독성시험 및 유전 독성시험에 관한 연구 (Acute Oral and Genetic Toxicity Study of ASCO EAQ80, a Novel Cationic Surfactant)

  • 김병조;김동현;이종기;문석식
    • 공업화학
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    • 제20권2호
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    • pp.145-153
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    • 2009
  • 본 연구는 투명한 섬유유연제 제조용 양이온 계면활성제인 ASCO EAQ80의 개발 완료 후 이 제품의 안전성과 관련된 평가를 받기 위하여 실시되었다. 시험은 급성 경구투여 독성시험과 유전 독성시험으로 나뉘어 진행되었으며, 랫드를 이용한 경구 단회 투여 독성시험 결과, $LD_{50}$는 5000 mg/kg를 초과하는 것으로 판단되었으며, Globally Harmonized Classification System의 기준에 의해 Category 5 또는 Unclassified로 분류되었다. 시험물질인 ASCO EAQ80의 복귀돌연변이 유발성에 대해서, 살모넬라균(TA98, TA100, TA1535, TA1537) 및 대장균(WP2uvrA (pKM101))을 이용하여 대사활성화 및 비대사활성화의 경우에서 변이원성 시험을 실시하였고, 그 결과는 모두 음성으로 판정되었다. 또한, 염색체이상 유발성 여부를 검색하기 위하여 Chinese Hamster Lung (CHL/IU) 배양세포를 이용하여 염색체이상시험을 수행하였으며, 시험물질인 ASCO EAQ80은 단시간처리법 및 연속처리법의 경우 대사활성계 적용여부에 관계없이 Chinese Hamster Lung (CHL/IU) 배양세포에 대해 염색체이상을 유발하지 않는 것으로 확인되었다.

Dot-Blotter 진공 포획방식에 의한 미생물세포 면역분석시스템의 개발 (Development of Immuno-Analytical System for Microbial Cells by using Dot-Blotter)

  • 목락선;하연철;윤희주;백세환
    • KSBB Journal
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    • 제14권1호
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    • pp.82-90
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    • 1999
  • 병원성 미생물을 측정할 수 있는 분석시스템을 구성하기 위해 면역학적 성분들을 합성하였고, 이를 이용하여 모델 시스템을 구성함으로써 균 세포 분석원리가 연구되었다. 구성성분을 준비하기 위해 Salmonella thompson에 대한 복합 클론항체를 면역 친화 크로마토그래피를 이용하여 정제하였고, 이렇게 정제된 항체를 Streptavidin과 horseradush peroxdase에 화학결합시켰다. 항체와 Streptavidinfdm은 각각 SMCC와 SPDP에 의해 활성화 되있고 두 물질을 반응시킴으로써 중합체가 합성되었다. 중합체는diaminobiotion 젤과 sephades G-100젤을 이중 층으로 쌓은 칼럼을 이용하여 정제되었다. 항체- HRP 중합체의 합성을 위해, HRP를 $NAIO_4$ 처리에 의해 안정화된 중합체는 Biohel A5M을 이용한size exchusion크로토그래피로 정제되었다. 이렇게 준비된 중합체들과 dot-bloner 그리고 biotim이 고정화된 nitrocellulose membrane($12\mum$ pore size)을 이용하여 모델시스템을 구성하였다. 분석물질(S.Thormpson cells)을 먼적 액상에서 두 중합체와 반응되었고 반응먹을 membrane이 정착된 blotter에 옮긴 후 하부에 진공을 걸어 면역복합체를 biotin-streptavidin 반응에 의해 membrane 표면에 포획하였다.최적조건 하에서 시스템의 균 세포 분석원리를 확인하였으며 측정하한농도는 약 $1{\mu}g/m{\ell}(10^5 {\cdot} 10^6\;cells/m{\ell}$인 것으로 나타났다. 이러한 측정성능의 주요조절인자는 두항체 종합체 농도의 증가는 항원-항체 응집반응을 초래하는 것으로 나타났다.

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뇨 돌연변이 유발성 시험법 정립 (Optimization of bacterial urinary mutagenicity test)

  • 장미;신한재;박철훈;손형옥;현학철
    • 한국연초학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.18-24
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    • 2015
  • Urinary mutagenicity is widely recognized as a useful biomarker for the assessment of mutagen exposure level in human. In this study, we optimized the several parameters affecting the activity of Urinary mutagenicity using highly sensitive mutation test(microsuspension assay) instead of the conventional Ames test. First of all, we chose YG1024 as a highly sensitive strain from three str ains of Salmonella typhimurium(TA98, TA100, YG1024) using r epr esentative mutation substances, such as Benzo[a]pyrene, 2-Aminonaphthalene, 2-amino-3-methyl-9H-pyrido[2,3-b]indole($MeA{\alpha}C$) and cigarette total particulate matter(TPM). And we established the several kinds of test conditions such as number of bacter ia, concentr ation of metabolic activation system and incubation time for the most sensitive reaction. Also, we optimized efficient pre-treatment method using commercial C18 column. As a r esults, this method was shown a aver age of 94 % recovery value and 13 % relative standard deviation. When we compared the Urinary mutagenicity between several participants, we confirmed that compar ative measurements were possible for different levels of urine mutagenicity. In conclusion, the optimized highly sensitive mutation test to measure the Urinary mutagenicity may be useful in biological monitoring of mutagen exposure level.

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이온화 에너지를 조사한 수입 오렌지의 유전독성학적 안전성 평가 (Genotoxicological Safety Evaluation of Imported Oranges Irradiated with Ionizing Energy)

  • 황옥화;정다운;강일준
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제43권6호
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    • pp.909-915
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    • 2014
  • 본 연구에서는 방사선 조사 오렌지의 수입 가능성이 높아짐에 따라 이들의 안전성을 검토할 목적으로 0.5, 1 kGy 감마선 조사 수입 오렌지의 복귀돌연변이 시험, 소핵 및 염색체 이상시험의 유전독성학적 안전성 평가를 수행하였다. S. Typhimurium TA98, TA100, TA1535 및 TA1537에 대한 감마선 조사 수입 오렌지(0.5, 1 kGy)의 복귀변이 집락수를 조사한 결과, 대사활성계 도입 및 부재 시 0.625~10 mg/plate의 범위에서 복귀변이 집락수의 농도 의존적인 증가 혹은 감소를 보이지 않았다. 포유류 배양세포를 이용한 염색체이상시험에서 0.5, 1 kGy 감마선 조사 수입 오렌지는 1.25~10 mg/mL의 시험적용 용량에서 염색체이상 유발능이 5% 미만이어서 염색체이상을 유발하지 않는 것으로 나타났다. 설치류 망상적혈구를 이용한 소핵형성 시험을 수행한 결과, 시험적용 용량인 250~2,000 mg/kg의 범위에서 0.5, 1 kGy 감마선 조사 수입 오렌지는 소핵을 가진 망상적혈구의 출현율이 음성대조군과 유의한 차이를 나타내지 않아 소핵을 유발하지 않음을 확인하였다. 이상의 결과, 0.5, 1 kGy 감마선 조사 수입 오렌지는 본 시험조건에서 유전독성이 없는 것으로 나타났다.