• 제목/요약/키워드: Salmonella assay system

검색결과 84건 처리시간 0.026초

Mousse cake와 Tiramisu에 인위접종된 Salmonella Typhimurium의 식품공전 분리배지, Real-time PCR과 Loop-mediated isothermal amplification-bioluminescence의 검출 특성 비교 (Comparison of Isolation Agar Method, Real-Time PCR and Loop-Mediated Isothermal Amplification-Bioluminescence for the Detection of Salmonella Typhimurium in Mousse Cake and Tiramisu)

  • 이소영;곽승해;김진희;오세욱
    • 한국식품위생안전성학회지
    • /
    • 제34권3호
    • /
    • pp.290-295
    • /
    • 2019
  • 최근 한국에서 발생한 Salmonella로 인한 식중독 사고는 2018년 9월 학교급식에서 제공된 초콜릿 무스 케이크가 원인이 되었다. 이 연구의 목적은 Salmonella Typhimurium이 인위적으로 접종된 무스케이크와 티라미수에서 3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella와 식품공전에 등재된 방법인 분리배지와 real-time PCR을 비교하는 것이었다. 무스케이크 2종과 티라미수 2종 25 g에 225 mL BPW를 넣고 $37^{\circ}C$에서 24시간 동안 증균 배양하였다. 배양 후, 3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella, 분리배지 그리고 real-time PCR로 분석하였다. 초콜릿 무스 케이크를 제외하고 3가지 방법은 유사한 결과를 보였다. 초콜릿 무스 케이크에서 분리배지와 3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella는 모든 접종수준에서 동일한 결과를 나타낸 반면 real-time PCR은 $10^4CFU/25g$ 수준에서 1번의 양성결과를 제외하고 모두 검출되지 않았다. 초콜릿 무스에 S. Typhimurium을 $10^2CFU/25g$ 수준으로 접종하였을때, real-time PCR를 이용한 검출은 15%에서는 부분적인 음성을 나타냈고, 20-100% 함량의 초콜릿 무스에서는 모두 음성이었다. Real-time PCR로는 chocolate이 15% 이상 함유된 식품에서의 Salmonella균 검출이 불가능하였지만, LMAP 기반의 3M Molecular Detection Assay 2으로는 chocolate 농도에 관계없이 검출이 가능하였다.

Salmonella / Microsome Assay 에서의 N-nitrosodimethylamine의 돌연변이 유발성과 N-nitrosodimethylamine의 생성에 대한 비타민 C의 영향 (Mutagenicity of N-Nitrosodimethylamine in Salmonella / Microsome Assay and the Effect of Vitamin C on the Formation of N-Nitrosodimethylamine)

  • 김소희;박건영;서명자
    • 한국식품영양과학회지
    • /
    • 제20권3호
    • /
    • pp.260-265
    • /
    • 1991
  • Salmonella/microsome assay system을 이용하여 N -nitrosodimethylamine (NDMA)의 돌연변이유발성을 검토하는 효과적인 방법과 비타민 C가 NDMA자체의 돌연변이유발과 nitrite와 2급아민으로부터의 NDMA 생성에 미치는 영향을 연구하였다. NDMA를 활성화시키기 위한 S9중 Aroclor1254로 induce시킨 hamster S9이 가장 효과가 있었으며 Aroclor 1254나 phenobarbital로 induce시킨 rat 59 mix에 의하여서는 활성화가 약하였다. DMSO와 ethanol에 NDMA를 녹였을 때는 돌연변이유발실험에서 저해효과가 나타났으나 phosphate buffer(pH 7. 4), 증류수, 95% methanol, Tween 80 + water(l : 4)는 저해 효과가 없었다. 비타민 C는 이미 생성환 NDMA에 대해서는 돌연변이 유발저해 효과를 나타내지 않았지만 nitrite와 2급 아민(dimethylamine)으로 부터의 NDMA 생성은 크게 저해하였다. 반응물에 비타민C를 첨가한 경우 Salmonella typhimurium TAl00의 revertant 수가 spontaneous숫자 수준으로 감소되었으며 HPLC를 이용한 NDMA의 분석에서도 거의 95% 까지의 정량적인 감소를 관찰할 수 있었다.

  • PDF

Comparison of Gold Biosensor Combined with Light Microscope Imaging System with ELISA for Detecting Salmonella in Chicken after Exposure to Simulated Chilling Condition

  • Mi-Kyung Park
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제33권2호
    • /
    • pp.228-234
    • /
    • 2023
  • In this study, the performance of a gold biosensor combined with light microscope imaging system (GB-LMIS) was comparatively evaluated against enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting Salmonella under simulated chilling condition. The optimum concentration of antiSalmonella polyclonal antibodies (pAbs) was determined to be 12.5 and 100 ㎍/ml for ELISA and GBLMIS, respectively. GB-LMIS exhibited a sufficient and competitive specificity toward three tested Salmonella among only. To mimic a real-world situation, chicken was inoculated with Salmonella cocktail and stored under chilling condition for 48 h. The overall growth of Salmonella under chilling condition was significantly lower than that under non-exposure to the chilling condition (p < 0.05). No significant differences in bacterial growth were observed between brain heart infusion and brilliant green broth during the enrichment period (p > 0.05). Finally, both GB-LMIS and ELISA were employed to detect Salmonella at every 2-h interval. GB-LMIS detected Salmonella with a competitive specificity by the direct observation of bacteria on the sensor using a charge-coupled device camera within a detection time of ~2.5 h. GB-LMIS is a feasible, novel, and rapid method for detecting Salmonella in poultry facilities.

Salmonella 실험계에서 케일즙액의 항돌연변이의 효과와 활성획분 (Antimutagenic Effect and Active Compound Analysis of Kale Juice in Salmonella Assay System)

  • 이선미;박건영;이숙희
    • 한국식품영양과학회지
    • /
    • 제26권5호
    • /
    • pp.965-971
    • /
    • 1997
  • Antimutagenic effects of kale juice on the mutagenicity induced by $B_{1}(AFB_{1})$ N-methyl-N'-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Salmonella assay system were studied. The freeze dried kale juice significantly reduced the mutagenicity induced by $AFB_{1}$ in Salmonella typhimurium TA100 and TA98. However, the kale juice exhibited less inhigbitory effect on the mutagenicity induced by MNNG as the concentrations of the juice sample increased. Also, kale juice after dialysis (>12,000, Mw) appeared to have 42.3∼89.5% of inhibitory effects against $AFB_{1}$, however, the dialyzate did not show any inhibitory effect against MNNG. To separate and identify the antimutagenic compounds from the kale juice, the dialyzates were further fractioned by using Sepharose CL-6B-200 gel filtration. Fraction number 13 showed the strong antimutagenic activity against $AFB_{1}$, and the fraction exhibited positive results of a characterized colour reactions of protein, carbohydrate and phenolic compound. Therefore, one of the possible active compounds from the kale juice was supposed to a glycoprotein(Mw. 270,000) which seemed unstable with heating.

  • PDF

Development of Geno-chromatographic Assay System for Salmonella species

  • 김석하;오홍일;조정환;백세환
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
    • /
    • pp.827-828
    • /
    • 2001
  • 이 실험은 특정 DNA를 검출 할 수 있는 새로운 방법을 제시하고 개발하려는 것이다. 이것은 geno-chromatography 분석방법이라고 하여 DNA capture probe를 membrane상에 고정하고 PCR을 통하여 증폭된 특정 유전자를 hybridization 반응을 이용하여 탐지하는 것이다. 이러한 개념을 식중독균의 일종인 Salmonella 균의 탐지에 적용하여 그 분석시스템의 성능을 확인 할 수 있었다.

  • PDF

Ultrafast Real-time PCR법을 이용한 살모넬라의 신속 검출 (Rapid Detection for Salmonella spp. by Ultrafast Real-time PCR Assay)

  • 김석환;이유시;주인선;곽효선;정경태;김순한
    • 한국식품위생안전성학회지
    • /
    • 제33권1호
    • /
    • pp.50-57
    • /
    • 2018
  • Salmonella는 전세계적으로 식중독을 유발하는 주요 원인 균으로서, 식중독을 유발하는 Salmonella를 신속하게 검출하는 방법은 식품 안전을 위한 중요한 도구이다. Real-time PCR은 식중독균을 검출하기 위한 신속검사법으로 널리 사용되어 왔다. 최근에는 NBS LabChip real-time PCR이라는 새로운 시스템이 칩타입으로 조작이 간편하며 초고속의 real-time PCR 시스템이라는 보고가 있었다. 본 연구에서는 살모넬라의 신속한 검출을 위하여 NBS LabChip real-time PCR에 기반하여 real-time PCR 반응 시간이 20분 이내인 검출법을 확인하고자 하였다. 프라이머와 프로브 설계를 위해 두 개의 타겟 유전자(invA, stn)가 선택되었으며, 특이도와 민감도(검출한계)를 평가함으로 개발된 검출법을 검증하고자 하였다. 본 연구에서는 특이도 검증을 위해 Salmonella 균주 42주와 Non-Salmonella 균주 21주를 포함하였으며, 본 방법으로 Salmonella 42주에 대해서만 정확하게 검출이 가능하였다. 검출한계는 살모넬라 genome DNA 기준으로 $10^1copies/{\mu}L$으며, 소시지에서는 4시간 증균 이후 접종균수로서 $10^1CFU/g$에서 $10^2CFU/g$까지 검출이 가능하였다. 본 연구에서 개발된 검출법은 신속한 식중독 원인조사에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

Immuno-Chromatography 방법을 이용한 식중독균(Salmonella typhimurium) 1단계 분석시스템의 개발 (Development of One-Step Immuno-Chromatography Assay System for Salmonella typhimurium)

  • 백세환;이창우이창섭육순학
    • KSBB Journal
    • /
    • 제11권4호
    • /
    • pp.420-430
    • /
    • 1996
  • 열처리된 Salmonella typhimurium 항원을 모델 분석물질로 선택하여 단지 시료만을 첨가함으로써 측정을 수행할 수 있는 1단계 immuno--chromatogra phy 분석시스템이 개발되었다. 개발된 시스템은 분 석물질 특정항체(감지항체)-gold 중합체가 건조된 상태로 축적된 glass fiber membrane(하단), 분석 물질의 다른 epltope를 인지하는 항체(포획항체)와 항 감지항체 특정항체들이 공간적으로 분리되어 고정화된 nitrocellulose membrane(중단) 그리고 흡수대로 선택된 cellulose membrane ( 상단)들로 구성된다. 이와 같은 구성성분들은 분석물질을 포함한 시료수용액이 모세관현상에 의해 연속적으로 이동되도록 부분척으로 포개어 배열되었다. 분석시스템의 성능을 조절하는 변수들은 포획항체의 농도 및 membrane 상의 고정화 위치, membrane 표면처리 와 시료운반용액에 샤용된 비반응성 단백질의 종류, 그리고 중합체의 농도로써 확인되었다. 최적조건하 에서, 시스템의 하부로부터 시료수용액을 흡수 후 15분 이내에 포획항체가 고정화된 membrane 상의 지역에 샌드위치 형상의 항원 항체 면역결합체가 형성되었고 이로부터 발생된 발색신호는 분석물질의 농도에 비례하는 것으로 나타났다. 분석물질의 측정 하한농도는 $1{\times}106$ Salmonella cells/mL인 것으로 나타났다.

  • PDF

Antimutagenic Effect of Plant Flavonoids in the Salmonella Assay System

  • Choi, Jae-Sue;Park, Kun-Young;Moon, Suk-Hee;Rhee, Sook-Hee;Young, Han-Suk
    • Archives of Pharmacal Research
    • /
    • 제17권2호
    • /
    • pp.71-75
    • /
    • 1994
  • The antimutagenic effects of 27 kinds of plant flavonoids on the mutagenicity of aflatoxin $B_1(AFB_1)$ and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MANG) in Salmonella typhimurium TA 100 were investigated. In the mixed applications of $AFB_1\;(1\;\mu{g/plate)}$ with the flavonoids $(300\;\mu{g/plate)}$ in the presence of a mammalian metabolic activation system (S9 mix), chrysin, apigenin, luteolin and its glucoside, kaempferol, fisetin, morin, naringenin, hesperetin, persicogenin, (+)-catechin and (-)epicatechin showed the antimutagenic effect against $AFB_1$ with more than 70% inhibition rate. A little or no antimutagenicities except flavone against MNNG $(0.5\;\mu{g/plate)}$ were observed. For the antimutagencity of the flavonoids on $AFB_1$, the flavonoid structure that contains the free 5, 7-hydroxyl gorup seemed to be essential. However, saturation of the 2, 3-double bond of elimination of the 4-keto group did not affect the activity.

  • PDF

식품 보존 스트레스에서의 식중독세균의 생체막 생성 (Biofilm Formation of Food-borne Pathogens under Stresses of Food Preservation)

  • 이노아;노봉수;박종현
    • 한국식품과학회지
    • /
    • 제38권1호
    • /
    • pp.135-139
    • /
    • 2006
  • 세균이 외부stress에 대한 자가저항으로 biofilm형성을 하는 것은 식품 뿐만아니라 식품기기등의 세척, 소독등의 식품안전 확보에 많은 어려움을 주게 된다. 본 연구에서는 glass wool과 mlcrotiter plate assay를 이용하여 주요 식중독 세균인 Salmonella, E. coli, B. cereus, S. aureus를 여러가지 식품보존하에서 상해와 biofilm형성 정도를 비교하였다. 이들 세균은 외부의 stress없는 조건하에서도 상해를 받지 않았고 모두 biofilm이 형성되어 glass wool에 부착되었다. Microtiter plate assay에서의 상해별 biofilm형성은 acid stress에서 10%이내의 상해를 받은 E. coli와 약 40%의 상해를 받은 S. aureus에서 높게 나타났다. $4^{\circ}C$의 cold temperature에서는 30-50% 상해를 나타낸 B. cereus와 E. coli가 높은 biofilm 형성을 보였고 cold starvation에서는 다른 stress에 비해 전체적으로 biofilm형성도가 낮은 값으로 측정되었다. 그리고 6% sodium chlorine solution에서 30-55%의 상해를 입은 Salmonella가 높은 biofilm 형성도를 보였다. 그러나 같은 종의 식중독 세균이라도 외부의 stress 대하여 다양한 정도의 biofilm을 생성하는 것으로 보인다. 따라서 식품으로부터 이들 식중독 세균을 제어하기 위해서는 대상식품의 보존환경에 따른 biofilm 형성특성을 고려해야 할 것으로 사료된다.

Antimutagenic and Anticance Effects of Buchu Kimchi

  • Jung, Keun-Ok;Lee, Kyeoung-Im;Suh, Myoung-Ja;Park, Kun-Young
    • Preventive Nutrition and Food Science
    • /
    • 제4권1호
    • /
    • pp.33-37
    • /
    • 1999
  • The antimutagenic effects of buchu kimchi and Chinese cabbage kimchi and theri cytotoxic effects against human cancer cell line were investigated in the Salmonella typhimurium system and MTT assay, respectively. Leek and Chinese cabbage were aslo evaluated in the same system. Buchu kimchi was fermented at 15 $^{\circ}C$ for 4 days . Buchu kimchi samples showed somewhat higher antimutagenic effects against aflatoxin B1(AFB1) than CHinese cabbage kimchi in Salmonella typhimurium TA100 strain. There was no difference onthe antimutagenic activity according to the length of fermentation . Leek exerted stronger antimutagenicity against AFB1 than Chinese cabbage in the Ames assay. In MTT assay, 6-day fermented buchu kimchin revealed the highest cytotoxicity against AGS human gastric adenocarcinoma cells in which 62% and 82% of the inhibition were observed wiht the addition of 100ug, 400ug/well, respectively. Buchu kimchi samples caused 60~70% inhibition on the proliferation of HT-29 at 400ug/well. Leek exhibited higher antiproliferative effect against both AGS cells and HT-29 cells than Chinese cabbage in MTT assay. From these results, it is considered that buchu kimchi has stronger antimutagenic and in vitro anticancer effects than Chinese cabbage kimchi and the high inhibition rate of buchu kimchi probably results from leek, the major ingredient of buchu kimchi .

  • PDF