본 연구는 항생제인 naliidixic acid (NA)에 내성이 있는 Salmonella tyhimurium에 대한 녹차폴리페놀(TPP)와 NA의 시너지적 살균효과와 세포반응을 조사하기 위하여 수행되었다. 초기세포밀도$10^7$ cell/ml의 S. typhimurium에 대한 살균효과는 $>3,500{\mu}g/ml$ TPP와 $<256{\mu}g/ml$ NA에서 조사하였다. NA 감수성인 S. tyhimurium은 $3,500{\mu}g/ml$ TPP 또는 $256{\mu}g/ml$ NA의 농도에서 6시간 이내에 완전히 제거되었으나, 동일한 조건하에서 NA 내성 S. typhimurium은 일부만이 살균되었다. 그러나 NA 감수성 인 S. typhimurium에 대한 $3,000{\mu}g/ml$ TPP과 $32{\mu}g/ml$ NA의 병용, 그리고 NA 내성인 S. typhimurium에 대한 $3,500{\mu}g/ml$ TPP과 $64{\mu}g/ml$ NA의 병용으로 5시간 이내에 완전한 살균효과를 나타내었다. 스트레스 단백질이 이들 S. typhimurium에 대한 스트레스 원으로서 TPP와 NA에 대한 반응으로 유도되었다. SDS-PAGE와 Western blot에 의하여 그 단백질들은 70-kDa의 DnaK와 60-kDa의 GroEL로 동정되었다. 스트레스에 의해 유도된 단백질은 TPP나 NA의 노출량에 비례하여 증가하였다. 주사전자 현미경 분석에 의하여 TPP나 NA에 의해 처리된 세포는 세포표면에 구멍 이 나고 불규칙적인 막대모양으로 관찰되었다.
국내산 과일 주스 4종을 준비하고 식중독 유발균인 Listeria monocytogenes와 Salmonella Typhimurium를 접종하여 14일 동안 $4^{\circ}C$에서 보관하며 항균 효과를 살펴본 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. L. monocytogenes 에서는 매실 주스가 가장 뛰어난 효과를 나타내어 보존 14일만에 생존하고 있는 균을 전혀 측정할 수 없었으며, 그 다음으로 키위가 3.0 log만큼 억제를 보이는 항균 효과를 나타내었다. 감귤의 경우 1.0 log만큼 억제하는데 그쳤다. 매실주스 10%를 다른 주스에 혼합하였을 때 L. monocytogenes는 키위 즙에서 더욱 향상된 항균 효과를 나타내어 14일 후 생존 균을 측정할 수 없었고, 감귤주스에서도 1.5 log 만큼의 향상된 항균 효과를 나타내었다. S. Typhimurium은 전반적으로 L. monocytogenes 보다 더 쉽게 억제되는 경향을 보였다. 키위 즙과 매실 주스에서 접종한 모든 균이 보존 14일 후 생존하지 않는 것으로 관찰되었으며, 감귤의 경우에는 1.4 log 만큼밖에 억제하지 못했다. 10%의 매실과 혼합된 주스에 S. Typhimurium을 접종한 결과 키위 즙에서는 접종한 전 균이, 감귤주스에서는 3.2 log 만큼의 증가된 억제효과를 나타내었다. 이상과 같은 결과로 볼 때, 매실은 식중독 유발균에 대한 강한 항균 활성을 가지고 있으며 다른 과실주스에서의 식중독을 예방하기 위한 식품 보존 첨가제로서 사용이 가능할 것으로 기대된다.
살모넬라와 부루셀라는 가축에 심각한 질병을 유발하며, 축산업과 식품산업에 많은 경제적 손실을 초래하고 있다. 본 연구에서는, 이산화염소와 베타인 염산염을 주성분으로 한 소독제 바이탈옥사이드의 $Salmonella$$typhimurium$과 $Brucella$$ovis$에 대한 효력시험을 수행하였다. 배지희석법을 이용한 살균효력시험은 $4^{\circ}C$에서 30분 동안 시험 세균을 희석 소독제에 노출시켜 소독제의 가장 효과적인 낮은 희석배수를 결정하는 시험이다. 바이탈옥사이드와 시험 세균들을 처리조건에 따라 증류수, 경수, 그리고 유기물 등으로 희석하여 반응을 시켰다. 유기물 조건에서, $Salmonella$$typhimurium$과 $Brucella$$ovis$에 대한 바이탈옥사이드의 살균력은 경수조건에서의 살균력과 비교하여 낮게 나타났는데, 이는 유기물들에 의한 소독제의 살균 유효성분에 대한 저해작용에 따른 것으로 생각된다. 바이탈옥사이드는 $Salmonella$$typhimurium$과 $Brucella$$ovis$와 같은 가축병원성 질병들에 대해 살균효과를 갖고 있기 때문에, 이 소독제는 세균성 질병의 확산을 제어하는데 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
In the present study, the impact of Salmonella Typhimurium on cell-mediated immunity (CMI) was investigated in 5 week-old immuno divergent broiler lines selected for the high and low response to phytohemagglutinin-P. The immune response was assessed in peripheral-blood mononuclear cells (PBMCs) induced with Salmonella Typhimurium at different time intervals (0 h, 0.5 h, 2 h, 4 h, 6 h, 12 h and 24 h). The differential mRNA expression patterns of IFN-${\gamma}$, IL-2 and iNOS were evaluated by quantitative real time PCR. In-vitro production of nitric oxide (NO) was also estimated in the culture supernatant and correlated with iNOS mRNA expression. Present study showed higher production of NO in the high cell-mediated line (HCMI) as compared to the low cell-mediated line (LCMI) upon stimulation with Salmonella Typhimurium. Correspondingly, higher mRNA expression of iNOS and IFN-${\gamma}$ were observed in high response birds (HCMI); but IL-2 was down regulated in this line compared to the low response birds (LCMI). Significantly (p<0.05) higher expression of iNOS, IFN-${\gamma}$ and higher production of NO in high line indicated that the selection for PHA-P response might be employed for increasing the immune competence against Salmonella Typhimurium in chicken flocks.
Many chemical disinfectants are using to protect the foot and mouth disease (FMD) and avian influenza (AI) in Korea since 2000. This study was performed to confirm disinfective ability of commercialized chemical disinfectants and to investigate the sterilizing ability of E-ball as alterative to chemical disinfectants. 4 kinds of acidulant, 3 kinds of aldehyde, 1 kind of oxidizer and 300 g of E-ball were used in this study. Dilution rate of disinfective power of all chemical disinfectants were to 200 times. The sterilizing ability of aldehydes were better than the acidulant and oxidizer with Salmonella typhimurium. The sterilizing ability of E-ball treated solution was guessed due to the friction of E-ball deads. In the case of the friction of 2 beads of E-ball, Salmonella typhimurium was sterilizted on $1{\times}10^6/mL$ CFU in the E-ball treated solution. The E-ball treated solution had superior sterizing power compared with the chemical disinfectants in the bacteria of soil for antibacterial examination. E-ball treated solution has a possibility as the substitute of chemical disinfectants to protective the animal diseases contains FMD, AI.
천연 보존료의 개발을 위한 식품학적 기초자료로 활용하기 위해 인진호 추출물을 이용하여 9종의 병원균과 식중독균에 대한 항균력을 검토한 결과는 다음과 같다. Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhimurium, Vibrio prahemolyticus에 대해 각 용매 추출물에서 고루 항균성을 나타내었고, 물 추출물은 Vibrio prahaemolyticus에 대해서만 항균활성을 나타내었으며, 아세톤 추출물의 항균력이 가장 높았다. 인진호 아세톤 추출물의 최소저해농도(MIC)는 Staphylococcus aureus와 Bacillus subtilis에서 20 mg/mL, Vibrioparahaemolyticus에서 40 mg/mL 그리고 Salmonella typhimurium에서는 80 mg/mL로 나타났으며, 측정된 48시간 동안까지 최소저해농도 이상에서는 균이 거의 생육하지 못하였다. 인진호 아세톤 추출물의 순차 분획물의 항균활성은 에틸아세테이트와 부탄올 분획물이 Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhimurium, Bibrio prahemolyticus에서, 클로로포름 분획물은 Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmuneila typhimurium에서 항균활성을 나타내었으며, 헥산 분획물은 Bacillus subtilis에서만 항균활성을 나타내었다. 이같은 사실은 인진호 추출물의 항균성 물질은 특정 용매에만 용해되지 않고 다른 용매에도 용해되는 성분으로 단일 물질보다는 여러 성분일 것으로 생각된다 이상의 결과에서 천연물에 따라 항균력을 가지는 물질이 다양하여 추출용매의 선정이 항균성을 나타내는 성분을 찾아내는데 중요하다고 생각되며, 또한 인진호에서 추출된 항균성 물질이 Staphylococcus aureus나 Vibrio parahaemolyticus 등 식중독균의 생육억제에 효과가 있을 것으로 사료된다.
Salmonella typhimurium 항원에 면역된 산란계의 계란항체(IgY)생산 및 증가를 측정한 결과, 산란계가 이들 항원에 면역반응을 일으켜 2주 후 혈청과 난황에서 정상군에 비하여 뚜렷한 항체가 생성능을 보였으며. 혈청내의 IgG생성에 비하여 계란항체(IgY)의 생성이 다소 낮은 것으로 나타났다. 혈청 및 난황내의 단백질 함량은 정상군에 비하여 약간 높은 경향을 나타내어 산란계의 혈청 및 난황내의 단백질이 이들 항원에 의하여 증가하는 것으로 나타났다. DEAE-Sephacel column을 통과한 분획은 두 개의 peak를 나타내었다. 각 분획의 IgY농도를 ELISA법으로 확인한 결과 시험관 350-635$m\ell$에 해당되는 두번째 peak에서 대부분 측정되었다. 분리 정제된 IgY의 분자량을 측정한 결과, heavy chain 72-75KD, light chain 30-40KD정도였다. 이상의 결과에서, 본 실험에서 사용된 IgY는 항원에 대한 특이성 및 생화학적 특성 등을 고려해 볼 때, 식품산업 소재, 의약품 소재, 연구용 kit와 진단용 kit 및 축산분야 등 여러 분야에 응용될 수 있으리라 기대된다.
The antibacterial effects of water extracts of Scutellariate Radix (a dried root of Scutellaria baicalensis GEORGI) and its major flavonoid components, Baicalin and Baicalein, on Salmonella typhimurium, a representative enteric pathogen, were studied. Through a Kriby-Bauer disc analysis, the growth-inhibition activity of Scutellariae Radix against. S. typhimurium was found to be compatible with commercial antibiotics, such as ampicillin, chloramphenicol, and streptomycin. In contrast, the growth of a nonpathogenic E. coli strain was unaffercted by Scutellariae Radix. To examine the effect of polyphosphate kinase (ppk), a putative virulence factor, on the antibacterial activity of Scutellariae Radix, the growth profile of a ppk mutant of S. typhimurium was investigated in a tryptic soy broth containing different concentrations of water extracts of Scutellariae Radix. The ppk mutant was able to grow in 6 mg/ml of water extracts of Scutellariae Radix, whereas in 6 mg/ml of water extracts of Scutellariae Radix, whereas the wild-type could not, implying that the inactivation of ppk made S. typhimurium more resistant to the antibacterial activity of Scutellariae Radix. No enhanced resistance was observed in a ppk mutant of S. typhimurium complemented with a ppk expression vector. The attenuation of the virulence by ppk inactivation was also observed in a virulence assay using BLAB/c mice. Neither Baicalin nor Baicalein exhibited any growth-inhibition activity against S. typhimurium. The water extracts of Scutellariae Radix stimulated the transcription of ppk, especially in the early growth-stage of S. typhimurium.
To date, there has been no employment of a magnetoelastic (ME) biosensor method to detect Salmonella enterica serovar Typhimurium in soil. The ME biosensor method needs to be investigated and modified for its successful performance. The filtration method, cation-exchange resin method, and combinations of both methods were employed for the extraction of S. Typhimurium from soil. The number of S. Typhimurium and the resonant frequency shift of the ME sensor were then compared using a brilliant green sulfa agar plate and an HP 8751A network analyzer. A blocking study was performed using bovine serum albumin (BSA), polyethylene glycol (PEG), and casein powder suspension. Finally, the modified ME biosensor method was performed to detect S. Typhimurium in soil. The number of S. Typhimurium was significantly decreased from 7.10 log CFU/soil to 4.45-4.72 log CFU/soil after introduction of the cation-exchange resin method. The greatest resonant frequency shift of the measurement sensor was found when employing centrifugation and filtration procedures. The resonant frequency shift of the PEG-blocked measurement sensor was $3,219{\pm}755Hz$, which was significantly greater than those of the BSA- and casein-blocked ME sensor. The optimum concentration of PEG was determined to be 1.0 mg/ml after considering the resonant shift and economic issue. Finally, the modified ME biosensor method was able to detect S. Typhimurium in soil in a dose-response manner. Although these modifications of the ME biosensor method sacrificed some advantages, such as cost, time effectiveness, and operator friendliness, this study demonstrated a novel approach of the ME biosensor method to detect S. Typhimurium in soil.
본 연구는 황련, 금은화, 그리고 백작약 혼합분말(1:1:1)의 메탄올 추출물(CLP1000)과, 이에 dioctahedral smectite를 혼합한 합제 (CLPS1000)의 살모넬라에 대한 항균효과를 평가하기 위해 수행되었다. CLP1000와 CLPS1000는, 0. 5mg/ml 농도에서 S. typhimurium에 대한 항균효과를 보이지 않았으나, 1.0 mg/ml의 농도에서는 S. typhimurium에 대한 항균활성이 관찰되었다. BALB/c 마우스를 이용한 살모넬라 감염시험에서 Smectite, CLP1000 그리고 CLPS1000을 각각 10 mg/ml 농도로 12일 동안 투여한 결과, 사망률이 각각 90%, 90% 그리고 70%을 보여, CLPS1000이 마우스 살모넬라증에 강력한 효과를 갖고 있는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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