The sex-determining region on the Y (SRY) gene is important in mammalian sex determination and differentiation. We report a study of the abundance of SRY gene products in bovine ejaculate. RT-PCR experiments using RNA extracted from bovine spermatozoa with SRY-specific primers yielded a 456 bp product, but the amount of SRY mRNA in sperm was lower than that in the testes (p<0.01). A protein of approximately 27 KDa was detected by western blotting. The SRY transcript was detected in the midpiece of approximately half the spermatozoa by in situ hybridization, and the SRY protein was detected in the heads of half the spermatozoa by immunofluorescence, indicating that SRY mRNA and protein may only be present in Y-bearing spermatozoa. These results suggest that the SRY transcript and protein are present in bovine ejaculated Y-sperm. The roles of the SRY gene in spermatogenesis, sperm motility, and the sperm-oocyte interaction merit further investigation.
SOX9과 SRY 유전자는 척추동물에서 남성고환의 형성을 유도하는 요소로 알려졌다. SOX9 유전자는 SRY related HMG box gene중 하나로 유전질환의 XY성전환 및 성을 결정하는 데에 관여하며 성결정시기에 그 양에 따른 성전환 발생등 연구가 진행되고 있다. 그러나 이 유전자가 성별판정에 유용할 지는 확실치 않다. 반면 SRY 유전자는 포유동물에서의 배형성시기 고환형성을 결정하는 Y염색체 유전자로 남성에만 존재하고 여성에는 존재 않는다. 현재까지 이을 이용하여 법의학적 검체에서 남성판별에 유용하게 사용되고 있다. 본 실험에서는 X, Y와 같은 성염색체가 아닌 상동염색체상에 있으면서 SRY 유전자와 더불어 남성고환을 결정하는 또다른 요소로서의 기능을 가진 SOX9 유전자를 치아에서 검출하여 법의학적 성별판정에 유용할 수 있는지 알아보고자 본 연구를 수행하였다. 남녀각각 5개의 치아에서 치수와 상아질을 분리한 후 DNA를 추출하여 SOX9과 SRY 유전자의 특이적인 시발체를 제작하고 중합효소연쇄반응을 시행하여 증폭하고 전기영동을 시행하였다. 그 결과 SOX9 유전자는 남녀모두에서 유전자가 검출되었고, SOX9 유전자산물과 SRY 유전자를 혼합하여 사용시 남자에서만 유전자가 검출되었다. 이는 법의치과학적 성별판정에 있어 SOX9 유전자는 사람의 치아에서는 남녀 모두 존재하며 남녀 구별을 위한 성별판정에는 이용할 수 없으며 SRY 유전자와 함께 적용시 남성 특이적 SRY 유전자 검사중 발생할 수 있는 가성 음성 반응여부를 확인하는 데 유용할 것으로 사료된다.
SRY gene is normally responsible for testis induction, yet testis development can occur in the absence of SRY. In here, we analyzed the SRY-negative sex reversal in cocker spaniel, at 1.5 year-old. The attacked dog was suffered from enlarged clitoris, and resulted in disorder of urination. By surgically approach, enlarged clitoris and one testis, which are apparently seen, are removed. Additionally, thorough the abdomen surgery, uterus and ovary-like mass were removed. The dog had XX, chromosome, showed negative for SRY-gene, and the mass had the ovary-testis structure. In other words, based on the macroscopic, cytogenic, and histological study, we can diagnose the cocker spaniel as SRY-negative sex reversal.
A 15-year-old female with primary amenorrhea and Tuner's syndrome feature was referred for a chromosome analysis. The karyotype of the patient was 45,X/46,X,der(Y) mosaicism under initial GTG-banding analysis. Fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis with probe for CEP X probes and SRY probe (Vysis, Inc. Downers Grove, IL 60515, USA) was carried out. This probe is direct labeled with SpectrumOrange (SRY, Yp11.3) and is available as a single probe or mixed with the CEP X SpectrumGreen probe. SRY SpectrumOrange/CEP X SpectrumGreen hybridized to a specimen obtained from an two isodicentric Y chromosomes. The karyotype of the patient was ish Xcen(DXZ1x1)/Xcen(DXZ1x1), Yp11.3(SRYx2) by using FISH. This karyotype was considered a variant of Tuner syndrome with mixed gonadal dysgenesis (MGD), male pseudohermaphroitism (MPH) and apparently normal male.
The objective of this study was to develop a rapid and reliable method for the sex determination of beef using the PCR(polymerase chain reaction) technique. We have used two bovine sex determining genes, SRY and ZFY, on the Y-chromosome to identify the sex of Hanwoo and Holstein beet. We attempted to amplify 1,348 bp and 979 bp fragments from male and female genomic DNA corresponding to the SRY and ZFY genes, respectively, using male specific primers. The amplified PCR products were separated by electrophoresis in a 1.5% agarose gel to detect a male specific DNA band. When DNA from male beef was amplified with primers specific for the SRY gene, a DNA band of 1,348 bp was present in all of the male samples, but absent from all of the female samples. Also, when DNA from male beef was amplified with primers specific for the ZFY gene, a DNA band of 979 bp was observed in all of the male samples, but absent from all female samples. In conclusion, the bovine SRY and ZFY genes are typically found only in male beef. For the practical application of this method for the sexing of commercial beef at the processing and marketing stages after slaughter. a total of 350 beef samples collected randomly from local markets were analyzed for sex determination. The proportions of male and female samples were 252 (72%) and 98 (28%), respectively. Therefore. the SRY and ZFY genes. which are specific for the Y-chromosome, may be useful sex-diagnostic DNA markers to distinguish male meat from female meat.
This study was focused on discriminating the molecular sexes of red deer and elk by duplex polymerase chain reaction(PCR) using two primer sets. Sex differentiation of mammals is primarily dependent on the presence or absence of sex determining region Y(SRY) gene encoded on Y chromosome which plays a key role for male development. Zinc finger X-Y(ZFX-ZFY) gene, one of X-Y homology gene group was found on X- and Y- chromosomes, respectively. At first, the nucleotide sequences were characterized for the intron 9 flanking region of ZFX-ZFY genes. The intron 9 of ZFX and ZFY is 529-bp and 665-bp in length, respectively. A transposable element sequence similar to bovine SINE element Bov-tA was detected only in ZFY gene of Cervidae. Sexing analysis was conducted by duplex PCR assay for amplification of SRY and ZFX-ZFY genes. Two differentially amplified patterns were found: one for females has a common band amplified only from ZFX as a template, and another for males had three bands(a common ZFX and two male-specific ZFY and SRY). On the separate tests using each gene, the results was identical to those from duplex PCR assay. Moreover, the results from PCR assays provide also identical information to phenotypic investigation of individuals of red deer, elk as well as their hybridized progenies collected from two isolated farms. These results suggest that it may be a rapid and precise method for determining the sexes by duplex PCR amplification using Y-chromosome specific SRY and X- and Y- homologous ZFX-ZFY genes showing sexual dimorphism in red deer and elk without any other controls.
Kim, Sei-Youn;Ahn, Jong-Mo;Ryu, Geun-Chun;Yoon, Chang-Lyuk
Journal of Oral Medicine and Pain
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v.24
no.3
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pp.325-333
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1999
최근 중합효소연쇄반응을 이용한 분자생물학적 유전자분석기술의 발달로 성염색체상의 유전좌위 증폭을 통한 성별감정이 활발히 이루어지고 있다. 그중 사람 Y염색체상에 존재하는 남성 고환의 형성을 유도하는 sex-determining region Y(SRY) gene이 규명되어 유전질환의 조기 발견이나 예방 및 태아의 성별판정 등에 응용되고 있다. 그러나, 치아는 외부 환경에 대한 저항성이 가장 높은 장기로 성별감정 등 법의치과학적 개인식별에 널리 이용되고 있음에도 불구하고, SRY 유전자를 이용하여 치아에서의 성별감정에 대한 연구는 시도된 바 없다. 따라서, 본 연구에서는 사람 치아에서 중합효소연쇄반응법을 이용한 SRY 유전자를 검출하여 성별판정에 용용하고자 하였다. 남녀 각각 20개 치아의 치수와 상아질에서 DNA를 추출하여 중합효소연쇄반응 을 시행하고 SRY 유전자를 검색한 결과, 남성에서는 치수 13개중 8개, 상아질 7개중 4개에서 SRY 유전자가 검출되었고, 여생에서는 검출되지 않았다. 이러한 결과는 중합효소연쇄반응법을 이용하여 사람 치아에서 SRY 유전자를 검색할 때, 남성판별에 유용하고 치아를 이용한 성별감정시 기존의 성별감정에 이용되고 있는 다른 유전자와 함께 SRY 유전자를 검색함으로써 성별감정의 신뢰도를 높힐 수 있을 것으로 사료된다.
The objective of present study was to ascertain sex determination for individual identification, parentage control, and sex chromosome anomalies in horse. PCR amplification products of the equine sex determining region of the Y chromosome gene (SRY) and amelogenin gene (AMEL) were detected by using agarose gel electrophoresis. A normal sire and foal II showed 1 SRY band (430 bp) and 3 AMEL (AMELX, AMELY, and AMELX/Y) band, 175 bp, 160 bp, 190 bp, respectively, and a normal dam and foal I showed a single AMELX band (175 bp). These results enables a quick diagnosis for sex determination prior to cytogenetic analysis.
A method for sex determination of pigs was examined using polymerase chain reaction(PCR). Sex determining region Y(SRY) gene encoded on Y chromosome plays a key role for primary male development. Zinc finger X-Y(ZFX-ZFY) gene, one of the X-V homology gene group was found on the X and Y chromosomes, respectively, We tested for molecular sexing by amplification patterns of SRY and ZF genes. Genomic DNAs from various resources including porcine hairs and semen collected from domestic pig breeds and native pigs was used for PCR assay of each gene. The amplified products for porcine SRY gene were yielded only in males but not in females. On the other hand, two differential patterns were observed in amplification of ZF gene reflecting the chromosomal dimorphism by a length polymorphism between X and Y chromosomes. Of both, a common band was detected in all individuals tested so that this band might be amplified from ZFX gene as a PCR template, but another is specific for males indicated that from ZFY. The result of PCR assay provides identical information to that from investigation of phenotypic genders of the pigs tested. We suggest that this PCR strategy to determine porcine sexes using comparison of the amplification patterns of the SRY gene specific for Y chromosome and the dimorphic ZF gene between X and Y chromosomes may be a rapid and precise method for discrimination of two sexes and applied to DNA analysis of small samples such as embryonic blastomere, semen, and hairs.
A 3-year-old Cocker spaniel was presented for evaluation because of a mass protruding from the vulva. This mass confirmed the presence of an internal bone in clitoris on the radiography. We recommended to the owner of the surgical removal of the gonads and uterus as well as the excision of the enlarged clitoris and os clitoris. The dog had gonads in the region of where the ovaries were located and presented what appeared to be a bicornate uterus and ductus deferens. Histological analysis revealed a morphologically normal uterus and two testes with their epididymis and ductus deferens. Karyotyping revealed a normal female chromosome constitution (78, XX), and polymerase chain reaction (PCR) identified the absence of Sry. Based on these findings, the patient was diagnosed with Sry-negative XX sex reversal.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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