Kim, Man-Chul;Jang, Tae-Won;Kim, Ju-Sang;Han, Yong-Jae;Harikrishnan, Ramasamy;Han, Song-Hun;Oh, Duck-Chul;Heo, Moon-Soo
Journal of Life Science
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v.19
no.6
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pp.787-792
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2009
In this study, protease-producing bacteria were isolated from the marine sedimentary layer in coastal Jeju. We isolated 2 protease producing strains (SK-2 and SK-125) and tested their protesase producing activities. Gram staining and BIOLOG of isolated strains revealed that strains SK-2 and SK-125 belong to Bacillus and Pseudoalteromonas families, respectively. The 16S rDNA nucleotide sequences analyses of the isolated strains showed 99% sequence homology with those of Bacillus sp. and Pseudoalteromonas sp.; therefore, the isolated strains SK-2 and SK-125 were named Bacillus sp. SK-2 and Pseudoalteromonas sp. SK-125, respectively. The optimum conditions for the cell growth of protease activities were obtained when the both isolates were cultured at $30^{\circ}C$, 96 hrs and pH $7{\sim}8$.
We investigated antitumor activities of the ethanol extract from mushroom Phellinus linteus and Phellinus baumii on mulberry, oak and elm. in vitro test, the ethanol extract of mushroom cultivated on oak of Phellinus linteus showed highest activities about SK-OV-3, HCT15, XF498, SK-MEL-2 and A549. SK-OV-3 cell line showed 100% cytotoxicity in 100 $\mu\textrm{g}$/ml and HCT15 (98.39%), XF498 (89.62%), SK-MEL-2 (84.07%) and A549 (79.92%) cytotoxicity respectively. Also $IC_{50}$ showed 3.99 $\mu\textrm{g}$/ml to SK-OV-3 cell line and HCT15 (4.37 $\mu\textrm{g}$/ml), A549 (5.48 $\mu\textrm{g}$/ml), SK-MEL-2 (6.72 $\mu\textrm{g}$/ml), XF 498 (6.88 $\mu\textrm{g}$/ml). As those results, cultivated oak of Phellinus linteus showed a very low $IC_{50}$ value against SK-OV-3, HCT15, XF498, SK-MEL-2 and A549 cancer cell lines.
SK group has been a pioneer in overall brand management and, more recently, in CSR-imbedded brand management. SK vision of "improving itself to give greater happiness to all of its customers" and the symbol mark of "Wings of Happiness" are some good examples of integrating distinct brand identities of various member companies. After impressive growth and expansions into diverse business areas, SK group is ranked as the third largest company based on asset amounts according to the Fair Trade Commission of Korea, only after Samsung and Hyundai Motor groups. SK brand management can be analyzed, using the framework of 4 stages - 'infrastructure', 'planning', 'doing', and 'seeing' stages. In order to secure 'infrastructure' of brand management system, SK has invested huge resources to the 'SK BMS' (SK Brand Management System). At the 'planning' stage, the most important task of SK like other Korean business groups is perhaps to adopt a well-organized 'brand identity (BI) system' which may consolidate brand values of individual member companies. In actuality, SK BI consists of Customer Happiness located at the center and 3 other elements of Pride, Professionalism, and Customer-orientation. At the 'doing' stage, the slogan of 'OK! SK' and the logo of 'Wings of Happiness' have been placed at the core of the SK group brand building programs. SK adopts the principle of 'independent yet united', pinpointing that each member company independently works for its business performance but it is, at the same time, encouraged to integrate its capabilities for the SK group brand. In addition, SK has sought 'shared growth' with business partners for happiness for all the members in the society. 'Social Contribution Philosophy' based on SK value of 'creation of greater happiness' is again one of the most important guidelines for CSR (corporate social responsibility) at the doing stage. At the seeing stage, SK regularly evaluates its branding programs. SK has shown some very impressive achievements in brand management: (1) a core identity of 'Customer Happiness' participating member companies may share, (2) harmonious relationships between the group brand management office and brand management divisions of member companies, and (3) consistency-keeping in brand management over time. However, there remain two major challenges: (1) globalization of SK and (2) reinforcing sustainable superiority over not only Korean rivals but also global ones.
A strain (designated SK3l) which produces an excellent adsorption substance was isolated from soil samples and identified as Bacillus specied. The major adsorption substance (biosorbent SK3l) produced by Bacillus sp. SK31 was purified by ethanol precipitation and cetylpyridinium (CPC) precipitation. The adsorption charactics of zinc and lead ions on bioadsorbent SK3l were investigated. The equilibrium isotherms showed that bioadsorbent SK3l took up zinc and lead from aqueous solutions to the extent of about 52 mg/g and 112 mg/g. respectively. The culture conditions at the flask level of Bacillus sp. SK3l were investigated for the production of polysaccharide bioadsorbent, SK3l. The optimum pH and temperature for sorbent production were 7.5 and $30^{\circ}C$, respectively. The important carbon and nitrogen sources for sorbent formation were glucose and ammonium nitrate, respectively. In the optimized medium, sorbent production was improved three folds in comparison with the basal medium. In the jar fermenter, the highest sorbent production was obtained at 60 h cu1tivation time and the amount of biosorbent SK3l at that time was 9.2 g/$m\ell$.
Human cytomegalovirus (HCMV) replication and $Ca^{2+}$ response in human cell lines of neuronal origin were investigated. SK-N-SH (neuroblastoma cells) and A172 cells (glioblastoma cells) were used. SK-N-SH cells were permissive for HCMV multiplication with a delay of one day compared to virus multiplication in human embryo lung (HEL) cells. The delay of HCMV multiplication in SK-N-SH cells appeared to be correlated with a delay in the $Ca^{2+}$ response. The cytoplasmic free $Ca^{2+}$ concentration ($[Ca^{2+}]_i$) began to increase at 12 h p.i. in HCMV-infected SK-N-SH cells, while $[Ca^{2+}]_i$ increase in HCMV-infected HEL cells was observed as early as 3 h p.i. On the whole, the level of the increase in $[Ca^{2+}]_i$ in SK-N-SH cells was about 30% of that in HEL cells. On the other hand, in A172 cells infected with HCMV, neither production of infectious virus nor detectable increase in $[Ca^{2+}]_i$ was observed. Treatment with TPA of HCMV-infected SK-N-SH cells resulted in $[Ca^{2+}]_i$ increase at 6 h p.i. The stimulatory effect of TPA on HCMV- induced $[Ca^{2+}]_i$ increase continued until 12 h p.i., but TPA failed to stimulate the $Ca^{2+}$ response in SK-N-SH cells at 24 h p.i., suggesting that the effect of TPA had disappeared in SK-N-SH cells at that time point. In conclusion, SK-N-SH cells are permissive for HCMV replication and the delay in $Ca^{2+}$ response may be a consequence of the lower responsiveness of SK-N-SH cells than HEL cells to HCMV infection.
The insulin-mediated Ras/mitogen-activated protein (MAP) kinase cascade was examined in SK-N-BE(2) and PC12 cells, which can and cannot produce reactive oxygen species (ROS), respectively. Tyrosine phosphorylation of the insulin receptor and insulin receptor substrate 1 (IRS-1) was much lower in SK-N-BE(2) cells than in PC12 cells when the cells were treated with insulin. The insulin-mediated interaction of IRS-1 with Grb2 was observed in PC12 but not in SK-N-BE(2) cells. Moreover, the activity of extracellular-signal-related kinase (ERK) was much lower in SK-N-BE(2) than in PC12 cells when the cells were treated with insulin. Application of exogenous $H_2O_2$ caused increased tyrosine phosphorylation and Grb2 binding to IRS-1 in SK-N-BE(2) cells, while exposure to an $H_2O_2$ scavenger (N-acetylcysteine) or to a phophatidylinositol-3 kinase inhibitor (wortmannin), and expression of a dominant negative Rac1, decreased the activation of ERK in insulin-stimulated PC12 cells. These results indicate that the transient increase of ROS is needed to activate ERK in insulin-mediated signaling and that an inability to generate ROS is the reason for the insulin insensitivity of SK-N-BE(2) cells.
목적 : 이 연구는 Vipera lebetina turanica의 사독약침액(蛇毒藥鍼液)(Snake venom toxin, SVT)이 인간 신경아세포종의 암세포주인 SK-N-MC 세포에서 암세포성장의 억제 및 그 기전에 대하여 살펴보고자 하였다. 방법 : SVT를 처리한 후 SK-N-MC의 성장억제를 관찰하기 위해 CCK-8 assay와 LDH assay를 시행하였고, apoptosis 평가에는 세포형태의 관찰과 DAPI, TUNEL, Annexin V-PI double staining assay 및 cell detachment assay를 시행하였다. 세포자멸사 관련 세포기전을 보기 위하여 세포주기, 세포내 칼슘량, 세포내 활성산소량 및 미토콘드리아의 세포막전위 변화를 측정하였고, DNA fragmentation assay를 시행하였으며, 세포자멸사 조절 단백인 Bax, Bcl-2, caspase-3, -9의 발현 변화 관찰에는 western blot analysis를 시행하였다. 결과 : SK-N-MC 세포에 SVT를 처리한 후, 신경아세포종 세포의 성장, Apoptosis의 유발 및 기전에 영향을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. SVT를 처리한 SK-N-MC 세포 관찰에서 $20{\mu}g/m{\ell}$ SVT 처리가 암세포성장의 유의한 억제를 나타내었다. 세포독성 관찰에서 SVT처리는 처리하지 않은 것에 비하여 증가를 나타내었다. 2. 세포자멸사 평가에서 SVT를 처리한 SK-N-MC 세포는 세포자멸사의 특징적 형태를 나타내었다. TUNEL assay에서는 세포자멸사 활성세포가 미약하게 나타난 반면 cell detachment assay와 Annexin V-PI double staining에서는 각각 세포박리와 세포자멸사 활성세포의 유의한 증가를 나타내었다. 3. 세포자멸사 관련 세포기전연구에서 SVT를 처리한 SK-N-MC 세포의 세포주기, 세포내 칼슘량 및 DNA fragmentation에는 유의한 변화가 관찰되지 않은 반면 세포내 활성산소 양은 유의한 증가를 나타내었고, 그에 따른 미토콘드리아 세포막 전위의 유의한 변동이 관찰되었다. 4. SVT를 처리한 SK-N-MC는 세포자멸사 관련 단백 발현에서 caspase-9에 대해 유의한 증가를 나타내지 않았으나 Bax 및 caspase-3의 유의한 증가와 Bcl-2의 유의한 감소를 나타내었다. 결론 : 이상의 결과는 SVT가 세포내 활성산소를 증가시키므로 미토콘드리아의 세포막전위에 변화를 일으켜 인간 신경아세포종 세포주인 SK-N-MC의 세포박리와 유관한 세포자멸사를 유발하므로 증식억제 효과가 있음을 입증한 것이다.
The objective of this work is to investigate and compare several functional properties of lactic acid bacteria (LAB), Lactobacillus casei SK-7 isolated from home-made yogurt and Lactobacillus bulgaricus YK-11 from commercial yogurt. Initially, physiological and biochemical properties of SK-7 and YK-11 were characterized. Phylogenetic analysis using 16S rRNA sequencing were performed to identify the strains, and the strain could be assigned to Lactobacillus casei and Lactobacillus bulgaricus, designated as L. casei SK-7 and L. bulgaricus YK-11. Phylogenetic tree of SK-7 and YK-11 was plotted based on 16S rRNA sequence comparisons. Production of lactic acid and organic acid, and pH changes in the cultures of SK-7 and YK-11 were monitored during 72 h. During the incubation period, several functional properties of L. casei SK-7 and L. bulgaricus YK-11 were examined. L. casei SK-7 and L. bulgaricus YK-11 cultures eliminated 93.9% and 88.2% of nitrite, respectively. Antioxidant activity of cultural supernatants of SK-7 and YK-11 were 62.6%, 54.9%, and activity of ${\beta}$-galactosidase were 14.9 units/mg and 13.1 units/mg, respectively. The antimicrobial activities were examined with 20-fold concentrated culture supernatants from the cultures of SK-7 and YK-11. The activities of SK-7 supernatants were clearly observed against all microorganisms in this work, whereas no activities were observed in YK-11 supernatants. Although it might be conducted additional functional research, functional properties of LAB isolated from home-made yogurt have been shown to be better than those of commercial yogurt in this work.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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